河南省猪球虫病流行病学调查分析

程俊贞，刘光辉，闫若潜，赵胜杰，房大学

（1.许昌市动物疫病预防控制中心，河南 许昌 461000；2.河南省动物疫病预防控制中心，郑州 450008）

猪球虫病是由猪等孢球虫（Isospora suis）和某些艾美耳属（Eimeria）球虫寄生在哺乳期及新近断奶仔猪小肠上皮细胞所引起一种寄生性原虫病，临床上以腹泻为主要症状[1-4]。哺乳仔猪患球虫病是养猪场的常见问题[5]。发病主要出现在8～15日龄仔猪，感染日龄越小，病情越严重[5-7]。发病仔猪出现腹泻，粪便为黄色到灰色，开始时粪便松软或呈糊状，随着病情加重变为液状，并且发出腐败乳汁样酸臭味。仔猪吮乳减少，被毛粗乱，脱水，增重下降，导致新生仔猪死亡率增加，断奶时营养不良，很多仔猪成了僵猪，给养猪生产造成了很大的经济损失[1，6-9]。

河南省是我国的养猪大省之一，为掌握河南省仔猪球虫病目前的流行状况及种类分布，以及为制定切实可行的预防措施提供依据，笔者于2018年8—11月和2019年3—5月选取河南省豫东、豫西、豫南、豫北和豫中的部分市县的25个规模化猪场及专业户和6个农村散养户猪球虫感染情况和种类分布情况进行了初步的调查，其结果如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂 饱和糖-盐水溶液：380 g氯化钠与500 g蔗糖溶解于1 L水中，加热溶解，冷却备用。比重为1.226。

1.1.2 器材 显微镜、80目金属筛、130目金属筛、漏斗、离心机、铁架台、天平、烧杯、玻璃棒、盖玻片、载玻片、胶头滴管、冰箱等。

1.2 方法

1.2.1 样品采集 采用直肠取粪法，采集1～10日龄、11～20日龄、21～30日龄、31～40日龄的仔猪及41日龄以上仔猪、肥育猪等粪样或收集刚排出的新鲜粪便约50～100 g，分别装入干净塑料袋中，标注猪场名称、编号、猪的年龄，置4℃冰箱内备查。

1.2.2 样品处理

（1）定性检查卵囊。用饱和糖-盐水溶液漂浮法检查球虫卵囊。取2 g粪便样品，用10 mL自来水搅拌均匀后，加入40 mL自来水搅拌均匀，用80目和130目金属筛双层过滤，将滤液置于离心管中以3 000 r/min离心10 min，取出离心管弃去上清液，之后再加入50 mL左右饱和糖-盐水溶液用干净的玻璃棒搅拌均匀，再以3 000 r/min离心10 min，然后用吊环吊一环上清液涂片，在高倍显微镜（400×）下观察，根据卵囊大小、形态进行查找。

（2）定量检查每克粪便卵囊数（OPG值）。用麦克马斯特氏计数法[3]进行计数：称取2 g粪便置100mL烧杯中，加10mL饱和盐水，将粪便捣碎成泥状，再加饱和盐水至60 mL，混匀；用60目铜筛过滤，用胶头滴管取滤液注入麦克马斯特氏计数室，静置2 min后在100×显微镜下检查，计数1 cm2刻度中的虫卵总数，求两个刻室中虫卵的平均数（该小室中的容积为1 cm×1 cm×0.15 cm＝0.15 cm3），乘以200即为每克粪便卵囊数（OPG）。

1.2.3 卵囊收集 用饱和糖-盐水溶液漂浮法收集球虫卵囊。将阳性粪样加4～5倍量水搅拌均匀，在装有80目和130目双层金属筛的漏斗中过滤，将滤液置于离心管中以3 000 r/min离心10 min，取出离心管弃去上清液，再加入50mL左右饱和糖－盐水溶液用干净的玻璃棒搅拌均匀，再以3 000 r/min离心10 min，然后用专门收集卵囊用的铁丝圈网多次蘸取上层表面液在装有100 mL左右自来水的烧杯中涮洗，即将卵囊收集到烧杯中制成卵囊混悬液；再将卵囊混悬液以3 000 r/min离心10 min，取出离心管弃去上清液，离心管中便为球虫卵囊。

1.2.4 卵囊培养 将收集到的球虫卵囊，加入2.5%重铬酸钾溶液，取1～2滴收集的新鲜卵囊液置18mm×18mm盖玻片上，再覆以同样大小盖玻片，四周用凡士林封闭后置载玻片上，28℃恒温箱中培养，每隔2 h用显微镜（400×）观察其孢子化程度，记录结果并显微拍照。其余卵囊置平皿于27～28℃的恒温箱中培养观察直至80%卵囊完全孢子化，期间保持深度0.5 cm，每天用吸管吹打2～3次，计数后置于4℃冰箱中保存。

2 结果与分析

2.1 猪场及散养户猪球虫感染情况

调查商丘、漯河、许昌、禹州、洛阳、新安、偃师、宜阳、郑州、淇县、鹤壁、嵩县、伊川、汝阳等14个地、市县的25个具有代表性的规模化猪场及专业户和6个地市农村散养户，共检查2 051份样品，猪球虫及猪等孢球虫感染情况的具体结果见表1和表2。

表1 猪场及散养户猪球虫感染情况

表2 猪场及散养户猪等孢球虫感染情况

表2 猪场及散养户猪等孢球虫感染情况（续）

2.2 不同猪场及散养户各日龄段猪球虫感染情况

在25个猪场及专业户和6个地市的散养户中，除了偃师某猪场2和偃师散养户的球虫感染为阴性，其余猪场的猪球虫感染均为阳性。感染日龄主要集中在11～20日龄，猪场阳性率为61.29%，球虫的最高感染率为83.33%，平均感染率为23.29%；其次在1～10日龄，猪场阳性率为41.94%，球虫的最高感染率为66.67%，平均感染率为17.71%；在21～30日龄，猪场阳性率为35.48%，球虫的最高感染率为85.71%，平均感染率为13.35%；在31～40日龄，猪场阳性率为38.71%，球虫的最高感染率为80%，平均感染率为7.04%；在41日龄以上猪场阳性率为48.39%，球虫的最高感染率为37.50%，平均感染率为7.95%。

2.3 不同猪场及散养户各日龄段猪等孢球虫感染情况

在25个猪场及专业户和6个地市的散养户中，除了洛阳某猪场1、偃师某猪场2、洛阳专业户2、嵩县专业户、宜阳散养户和偃师散养户的等孢球虫感染为阴性，其余猪场的猪等孢球虫感染均为阳性。感染日龄也主要集中在11～20日龄，猪场阳性率为61.29%，猪等孢球虫的最高感染率为66.67%，平均感染率为19.52%；其次在1～10日龄，猪场阳性率为38.71%，猪等孢球虫的最高感染率为50%，平均感染率为14.39%；在21～30日龄，猪场阳性率为35.48%，猪等孢球虫的最高感染率为42.86%，平均感染率为7.95%；在31～40日龄，猪场阳性率为19.35%，猪等孢球虫的最高感染率为20%，平均感染率为2.13%；在41日龄以上的感染率为0。

2.4 各日龄段猪球虫和等孢球虫感染情况

在所有调查猪场中，球虫感染日龄主要集中在11～20日龄，感染率为23.29%；其次在1～10日龄，感染率为17.71%；再次在21～30日龄，感染率为13.35%；在31～40日龄，感染率为7.04%；在41日龄以上，感染率为7.95%；平均感染率为12.14%。而等孢球虫感染日龄也主要集中在11～20日龄，感染率为19.52%；其次在1～10日龄，感染率为14.39%；在21～30日龄，感染率为7.95%；在31～40日龄，感染率为2.13%；在41日龄以上，感染率为0；平均感染率为6.53%。

2.5 猪场及散养户猪球虫感染强度（OPG值）

由表3可知，在25个猪场及专业户和6个地市的散养户中，总的感染强度不大。猪球虫感染强度最大的是2号猪场（漯河某猪场），为46 400；其次是16号猪场（淇县某猪场1），为32 400；除了12号（偃师某猪场2）和31号（偃师散养户）外，感染强度最小的是13号（偃师某猪场3），为200；平均强度为9 593。猪等孢球虫感染强度最大的是2号猪场（漯河某猪场），为46 400；其次是16号猪场（淇县某猪场1），为28 600；除了7号猪场（洛阳某猪场）、12号猪场（偃师某猪场2）、23号猪场（洛阳专业户2）、25号猪场（嵩县专业户）、27号（宜阳散养户）和31号（偃师散养户）外，感染强度最小的是13号（偃师某猪场3），为200；平均强度为6 284。

表3 猪场及散养户猪球虫总的感染强度和猪等孢球虫感染强度 个

3 结论与讨论

3.1 11～20日龄仔猪球虫感染率最高

调查和试验结果表明，猪球虫主要感染1～20日龄仔猪，尤其是11～20日龄的仔猪，感染率为23.29%，最高感染率可达83.33%，21日龄以后感染率逐渐降低；等孢球虫感染日龄也主要集中在11～20日龄，感染率为19.52%，最高感染率为66.67%；41日龄以上则不易感，调查的结果是41日龄以上感染率为0。据有关资料报道：仔猪球虫主要感染8～15日龄的仔猪[5-7]。本研究结果与之相比，易感日龄有扩大化的趋势，说明仔猪年龄越小，对球虫越易感。

3.2 猪球虫病在河南省普遍存在

猪球虫平均感染率为12.14%，猪等孢球虫平均感染率为6.53%。在25个猪场及专业户和6个地市的散养户中，除了12号猪场（偃师某猪场2）和31号（偃师散养户）的球虫感染为阴性，其余猪场的猪球虫感染均为阳性。在阳性场中，猪球虫感染率可高达40.43%（淇县某猪场3）和35.29%（淇县某猪场1），感染率最低为0.84%（洛阳某猪场）。说明猪球虫病在河南广泛存在，而且感染率挺高。不同猪场间球虫感染率存在显著的差别，其原因是：洛阳某猪场为新建的大型养殖场，没有受过猪球虫的污染，这就大幅减少了猪的感染机会，饲养管理和卫生条件比较好，猪的粪便采取水冲式，且及时清扫粪便，再加上严格的消毒措施，所以感染率较低。淇县某猪场3和淇县某猪场1虽然规模比较大，但其是个老场，况且饲养管理和卫生条件都比较差，猪的粪便不能及时清理，以前曾经发生过球虫感染病例，而且一旦发生球虫感染，卵囊就很难清除，所以此猪场的设施以及用具都是污染源，因而其感染率比较高。可见猪场球虫的感染情况与猪场的饲养管理和环境卫生条件有密切的关系。

在所有被调查的猪场中，散养户的平均感染率为11.91%，而猪场的平均感染率则为12.54%，说明与散养户相比，猪场的球虫感染率较高，其原因可能是猪场的养殖密度大，猪球虫更易传播。说明猪球虫的传播与养殖密度也相关，养殖密度大，猪群之间更易接触，给猪球虫的传播创造有利条件；反之亦然。

据周继贤等（1996）[10]报道，河南省的仔猪球虫感染率为43.4%，猪等孢球虫的感染率为2.54%。这次我们对河南省调查结果为：仔猪球虫平均感染率为12.14%，猪等孢球虫平均感染率为6.53%，说明河南省的仔猪平均球虫感染率虽然有所降低，但等孢球虫的感染率有所升高。在仔猪球虫病中，猪等孢球虫的致病性较强，因此对仔猪球虫病要引起高度重视。

3.3 各猪场之间仔猪球虫的感染强度存在差异

本调查结果显示，猪球虫病在河南省广泛存在，感染率也较高，但是各猪场之间仔猪球虫的感染强度大小不等，猪球虫感染强度最大为46 400，最小为200，平均感染强度为9 593；猪等孢球虫感染强度最大为46 400，感染强度最小也为200，平均感染强度为6 284。其原因可能是近年来，人们对仔猪球虫病越来越重视，大量抗球虫药应用于生产中，对抑制球虫病的传播起到一定的作用。虽然仔猪球虫的感染强度不大，但是其致病力很大，我们不能掉以轻心。