2016—2019 年河源市活禽市场外环境禽流感病毒检测数据分析

吴曼菊 高淑萍 黄丰光

（河源市疾病预防控制中心 广东河源 517000）

1 前言

禽流感主要由甲型流感病毒引起，一旦人类产生感染，极易引发严重的并发症，危害人体健康[1，2]。因此，了解活禽市场在外环境禽流感病毒的分布特征对广东省河源市防控禽流感疫情有重要意义。

2 材料与方法

2.1 样本采集

选取河源市2016—2019 年活禽市场外环境禽流感病毒检测数据作为分析对象，各年度的采集样本量均在300 份及以上。样本采集的类型主要包括：粪便样本、笼具表面擦拭样本、宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭样本、清洗禽类的污水、其他（包括刀具、脱毛机、砧板等），采集样本的月份为11 月至次年5 月。

2.2 检测方法

采用实时荧光定量聚合酶链式反应技术对禽流感病毒进行检测。首先，采用天隆NP968 核酸提取仪及其配套的核酸提取试剂盒提取病毒核酸（RNA），然后采用相应的试剂盒展开检测。 当A 型流感病毒的检测结果为阳性时，进一步对各亚型进行检测。若出现阴性结果，则不再进行H5、H7 和H9 亚型分型检测。 对于出现H7 亚型阳性结果的，再继续进行H7N9 亚型核酸检测。

2.3 统计学处理

在Excel 表中录入相应数据，并采用SPSS23.0 统计软件展开数据分析，计数资料采用百分比表示，并进行卡方检验；对于多组比较，则需展开α 校正，P＜0.05 代表差异有统计学意义。

3 调查结果与分析

3.1 2016—2019 年河源市活禽市场外环境禽流感病毒检测结果

分析2016—2019 年河源市活禽市场外环境禽流感病毒的检测结果，表1 数据显示，共采样1 305份，2017 年的阳性率最低（13.07%），2019 年的阳性率最高（22.33%），其次是2018 年（21.29%）。2016 年的阳性率略高于平均水平（18.75%）。 各年份的阳性检出率差异有统计学意义（F=6.351，P＜0.05）。 其中，相比于2017 年的阳性率，2018 年和2019 年的阳性率更高（χ2=8.222、10.061，P＜0.05）。 2016 年与2017 年的阳性率差异没有统计学意义（P ＞0.05）。2018 年与2019 年的阳性率差异没有统计学意义（P ＞0.05）。2016 年，H5 亚型阳性检出率最高（3.13%）；2017 年、2018 年、2019 年，H9 亚型阳性的检出率最高，分别为10.40%、12.90%、18.33%。 从整体来看，阳性检出率按照从高到低排序，排名前三的依次为H9 亚型阳性（12.18%）、H5 和H9 混合阳性（2.30%）、H5 亚型阳性（1.23%）。

表1 2016—2019 年河源市活禽市场外环境禽流感病毒检测结果

3.2 2016—2019 年河源市不同月份活禽市场外环境禽流感病毒检测结果

分析4 年间河源市不同时间污染状况的分布情况，表2 数据显示，河源市12 月、1 月的阳性检测率最高，分别为4.60%、4.29%，其次是11 月（3.45%），再次是4 月（2.61%），然后是5 月（1.69%）和2 月（1.23%），最后是3 月（0.69%）。 河源市11 月至1 月的污染度较为严重。11 月、12 月、1 月的阳性率之间差异没有统计学意义（P ＞0.05），但均较2、3、4、5 月的阳性率高（P＜0.05）。 2、3、4、5 月份的阳性率间差异没有统计学意义（P ＞0.05）。

表2 不同月份活禽市场外环境禽流感病毒检测结果（n，%）

3.3 2016—2019 年河源市不同样本活禽市场外环境禽流感病毒检测结果

分析不同样本中禽流感病毒检测结果，表3 的数据结果显示，依据阳性检出率从高到低排序，依次为清洗禽类的污水（50.00%）、宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭样本（27.78%）、笼具表面擦拭样本（22.51%）、其他（16.16%）、粪便样本（15.82%）。 不同样本阳性率之间差异有统计学意义（F=11.286，P＜0.05）。 相比于其他样本的阳性率，清洗禽类的污水的阳性率最高（P＜0.05）。 宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭标本的阳性率则较其他（除清洗禽类的污水外）样本的阳性率高（P＜0.05）。笼具表面擦拭样本则较其他、粪便样本的阳性率高（P＜0.05）。 粪便样本和其他在阳性率方面差异没有统计学意义（P ＞0.05）。

表3 不同样本活禽市场外环境禽流感病毒检测结果

4 讨论

禽流感属于甲型禽流感病毒，一般仅感染禽类。对于甲型流感病毒而言，其基因组是8 个节段的RNA片段[3]。 对于禽流感病毒而言，其是由可编码不同蛋白质的8 节段单股负链RNA 构成，具有极强的基因重组能力。不同宿主之间进行病毒传播时，容易发生基因重配。一旦发生基因变异，将增强与人的结合能力，从而对人类公共卫生带来威胁，频繁引起人和动物的流感流行[4，5]。

活禽市场作为禽类集中地，在混合圈养的情况下，当通风与卫生条件不良时，均会加大禽流感病毒基因重组而产生新亚型的风险[6]。 现阶段，H5N1、H5N6、H7N9 是引发人感染禽流感的常见型别。 活禽市场外环境禽流感病毒的污染分布与其发生率有密切的关系。 早在2014 年河源市就出现首例人感染H7N9禽流感疫情，2014 年和2015 年发现多例人感染H7N9 禽流感病例，流行病调查表明3 人有明确的禽类接触史，病例活动区域有3 份外环境拭子阳性[7]。因此，对活禽市场外环境污染分布情况进行监控尤为重要，其不仅是了解禽流感病毒污染分布的基础，而且是及时采取有效防疫措施和加强管理的重要依据。

河源市活禽市场外环境的病毒亚型日益增多，H5 亚型、H9 亚型及两者的混合型均检出。河源市禽流感病毒亚型中，其主要以H9 亚型为主。 黄丰光[8]等学者在2014—2015 年对河源市的检测数据显示，H5 亚型、H9 亚型的阳性率分别为2.68%、5.64%。相比于2014—2015 年的检测结果，2016—2019 年河源市H9 亚型的阳性率显著升高。 可见近年来，河源市禽类携带的主要亚型是H9 亚型。 而其他亚型的阳性率较低，得益于疫苗接种举措的开展。 在2017年，我国展开了重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗秋季集中免疫，因而H7 和H5 亚型的阳性率较低。然而，河源市H5 亚型依然存在，且H9 亚型的阳性率较高， 这提示在今后的工作中应加强对活禽市场的检测，并及时变更疫苗组分，从而不断提高禽类防病的效果。另外，这也可能是活禽市场销售活禽的摊位集中，在空间有限的情况下，加之空气流动不畅、卫生条件不合格等因素，导致H9 亚型的阳性检出率增高。 良好的环境和卫生条件对改善禽流感污染的严重程度有一定的作用。因此，应合理安排活禽市场的摊位，并确保空气畅通。 同时，还应注重对卫生条件的检查，以降低污染。

河源市11 月、12 月及1 月的污染度较为严重。可见，河源市禽流感病毒污染具有明显的季节性特征。冬春季是禽流感高发季节已被广泛认同[9]。在对禽流感病毒展开检测的过程中，应重点对11 月、12 月以及1 月的禽流感病毒污染情况展开重点检测，并及时采取有效的防疫措施。

河源市宰杀或摆放禽肉案板表面的擦拭样本、笼具表面擦拭样本的阳性检出率最高。 这主要是由于禽流感病毒极易与禽类下呼吸道、肺部的3Gal 等受体结合并繁殖[10]。当屠宰带有病毒的禽类时，呼吸道内的病毒会被释放，因而阳性率较高。 除此之外，消毒不彻底等也是导致人感染禽流感病毒的高危因素。 因此，应做到及时清洗和彻底消毒，以降低禽类从业人群的病毒感染风险。与此同时，还应面向禽类从业人群展开健康教育，增强其防护意识，降低感染风险[11]。

综上所述，河源市活禽市场外环境普遍存在禽流感病毒的污染，病原体主要以H9 亚型为主，且季节性特征明显，因而应针对河源市活禽市场外环境禽流感病毒污染的分布情况进行密切检测，以对病毒的流行趋势和特征进行了解和全面掌握，为防控措施的制定提供方向。与此同时，还应进一步禁止活禽宰杀市场，并不断改变农村家禽散养模式，以对病毒的传染源进行控制。 另外，还应通过诸多渠道（如大众媒体、社交平台等）对禽类从业人员展开健康宣传教育，以提升从业人员的防护意识。 除此之外，还应注重定期消毒，以进一步降低高危人群的感染风险。