动物性食品中磺胺类药物残留检测方法

王邦国

（靖远县农产品质量安全检验检测管理站 730699）

1 分析方法

1.1 处理样品的方法 液相萃取法是样品处理方法中最经典的。 由于磺胺类药物在非极性有机溶剂中不易溶解，而在极性有机溶剂中易溶解，通常工作人员采用CH2Cl2、C3H6O、甲基氰以及醋酸乙酯等作为萃取液。 由于某些有机溶剂能够让样品蛋白丧失活性，因此，大力发展固相萃取法势在必行，有利于更快速、顺利地萃取与蛋白结合的磺胺类药物残留。 固相萃取法优势很多，比如可操作性强、装置简单、适用范围较为广泛等。 其中阳离子交换树脂以及C18 等是最常见固相萃取装置。

基质固体分散技术和超过滤方法是近年来比较流行的萃取方法。 超过滤法能够有效解决共萃取干扰、乳胶产生等很多液相萃取技术问题，同时简化检测步骤，提升检测结果的准确性，减少分析费用。MSPD 的制备工艺为：将样品与C18 柱填料混合，装柱，之后利用正己烷清洗柱子，及时去掉脂质化合物，最后利用二氯甲烷清理掉被吸附的组分，保留高极性杂质。 相对于传统样品处理方法，MSPD 具有如下优势：样品处理方法效率较高，而且操作简单；有效抑制和消除了乳化作用；溶剂消耗较少。 此外，超临界流体萃取（SFE）也可用于从样品中提取磺胺类药物。

1.2 样品净化方法 在进行色谱分析之前，需要净化和浓缩样品， 以防止样品基质中的复杂成分严重破坏色谱仪器和干扰目标分析物。 其中薄层色谱、柱色谱以及固相萃取等都是常见方法。 绝大多数净化方法和样品基质以及萃取过程都与萃取剂使用关联不大。 其最终目的是去除干扰， 选择性地提取磺胺类药物。 磺胺类药物一般以离子化合物的形式存在。 因此，将水相的pH 值调节到最佳范围以获得较高的回收率是磺胺类药物净化工艺的关键所在。

1.3 检测技术 现阶段，荧光检测、质谱以及紫外-可见检测是磺胺类药物的常用的检测技术， 能够适用于各种磺胺类药物的检测，尤其是对含有各种磺胺类药物的样品的分析，但其选择性不高。 紫外-可见检测和GC/MS 需要在柱前或柱后进行衍生反应。 而质谱是不需要衍生的，因此得到了广泛的应用。

2 常见的磺胺类药物残留检测方法

2.1 微生物法 现阶段，理化分析、免疫分析以及微生物学法是磺胺类药物残留检测的常见方法。 微生物法是一种适用范围非常广泛的方法。 主要利用SAS 有效抑制特异微生物生理功能和代谢， 从而定性或定量测定样品中SAS 的残留量。 由此可见，此方法可操作性非常强、成本费用较低，但也存在一定不足，比如灵敏度低、敏感性差以及容易受其他抗生素干扰。 因此，很难定性定量地测定，从而无法达到测定标准要求。

2.2 免疫分析法 早在20 世纪80 年代，SAS 残留免疫分析就已经诞生，是一种基于靶点和抗体结合的检测方法。 其中放射免疫分析、荧光免疫分析以及酶联免疫分析都属于免疫分析法。酶联免疫吸附试验（ELISA）是当前应用最广泛的药物残留检测方法，不仅分析样本量大，而且灵敏度高，可操作性强等诸多优势。 王喜良等人利用金免疫层析法检测鸡肉内磺胺嘧啶的残留。半定量检测需要在15min 内完成， 检测限为5ng/mL， 并且还发现，此检测药剂并没有与其他磺胺类药物发生交叉反应，且回收率高达71%～95%，但是也存在一定短板，对于多种药物残留检测能力不足，抗体制备较难等，适用范围相对狭窄。

2.3 快速检测法 随着国内市场和进出口贸易对食品安全的日益重视，动物性食品中药物残留超标的现象也时有发生。 由于传统实验室使用药物残留检测技术时，往往对技术人员、实验室环境以及硬件设置要求较高，而且测试时间相对交缠，导致传统的实验室仪器分析测试技术已经无法适用大规模现场测试需求，无法在一般企业和基层食品安全检测部门得到应用。 而现场快速检测技术以其检测灵敏度高、效率高、技术要求低等诸多优势，备受基层工作人员喜爱。 由此可见，磺胺类药物检测已成为时下最为的研究课题，因其操作简单、成本造价低廉、准确度高而闻名。 胶体金免疫层析法是一种可广泛应用于即时检测领域的分析方法。

胶体金免疫层析法（GICC）是一种结合金标记技术、检测技术和免疫层析法的新型固相标记技术。 胶体金颗粒拥有两个非常突出的特性：一是吸附性极强，特别是对免疫球蛋白、酶、血清蛋白等蛋白质分子吸附性极强。 胶体金颗粒能够吸附胶体金标记过的蛋白质；二是金标蛋白结合位点的显色反应，适用于定性和快速检测。

胶体金免疫层析法以胶体金颗粒为抗体标记， 与特定的反应膜位置反应，出现生紫红色。 并能直接观察到相应结果。 基层检测部门和食品企业检测时，可以使用胶体金免疫层析法。 根据胶体金技术，研制了多种磺胺类快速试纸。 与传统的实验室检测方法相比，可以快速检测肉、奶、蜂蜜、动物体液等不同食品基质中磺胺类药物残留，胶体金免疫层析法具有成本造价低、灵敏度高、工艺简单、成本低等诸多优势，而且将其制作成试纸后，不仅方便保存和携带，而且操作简单易行，在磺胺类药物残留的快速检测方面前景一片光明，具有明显优势。

公共卫生和卫生机构最主要的任务是检测动物性食品中磺胺类药物残留情况，要求使用的分析方法必须做到造价成本低、准确度高，使用方便、省时，同时检测限要低于MRLs。 在人类不断努力探索下，相信不久，必然就专研出分析效率高，适用多种磺胺类药物残留检测的分析方法，从而更好地保护人类健康。