社区和医院环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植影响研究

徐洲，杜陈，金钊，李旺胜，张楚微，王书菲，肖娜，唐一通

摘要：目的：了解社区和医院两种不同环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）定植的影响。方法：用鼻拭子法采集108例未进入临床实习医学生和99例正进行临床实习医学生鼻腔样本，用金黄色葡萄球菌显色培养基培养筛查金黄色葡萄球菌，并通过PCR方法检测SCCmecA基因，进行MRSA的鉴定。比较两个群体中MRSA携带率的差异，分析社区和医院环境对MRSA在人鼻腔定植的影响。结果：108例未进入临床实习医学生共检出金黄色葡萄球菌（SAU）菌株44例，MRSA菌株8例，MRSA检出率7%，99例进入临床实习医学生共检出SAU菌株59例，MRSA菌株21例，MRSA检出率21%。实习组MRSA携带率是未实习组的2.86倍，两种不同环境下造成的MRSA阳性率不同具有统计学意义（χ2=8.171，P<0.05）。结论：社区和医院两种不同环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植有显著影响，长期处于医院环境可使鼻腔MRSA定值率显著提高。

关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;鼻拭子;社区;医院

中图分类号：C915     文献标志码：A     文章编号：1674-9324（2020）01-0110-02

金黄色葡萄球菌（SUA）是常見病原菌之一，由于抗菌药物的大量使用，耐甲氧西林金黄色葡萄球（MRSA）的感染率不断攀升[1，2]，严重威胁到患者的生命安全，成了临床治疗的一大难题[3]。本研究通过采集处于医院和社区环境中健康医学生群体鼻拭子样本，进行金黄色葡萄球菌和MRSA的培养与鉴定，研究不同环境因素对MRSA在人群鼻腔定植的影响。

一、资料与方法

1.样本采集。收集处于医院环境（湖北文理学院附属医院）的临床实习生的鼻拭子样本99例，同时收集未进入临床的在校生学生鼻拭子样本108例，以上样本均为来自不同个体的非重复性样本，同时选取ATCC25923和ATCC43300作为SAU和MRSA阳性对照菌株。

2.金黄色葡萄球菌分离培养。按试剂盒要求配制金黄色葡萄球菌显色培养基（CHROMagarTM法国科玛嘉），对鼻拭子样本进行SAU的分离培养，37℃，恒温培养48小时，红色或粉红色菌落为金黄色葡萄球菌，并挑出保存。

3.MRSA菌株鉴定。将筛选金黄色葡萄球菌接种至哥伦比亚血琼脂平板，37℃，恒温培养24小时。利用Ezup柱式细菌基因组DNA抽取试剂盒（上海生工）提取基因组，通过Taq PCR扩增试剂盒（上海生工）对提取基因组进行SCCmecA基因扩增，进行MRSA菌株的鉴定[4]。扩增引物为：forward：5-TCCAGATTACAACTTCACC-

AGG-3;Reverse：5-CCACTTCATATCTTGTAACG-3。扩增体系为：模板3μl，引物2μl，2×Master mix 10μl，ddH2O 5μl 。扩增条件为：95℃ 4min;95℃ 45 S，45℃ 45S，72℃ 60S;30循环，72℃ 5min。将扩增产物在2%琼脂糖凝胶电泳检测中扩增条带。

4.统计分析。利用SPSS17.0对两个群体SA和MRSA的检出率进行统计，分析社区和医院环境对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）对人鼻腔定植的影响。

二、结果

1.菌株分离培养。在金黄色葡萄球菌固体显色培养基上长出的红色或粉红色菌落为SAU，从99例临床实习组样本中筛检出SAU59例，108例未进入临床组中筛检出SAU44例。图1为两例在显色培养基上分离培养的SAU菌株。

1：临床实习组样本分离SAU菌株;2：未进入临床组样本分离SAU菌株。

2.MRSA基因检测。对分离SAU菌株提取基因组，进行琼脂糖凝胶电泳检测，如图2所示。提取分离SAU菌株基因组，进行SCCmecA基因扩增，琼脂糖凝胶电泳检测以鉴定MRSA菌株。未进入临床实习组44例SAU中检出MRSA菌株8例，临床实习组59例SAU中检出MRSA菌株21例。图3所示为MRSA菌株SCCmecA基因扩增电泳检测结果，基因组能扩增出162 bp的目的片段。

3.统计分析。从99例临床实习组学生样本中共检出金黄色葡萄球菌（SAU）59例，检出率为59.6%;108例未进入临床组学生样本共检出金黄色葡萄球菌（SAU）样本44例，检出率为40.7%。临床实习组SAU阳性率是未进入临床组样本的1.463倍，两组间具有统计学意义（χ2=7.346，P<0.05）。从99例临床实习组学生样本中共检出MRSA 21例，检出率为21.2%;从108例未进入临床组学生样本检共出MRSA 8例，检出率为7.4%。临床实习组MRSA阳性率是未进入临床组样本的2.86倍，两组间具有统计学意义（χ2=8.171，P<0.05）。

三、讨论

金黄色葡萄球菌是常见的革兰阳性菌之一，致病能力强，长期以来对社区和医院人群造成严重感染[5]。由于各种抗菌药物的广泛使用，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染率也在逐渐升高。金黄色葡萄球菌广泛存在于人体的黏膜、皮肤和鼻腔等处，易于传播。已经有研究表明医院环境更容易使金黄色葡萄球菌定植在人体上。本研究亦表明，相较于社区环境，医院环境可以明显提高SAU和MRSA在人鼻腔的定植率。在医院环境中，病原菌的感染传播相比于其他社区等环境下更为容易，对于长期生活于医院环境的人群，如长期住院的病人等，更应加强对其环境卫生的消毒灭菌，尽量减少患者在医院内受到感染。临床医务人员在工作时应加强对感染卫生和手术步骤，消毒隔离的监控。同时，社区卫生环境与医院卫生环境之间的建设还应得到加强，尽量控制耐药菌在医院与社区之间的传播。

参考文献：

[1]黄健云，孙红.耐甲氧西林表皮葡萄球菌感染情况调查及药敏分析[J].中国社区医师（医学专业），2012，16（14）：48-49.

[2]趙红庆，徐萍，周声安，胡守奎.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌不同来源株耐药性及流行特征分析[J].疾病监测，2017，7（31）：603-608.

[3]窦学梅，宋巍，高文旃，等.MRSA医院感染及耐药性研究[J].中华医院感染学杂志，2012，22（9）：1943-1945.

[4]Oliveira DC，de Lencastre H.Multiplex PCR strategy for rapid identification of structural types and variants of the mec Elements in methicillin-resistant Staphylococcus aureus.Antimicrob Agents Chemother，2002，46（7）：2155-2161.

[5]韦柳华，周定，程红革，等.综合医院金黄色葡萄球菌的耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2012，22（8）：1712-1713.

Effect of Community and Hospital Environment on Colonization of Methicillin-resistant Staphylococcus Aureus in Nasal Cavity

XU Zhou，DU Chen，JIN Zhao，LI Wang-sheng，ZHANG Chuo-wei，WANG Shu-fei，XIAO Na，TANG Yi-tong*

（Hubei University College of Arts and Science Medical College，Xiangyang，Hubei 441053，China）

Abstract：Objective：to investigate the effects of community and hospital environments on （MRSA） colonization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） in nasal cavity.Methods：nasal cavity samples were collected from 108 non-clinical medical students and 99 medical students in clinical practice by nasal swab method.Staphylococcus aureus was screened by culture medium of staphylococcus aureus.The SCCmecA gene was detected by PCR and identified by MRSA.The difference of MRSA carrier rate between two populations was compared，and the influence of community and hospital environment on MRSA colonization in human nasal cavity was analyzed.Results：108 cases There were 44 cases of staphylococcus aureus（SAU），8 cases of MRSA，7% of MRSA，and 59 cases of SAU，21 cases of MRSA and 21% of MRSA.The rate of MRSA was 2.86 times higher than that of the untrained group，and the positive rate of MRSA in the two different environments was statistically significant （Sup2 = 8.171，P <0.05）.Conclusion：the two different environments of community and hospital have significant effect on the colonization of methicillin-resistant Staphylococcus aureus in the nasal cavity.The long-term hospital environment can increase the setting rate of MRSA in the nasal cavity.

Key words：methicillin-resistant Staphylococcus aureus;nasal swab;community;hospital