贵州青脚麻鸡传染性支气管炎的诊断
2020-02-16陈永惠陈秀娟
陈永惠，刘 渊，陈秀娟
（1.贵州省六枝特区动物科技服务中心 553400；2.贵州省水城县动物疫病预防控制中心 553600）
青脚麻鸡是生活在中国西南片区的肉用地方品种鸡之一，主要特征为青脚、麻羽，体型特征可概括为“一楔”、“二细”、“三麻身”。 “一楔”指母鸡体型象楔形，前躯紧凑，后躯圆大。 “二细”指头细、脚细。 “三麻身”指母鸡背羽面主要有麻黄、麻棕、麻褐三种颜色。 公鸡颈部长短适中，头颈、背部的羽金黄色，胸羽、腹羽、尾羽及主翼羽黑色，肩羽、蓑羽枣红色。 母鸡颈长短适中，头部和颈前1/3 的羽毛呈深黄色。 背部羽毛分黄、棕、褐三色，有黑色斑点，形成麻黄、麻棕、麻褐三种。 单冠直立。 胫趾短细、呈黄色。 成年体重公鸡为2180g，母鸡为1750g。 青脚麻鸡肉质细嫩、营养价值高，具有山区“土鸡”的特色，它适应性强、生长快、成本低。 在西南片区，如四川绵阳、贵州贵阳及六盘水等地农村地区养殖较多， 在部分地区进行遗传基因纯化后作为地方品种得以保种和扩大生产，是当地人们最为喜食的肉食家禽，对地方经济的发展起到不可估量的作用。 但正因为其逐步规模化和产业化发展，使很多疾病也接憧而至，对其地方适应性造成了挑战，特别是易发传染性支气管炎，该病由传染性支气管炎病毒引起，本病据其临床症状分为呼吸道型、肾脏型、生殖型和腺胃型四种，具有极强的传染性，在养鸡生产中极为常见，能够在短时间内引起快速传播，并造成鸡的生长发育不良及大批死亡，危害巨大。
本文就贵州省六枝特区动物科技服务中心接到的创兴养殖场送来的8 只青脚麻鸡病例（其中2 只死亡）进行了系列诊断和分析，现将检查及诊断进行报道，为养鸡生产提供参考。
1 材料与方法
1.1 被检动物与检测试剂 被检动物为贵州省六枝县创兴养殖场于2020 年7 月3 日送来的8 只青脚麻鸡病例（其中2 只死亡）。 检测试剂：RNA 提取试剂盒购自北京世纪元亨有限公司；cDNA 的合成试剂盒为北京康为世纪生产的HiFi-Script cDNA第一链合成试剂盒。
1.2 流行情况 创兴养殖场8000 只33 日龄的青脚麻鸡，免疫过马立克、法氏囊疫苗以及鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗。2020 年7 月3 日送检病鸡时已发病12d 左右，发病一周后开始死亡，第1d 死亡100 多，第2d 死亡300，第3d 死亡400 只，每天死亡几百只，至送检日共死亡1000 多只。
1.3 病鸡临床特征 病鸡出现呼吸困难、张口呼吸，消瘦，无食欲，站立不稳，摇头转圈，拉水样粪便等临床症状。
1.4 病鸡剖检主要病变 对发病鸡进行剖检， 主要解剖病变有：肺部与法氏囊内有黄色干酪样物质，气管出血，心包积液，法氏囊、肾脏、腺胃肿大。
1.5 实验室检测
1.5.1 细菌分离培养鉴定
取送检鸡的肝脏、心脏、脾脏、肾等组织进行细菌分离培养，37℃培养16h。
1.5.2 病原核酸检测
1.5.2.1 样品处理
解剖病鸡，无菌采集病死鸡心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、法氏囊及气管等组织用无菌手术剪剪碎，于研磨器中研磨、匀浆，制备待检样本。
1.5.2.2 病毒核酸提取
按照北京世纪元亨有限公司生产的RNA 快速抽提试剂盒说明书进行总RNA 的提取。
1.5.2.3 cDNA 的合成
用北京康为世纪生产的HiFi-Script cDNA 第一链合成试剂盒进行反转录。
2 结果
2.1 细菌分离培养结果
细菌分离培养结果显示无细菌生长。
2.2 病毒核酸PCR 检测
2.2.1 新城疫病毒PCR 检测
使用新城疫病毒通用型引物对核酸样本进行PCR 检测，结果为阴性。
2.2.2 鸡传染性喉气管炎病毒PCR 检测
使用鸡传染性喉气管炎病毒特异性引物对核酸样本进行PCR 检测，结果为阴性。
2.2.3 传染性支气管炎病毒PCR 检测
使用传染性支气管炎病毒特异性引物对核酸样本进行PCR 检测，结果可以扩增出特异性条带，为阳性。
2.2.4 传染性法氏囊病毒PCR 检测
使用传染性法氏囊病毒特异性引物对核酸样本进行PCR检测，结果为阴性。
2.2.5 鸡毒支原体PCR 检测
使用鸡毒支原体特异性引物对核酸样本进行PCR 检测，结果为阴性。
3 结论与讨论
对送检鸡进行细菌分离，结果为阴性；对送检鸡进行鸡传染性喉气管炎、新城疫、鸡毒支原体、传染性法氏囊病病原核酸检测，结果均为阴性；而进行鸡传染性支气管炎病毒病原核酸为阳性。 结合发病鸡的流行特点、临床症状、剖检病变、细菌培养和病毒核酸检测结果综合分析判断， 该鸡场发生的传染病为鸡传染性支气管炎。
鸡传染性支气管炎1930 年最早发现于美国，1972 年我国首次报道，如今广泛流行于世界各地。 本病由传染性支气管炎病毒引起的急性、高度接触性呼吸道传染病，其中主要血清型是肾型。 潜伏期36h 或者更长，临床表现流鼻涕、因呼吸困难而张口呼吸、咳嗽、喷嚏、甩头、食欲下降或废绝、腹泻、粪便呈黄白色；病鸡主要病变为气管、支气管或喉头有浆液性或干酪样渗出物。死亡率不高， 主要影响产蛋量和蛋品质。 除了鸡能够感染发病外，其他家禽都不会感染，且各个年龄的鸡都能够发生，其中雏鸡较为严重，通常是40 日龄以下的鸡更易发病，发病率可高达95%，死亡率一般为5%，但随毒株变异，毒性增强会致死亡率增加。 在肉鸡饲养过程中，每年都有发生该病，由于该病传播快，死亡率相对较高，往往会严重损害养鸡户的经济效益。 近几年，该病的发病率呈明显升高的趋势，给养鸡生产造成严重影响。 一般认为，对该病除采取常规药物进行预防外，免疫接种是主要和有效的办法。
