面膜类化妆品微生物检验方法适用性考察

王维亚*，吴珊珊，林智超，骆瑜，刘志斌

（南昌市食品药品检验所南昌市食品安全检测与控制重点实验室，江西 南昌 330012）

面膜，是护肤化妆品中的一个重要类别，在深层清洁肌肤的同时, 能够及时补充肌肤所需的多种矿物质及微量元素、氨基酸、维生素、蛋白质等多种营养成分，深受消费者的青睐。化妆品中丰富的营养物质非常有利于微生物的生长繁殖，微生物指标是化妆品安全性检测的重要内容，微生物污染会破坏或严重降低化妆品质量，甚至导致消费者过敏和感染[1]。所以多数化妆品中添加了防腐剂来抑制微生物生长，这也导致化妆品微生物检出率普遍偏低，或出现假阴性结果。为了解面膜的质量状况，保障其使用安全，我所对辖区内售卖的面膜产品进行了抽查检验，并对现行的《化妆品安全技术规范》2015 年版[2]微生物检验是否适合面膜类化妆品，能否真实反映其微生物的污染情况进行了方法适用性考察。

1 材料与仪器

1.1 样品

36 件面膜类化妆品均来自2018-2019 年南昌市化妆品监督抽检样品。

1.2 试验菌

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC (B) 26003]；大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC (B) 44102]；铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) [CMCC (B) 10104]；枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) [CMCC (B) 63501]；白 色 念珠 菌(Candida albicans) [CMCC (F) 98001]；黑曲霉 (Aspergillus niger) [CMCC (F) 98003]，均购自中国食品药品检定研究院。

1.3 培养基与主要仪器

SCDLP 液体培养基、卵磷脂吐温80 营养琼脂、孟加拉红琼脂、双倍乳糖胆盐（含中和剂）等培养基均由北京陆桥提供。SW-CJ-1A 型洁净工作台（苏州科顺医用净化设备厂）、BHC-1300Ⅱ型生物安全柜（苏州净化设备有限公司）、SPX-150 恒温培养箱（扬州 慧科电子有限公司）。

2 实验方法

2.1 检测项目与方法

《化妆品安全技术规范》 2015 年版中微生物检验部分，检测项目：菌落总数、霉菌和酵母菌总数、耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌。

2.2 评价标准

按《化妆品安全技术规范》 2015 年版规定，化妆品的微生物指标应符合下列规定，菌落总数：眼部化妆品及口唇等黏膜用化妆品以及婴儿和儿童用化妆品≤500cfu/g（mL），其他化妆品≤1 000cfu/g（mL）；霉菌和酵母菌：≤100cfu/g（mL）；耐热大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌均不得检出。凡出现1 项及以上指标不符合规定的，则判定为不合格样品。

2.3 检验方法适用性考察

参考《中国药典》 2015 年版四部[3]非无菌产品微生物限度检查方法，采用5 种菌株的回收率试验，考察面膜类化妆品计数方法适用性；采用阳性菌对照试验，考察面膜类化妆品控制菌方法适用性。

3 结果

3.1 面膜类化妆品微生物检测结果

如表1 所示，36 件化妆品的微生物指标均符合规定，合格率为100%，表明2018-2019 年抽查的面膜类化妆品卫生质量较好，但由于抽样数量不够大和覆盖不够全面，此结果并不说明面膜类化妆品就不存在微生物污染方面的问题。

表1 面膜类化妆品微生物检测结果

3.2 面膜类化妆品微生物计数方法适用性考察

按照《中国药典》2015 年版四部非无菌产品微生物限度检查方法，各菌回收率均在50%～200%可作为该样品菌落总数及霉菌和酵母菌总数检查方法。如表2 所示，采用现行的方法1 mL/皿时，面膜A 和面膜B 的黑曲霉以及面膜C的枯草芽孢杆菌和白色念珠菌回收率均小于50%，在采用培养基稀释法0.5 mL/皿时，各菌的回收率均达到要求。

表2 面膜微生物计数方法适用性试验回收率%

3.3 面膜类化妆品控制菌方法适用性考察

采用现行的控制菌检测方法对4 批加入阳性对照菌的样品进行检验，如表3 所示，所检样品中均检出耐热大肠菌群、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌。说明现行的化妆品控制菌检验方法基本适用于面膜类产品。

表3 面膜化妆品控制菌检查方法适用性试验结果

4 讨论

面膜在给皮肤带来营养的同时也成了微生物生长的良好培养基，含有大量微生物的面膜敷于脸上15～30min 就可能会引起皮肤出现红肿、发炎等感染现象[4]。因此，化妆品的微生物检验十分重要，而检验方法是否适用于相应产品，直接关系到检验结果的真实可靠性，有必要对方法可行性进行考察评估。

化妆品中防腐剂的加入给微生物检验带来了难题，本文参考《中国药典》2015 年版四部非无菌产品微生物限度检查方法，对面膜类化妆品进行了方法适用性考察。试验表明，采用培养基稀释法0.5 mL/皿测定菌落总数及霉菌和酵母菌总数，采用现行的《化妆品安全技术规范》2015 年版方法检查控制菌，适用于面膜类化妆品，可以为此类化妆品的监督检查提供参考。