1例羊驼肠毒血症的病理学诊断

丁玉林 ， 郑秉武 ， 汤君宇 ， 王金玲 ， 王凤龙

(1.内蒙古农业大学兽医学院 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 ， 内蒙古 呼和浩特 010010； 2.呼和浩特市大青山野生动物园 ， 内蒙古 呼和浩特 010010)

肠毒血症是由产气荚膜梭菌在肠道中大量繁殖，产生毒素引起的一种急性毒血症。近年来，在我国许多省区的牛、羊、猪、鹿等动物中流行的一种以急性死亡为特征的疾病[1]。某羊驼养殖场发生了羊驼急性死亡，通过对羊驼的尸体剖检、病理组织学观察、细菌培养等方法对该病进行诊断，结果证实为羊驼的肠毒血症。

1 材料与方法

1.1 实验动物 某羊驼养殖场送检的病死羊驼；BALB/c 小鼠购自内蒙古医科大学。

1.2 试剂和主要仪器设备 普通培养基，购自环凯生物科技有限公司；环保透明剂，购自贝索生物科技有限公司；革兰染色液本实验室自配；瑞氏染色液，购自南京建成生物工程研究所；甲醛、无水乙醇，均购自天津化学品三厂。

全自动组织脱水机(樱花VIPTM5 Jr)；包埋机(樱花TeK)；切片机(徕卡Leica 2235)；展片机(Leica)；烤片机(樱花PS-53)；全自动盖片机(Thermo CLEARVUE)；全自动染色机(Thermo Gemine)；五人共揽显微镜(Olympus BX51)；超净工作台(上海博迅医疗生物仪器股份有限公司)；生化培养箱(Memmert IPP110)。

1.3 方法

1.3.1 病料采集 对送检的羊驼尸体进行尸体剖检，记录各组织器官的病理变化，并对各组织器官进行病理组织取材、固定以备病理组织切片制作，取材时注意组织块全面而具有代表性、大小适宜。眼观病变明显的组织选取一小块触片，并进行革兰染色、镜检。

1.3.2 病理组织切片制作 采用常规的石蜡切片制作技术进行病理组织切片制作，包括修块→冲洗→脱水→透明→浸蜡→包埋→切片→展片→烤片→染色→封片[2]。病理组织切片在显微镜下进行病理组织学观察。

1.3.3 毒素检验 取6只小鼠，分成2组，每组3只。取十二指肠和空肠血样内容物，12 000 r/min离心5 min，取上清液，每只小鼠腹腔注射1 mL[3]。

1.3.4 细菌培养 取肠道内容物，接种于普通培养基，37 ℃培养24 h[4]，取独立菌落涂片进行细菌的形态学观察。

2 结果

2.1 临床症状和尸体剖检病理变化 病程2 d，初期精神不振，体温升高，经药物治疗无明显效果。

尸体剖检：可见眼结膜呈暗红色；下颌部、胸部脂肪可见血红色斑点；肠呈暗红色，十二指肠、空肠肠壁变薄，可见血样内容物，呈血灌肠状；肠淋巴结呈暗红色；真胃黏膜呈明显的暗红色；脾呈蓝紫色，不肿大；肾淤血，质度变软；肺轻度淤血，可见小暗红色病灶；心包外脂肪和心内膜可见大量的红色斑点；肝肿大，呈土黄色，质度变脆；其他组织无明显病变。见中插彩版图1～4。

2.2 病理组织学观察 肠黏膜脱落，可见大量的红细胞，黏膜上皮细胞可见明显的坏死，呈出血坏死性肠炎变化；肠淋巴结可见明显的出血和坏死，淋巴细胞数量减少；肾脏淤血，肾小管上皮细胞明显变性，偶见坏死；肝脏肝细胞发生明显变性、坏死，可见小的坏死灶；脾脏淤血和轻度出血；胃黏膜脱落、出血，上皮细胞变性和坏死；大脑可见小出血灶；肺淤血和萎陷；其他组织无特征性病变。见中插彩版图5～8。

2.3 毒素检验和细菌培养 组织触片和培养细菌涂片经革兰染色可见直杆状、两端钝圆杆菌，革兰染色呈阳性。毒素检验，腹腔注射十二指肠内容物上清液组小鼠8 h死亡，腹腔注射空肠内容物上清液组小鼠14 h死亡。见中插彩版图9～10。

3 诊断

根据临床症状、动物尸体剖检变化、病理组织学变化、组织触片、细菌培养、小鼠毒素检验综合诊断为羊驼的肠毒血症。

4 讨论

羊、鹿、骆驼肠毒血症均有报道，且四季均可发生，病程短，死亡快，主要以梭菌的毒素致病,引起动物的胃肠疾病, 导致肠黏膜通透性改变、新陈代谢紊乱、组织学损伤，最终导致肠黏膜的损伤而发病甚至死亡[3]。羊、鹿、马鹿和骆驼尸体剖检胃可见出血点或斑，肠管外观似血肠样, 内容物呈红色的黏稠液体，肠系膜淋巴结肿大、出血；肾脏质软，心内、外膜有出血点[5-8]。该病例也表现肠呈暗红色，可见血样内容物，呈血灌肠状，肠系膜淋巴结呈暗红色，真胃黏膜呈明显的暗红色，肾淤血，质度变软，心内膜可见大量的红色斑点。羊、鹿和马鹿病理组织学观察肝细胞普遍发生变性和坏死，并见小坏死灶，肠黏膜可见上皮细胞大量坏死、脱落，淋巴结可见出血坏死，肾脏可见肾小管上皮细胞变性坏死[1,3,8]。该病例肠道呈出血坏死性肠炎变化，肠黏膜脱落、坏死，肠系膜淋巴结可见明显的出血和坏死，肾脏淤血，肾小管上皮细胞明显的变性，肝脏明显的变性、坏死。细菌分离培养，呈直杆菌，革兰染色阳性[1,8]，毒素检验试验小鼠在24 h内发生死亡[1,3，8]，细菌分离培养，可见阳性直杆菌，毒素检验14 h内发生死亡。羊驼肠毒血症在国内少有报道，经过本次试验证实，羊驼肠毒血症与其他报道的动物肠毒血症在临床症状、动物尸体剖检变化、病理组织学变化基本一致，以出血和实质器官的变性、坏死为主要表现。

该病的发生与饲养管理有很大的关系，因此要加强饲养管理，尤其环境卫生问题，保持清洁，天气变化或更换饲料要注意采取必要的预防措施。病畜要及时隔离，死亡的要进行无害化处理，同时对受污染的环境进行彻底的消毒。每年定期进行疫苗接种，对预防该病是非常有效的措施。