2型糖尿病的中医证型与激酶核因子-KB相关性研究*

何君婷 龚文波

宁波市中医院 浙江 宁波315000

2型糖尿病是一种慢性炎症性疾病[1]。激酶核因子-KB（NF-KB）的激活是糖尿病炎症反应的重要途径和核心指标。在2型糖尿病中医证型与炎症因子相关性研究方面，目前多个研究都认为炎症因子可作为2型糖尿病进行中医分型的重要客观指标。本研究拟从NF-KB炎症通路激活水平来研究2 型糖尿病气虚、阴虚、气阴两虚证三个基本中医证型之间炎症反应的异同，以期为进一步探讨中医益气养阴法改善2 型糖尿病炎症反应的机制提供依据，同时对指导临床中医辨证治疗糖尿病有较大意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取2016年至2017年宁波市中医院内分泌科门诊就诊2型糖尿病患者作为研究对象，根据样本量公式估算，收集大约275 例病例纳入本次研究。通过规范化的四诊采集、判定，选取气虚证、阴虚证、气阴两虚证共202 例作为3 个试验组，并选取本院体检中心健康人群73例为对照研究。其中对照组男性37例，女性36 例；年龄52.1±8.1 岁；体重指数（BMI）为22.12±2.86。气虚组共68 例，男性35 例，女性33 例；年龄54.3±8.8 岁；病程5.21±2.18 年；体重指数（BMI）为23.32±3.06。阴虚组共62例，男性30例，女性32例；年龄55.3±8.6 岁；病程6.81±2.73 年；体重指数（BMI）为22.72±2.87。气阴两虚组共72 例，男性38 例，女性34 例；年龄52.3±7.9 岁；病程5.76±3.35 年；体重指数（BMI）为22.09±2.48。经比较，4 组患者的一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 诊断与排除标准：分述如下。

1.2.1 2 型糖尿病诊断标准：参照1999 年WHO 推荐的诊断标准：空腹血糖(FPG)7.0mmol/L；或糖耐量试验(OGTT)11.1mmol/L；或随机血糖11.1mmol/L。

1.2.2 排除标准：①糖尿病急性并发症，如糖尿病酮症、糖尿病高渗性昏迷；②糖尿病各种应激状态：如感染、创伤、大出血等；③糖尿病其他兼症（如肿瘤、免疫系统或血液系统疾病者）；④患者因严重心脑肾并发症者；⑤妊娠或哺乳期妇女。

1.2.3 中医证候判定标准：参照《中药新药临床研究指导原则》《中西医结合糖尿病诊疗标准》《消渴病（糖尿病）中医分期辨证与疗效评定标准》的标准拟定：①气虚证主症：神疲乏力，少气懒言，汗出气短，脉细无力；次症：自汗，怔忡健忘，舌淡或淡胖。符合2项主症及1项次症即可诊断。②阴虚证主症：咽干口渴，怕热汗多或有盗汗，手足心或五心烦热，舌红、苔薄黄或薄白；次症：消谷善饥，形体消瘦，大便秘结，细数。符合2项主症及1项次症即可诊断。③气阴两虚证主症：神疲乏力，汗出气短，五心烦热，咽干口渴，舌红少津，苔薄或白腻；次症：怔忡健忘，多食易饥，心悸失眠，脉细或濡细。符合2 项主症及1项次症即可诊断。

1.3 实验室指标测定：采集所有研究对象清晨空腹静脉血5ml，运用免疫印迹实验(western blotting)测定NF-KB 蛋白表达水平，具体操作严格按试剂盒说明书进行，NF KappaB p65 ELISA 试 剂 盒 购 自abcom 公 司（ab176648），并同时测定血清糖化血红蛋白（HbA1C），C反应蛋白（CRP）等相关指标。

1.4 统计学方法：计数资料以例数表示，用χ2检验比较各组炎性因子的水平差异，计量资料符合正态分布的数据以±s表示，非正态分布的数据行对数转换后表示为±s再进行统计分析。两组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，均以P＜0.05 为有显著性差异。

2 结果

2.1 4 组FPG、HbA1C 及hs-CRP 水平比较：气阴两虚组、气虚组、阴虚组hs-CRP、FPG、HbA1c 均显著高于对照组(P＜0.05)；气阴两虚组、气虚组、阴虚组间hs-CRP、FPG、HbA1c无显著差异(P＞0.05）,见表1。

表1 4组FPG、HbA1C及hs-CRP水平比较（±s）

表1 4组FPG、HbA1C及hs-CRP水平比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别阴虚组气虚组气阴两虚组对照组例数62 68 72 73 FPG（mmol/L）8.15±2.87*7.67±2.54*7.86±2.45*4.65±0.47 HbA1C（%）7.73±1.53*7.23±1.24*6.95±1.05*4.65±0.98 hs-CRP（mg/L）9.07±4.12*8.67±3.78*9.67±4.89*5.67±2.54

2.2 4 组患者的NF-KB 水平比较：气阴两虚组NF-KB 1710.03±287.23ng/ml，明显高于对照组的1448.96±287.23ng/ml 及气虚组的1543.82±342.38ng/ml（P＜0.01），高于 阴 虚组的1543.82±342.38ng/ml(P＜0.05)。气虚组患者NF-KB 水平与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；阴虚组患者NF-KB 水平与对照组比较差异亦无统计学意义(P＞0.05）。

3 讨论

动物实验表明,过度表达诱导炎症的因子可同时引起数个代谢性危险因素,导致肥胖、脂肪肝及糖耐量受损[2],予抗炎治疗后,这些危险因素可部分得到改善[2-3]。抗炎治疗糖尿病已取得可喜的进展，白细胞介素1受体抗体改善胰岛功能[4]；黄连素治疗伴脂代谢紊乱的2 型糖尿病有效[5]；因此值得关注和研究抗炎治疗糖尿病。

NF-KB 是1986 年由Sen 和Baltimore 在B 细胞内发现的调节基因转录的关键因子之一,是一系列异二聚体家族的总称，是一种特异性的转录因子[6]。在大多数细胞中，NF-KB 构成同源或异源二聚体以未激活状态与IkBs 结合存在于细胞质中[7]。当受到刺激因子如病毒、放射线、氧自由基、细菌脂多糖(LPS)、TNF-α 等刺激时，NFKB-IKBs 复合物被激活，NF-KB 解离出来并转移至细胞核，与相应位点特异性结合促进相应基因的转录，从而启动和调节免疫反应，介导细胞黏附、分化、增殖、凋亡和炎症反应，并在各种免疫炎症性疾病和肿瘤的发生发展中发挥重要作用[8-9]。现有研究表明，NF-KB 在血中的表达水平可提示炎症反应，在本研究中，气阴两虚患者的NF-KB水平显著高于其它组。

气虚或气机不利是糖尿病的基本病机，在疾病发生发展过程中，会演变为阴虚、气阴两虚证[10]，临床实践中，应用益气、养阴、益气养阴法治疗2 型糖尿病，均能收到较好疗效，而气阴两虚证出现的较气虚证和阴虚证在病程上相对较晚。明代医家楼英所著的《医学纲目》中指出“盖肺藏气，肺无病则气能管摄津液之精微，津液之精微者收养筋骨之血脉，余者溲，肺病则津液无气管摄，津微亦随之溲下”，结果是气阴俱损，形成气阴两虚之体质。国内相关研究也表明，应用益气养阴法能够抑制机体炎症因子[11-12]。结合本研究结果，可以推论在2 型糖尿病的发生发展过程中，气阴两虚证可能是2型糖尿病患者机体产生明显炎症反应的一个阶段，其炎症因子的表达较单纯的气虚和阴虚阶段均更明确，临床中医治疗2 型糖尿病应当辨证论治，分清气虚、阴虚、气阴两虚的不同，辨证处方，才能取得良好疗效。NF-KB 的表达水平能否作为气阴两虚型2型糖尿病的辨证客观依据，尚需多中心、大样本的研究予以证实。