克罗诺杆菌抑制剂的研究进展

李春霞，易佳琳，梁蕊蕊，钮冰，杨捷琳，陈沁

（上海大学生命科学学院，上海201900）

克罗诺杆菌是一群革兰氏阴性、周生鞭毛、能运动、无芽孢的兼性厌氧细菌。能导致各个年龄段的人群感染，新生儿、婴儿、老年人及体弱成年人是该菌属的易感人群，尤其是新生儿和婴儿，该菌属能引起新生儿脑膜炎、坏死性小肠结肠炎和菌血症，其已作为一种重要的食源性病原菌而受到关注[1]。克罗诺杆菌的分类经历了4 个时期，起初它因为能够产生黄色素，而被认为是黄色阴沟肠杆菌（yellow-pigmented Enterobacter cloacae）。1980 年Farmer 将其更名为阪崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii），隶属于肠杆菌属。2008 年，Iversen 等建议建立一个囊括原来所有阪崎肠杆菌的新属——克罗诺杆菌属（Cronobacter gen．nov），隶属于肠杆菌科[2]。目前，新属包括7 个种：阪崎克罗诺杆菌（C.sakazakii）、丙二酸盐克罗诺杆菌（C.malonaticus）、都柏林克罗诺杆菌（C.dublinensis）、莫金斯克罗诺杆菌（C.muytjensii）、尤尼沃斯克罗诺杆菌（C.universalis）、康帝蒙提克克罗诺杆菌（C.condimenti）和苏黎世克罗诺杆菌（C.turicensis）[3]。其中阪崎克罗诺杆菌为该属模式菌种。截至目前，克罗诺杆菌的污染源及致病机理尚不清楚[2]，目前治疗克罗诺杆菌感染常用抗生素，但是容易产生抗性，而且克罗诺杆菌容易形成生物膜，这为治疗增加了难度。为了防止易感人群的大规模疾病暴发，研制出有效的抑制剂尤为重要。本文主要介绍了克罗诺杆菌抑制剂的研究进展，期望能为接下来该菌抑制剂的研究提供一些参考。

1 克罗诺杆菌的生长特性和致病机理

1.1 克罗诺杆菌的生长特性

克罗诺杆菌生长和繁殖的最适温度是37 ℃～39 ℃，而且可以在5 ℃～46 ℃范围内正常生长。克罗诺杆菌一旦遇到合适的温度和湿度，就可以迅速的繁殖和生长。它还可以形成生物膜，以增强其对消毒剂等抑菌剂的抵抗能力[1]。研究发现克罗诺杆菌可以在硅、玻璃、不锈钢、乳胶和聚碳酸酯等介质表面形成生物膜。生物膜形成不仅受到亲水和疏水表面的影响，同时还受到培养基和温度的影响[4]。培养基中是否添加乳糖、氯化钠的浓度以及pH 值都会影响生物膜的形成，其中中性环境最有利于生物膜的形成[5]。

1.2 克罗诺杆菌的致病机理

克罗诺杆菌是一种条件性致病菌，它的致病性与其自身的外膜蛋白A（outer membrane protein A，OmpA）、脂多糖（lipopolysaccharides，LPS）和宿主细胞骨架等方面都有关系，具体的致病机理尚不清楚[6]。革兰氏阴性细菌中最主要的毒力因子之一是OmpA，它有很多功能，它可以在外菌膜中形成小的非特异性扩散通道，也可以维持外膜蛋白和正常细胞形态结构的完整性。有试验表明，表达OmpA 的细菌可以成功穿越小肠屏障以及脑和血液中多种屏障，并且会在感染动物体内导致肠细胞的凋亡。脂多糖是一种热稳定的内毒素，也是革兰氏阴性细菌细胞外壁重要的分子，具有抗原性[7]。内毒素可能破坏肠壁屏障，促进细菌入侵并引起坏死性小肠结肠炎，并且还会削弱血脑屏障，导致更严重的感染[8]。宿主细胞骨架是一个排列成丝状的动态蛋白网络，它在细胞的形态、运动及细胞功能中起关键作用[9]。宿主细胞骨架在细菌致病过程中也起到了重要的作用[5]。阪崎克罗杆菌侵染人脑微血管内皮细胞后，细胞结构发生明显的改变，比如微丝和微管部分断裂、模糊，发生重新组装，这些现象表明克罗诺杆菌侵染进入人脑微血管的过程中有微管和微丝的参与[9]。

2 克罗诺杆菌的抑制剂

抗生素是治疗和预防人类感染克罗诺杆菌的常用方法[10]。但抗生素的广泛应用容易导致人体微生态平衡失调并且会产生耐药性，因此补充和替代抗生素治疗的药物和方法的研究也越来越受到关注[11]。研究表明，各种药剂，如植物中的酚类化合物和其他植物化学物质，有机酸类，益生元及纳米粒子等都对克罗诺杆菌具有抑制作用。它们的抑菌机理大多都是影响克罗诺杆菌的细胞膜，使其通透性增加，破坏细胞膜的完整性，从而起到抑菌的作用。除此之外，植物次生代谢物类抑制剂比如反式-肉桂醛还可以下调纤维素等与生物膜形成相关的基因表达来抑制克罗诺杆菌的生物膜形成。

2.1 抗生素类抑制剂

抗生素是由细菌、霉菌等微生物产生的，这些物质具有抵抗病原体的作用。它主要通过抑制核酸和蛋白质的合成、改变细胞膜的通透性、干扰细胞壁的合成等途径来抑制细菌的生长和繁殖[12]。目前，抗生素是治疗人类感染克罗诺杆菌的首选方法。临床治疗其感染多选用氨苄青霉素-庆大霉素或氨苄青霉素-链霉素[13]。链霉素由氨基己糖的衍生物组成，它属于糖的衍生物，它的抑菌机理是通过与细菌核糖体30S 亚单位结合来抑制细菌蛋白质的合成。庆大霉素属于氨基糖苷类抗生素，它的抑菌机制与链霉素类似，其通过与细菌30S 核糖体亚单位的16S 核糖体RNA（rRNA）的氨酰基结合，直接干扰细菌蛋白合成而发挥抗菌活性[14]。氨苄青霉素是β-内酰胺抗生素，此类抗生素在在细胞繁殖期起杀菌作用[12]。然而，长期使用或滥用抗生素可导致克罗诺杆菌菌株产生抗生素耐药性。细菌产生耐药性的主要机制包括通过改变其外膜的渗透性或者主动外排使抗生素在细胞内的积累减少[15]。所以长期使用抗生素，以及使用不适当的抗生素剂量都是不可取的，因为它可能导致克罗诺杆菌等细菌抗生素抗性的发展[16]。

2.2 植物次生代谢物类抑制剂

2.2.1 精油类抑制剂

精油（essential oils，EOs）是具有一定香味的挥发性油状液体的总称，所以也称为挥发油。精油主要存在于植物体中，是由脂肪族类、芳香族类、萜类等化合物组成的混合物。许多植物精油对革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病原真菌等均有一定的杀灭作用。目前对精油的作用机制研究尚少，它的抑菌机制主要有以下3 个方面：影响细胞膜正常功能，使细胞内容物外泄，最终导致细菌死亡；影响脂质层稳定，溶解胞体中的脂肪体；影响细菌的能量代谢[17]。

反式-肉桂醛大量存在肉桂等植物体内，是肉桂树皮提取物的主要成分。反式-肉桂醛具有多种生物活性，如抗癌、抗炎、治疗糖尿病和降低细菌耐药性等[18-19]。研究发现反式-肉桂醛通过下调纤维素、鞭毛等相关基因的表达来减少胞外多糖（纤维素）和鞭毛的形成和功能，以及细胞间信号传导，从而减少了克罗诺杆菌中的生物膜形成。此外反式-肉桂醛还可通过破坏阪崎克罗诺杆菌细胞膜的完整性从而实现对细菌的抑制作用。所以反式-肉桂醛可能会被用作抗菌剂抑制克罗诺杆菌的生物膜从而防止污染[10]。而且与反式-肉桂醛及温和加热单独作用相比，反式-肉桂醛结合温和加热对阪崎克罗诺肠杆菌有更显著的抑杀效果，并且随着反式肉桂醛质量分数的增加及温和加热温度升高，抑菌的效果也越明显。因为温和加热与反式-肉桂醛结合会影响细胞膜的通透性并使细胞破碎瓦解，从而起到抑制阪崎克罗诺杆菌的作用[20]。

精油化合物可以有效控制阪崎克罗诺杆菌的污染，而且将两种不同精油联合使用能增强抗菌效果，比如将肉桂精油与冷杉精油联合使用可以增强抗菌作用。研究表明，在植物精油中，肉桂醛和百里香酚是抑菌活性最强的成分。肉桂醛不仅能够作用于细胞膜，还能够进入细胞质，影响细菌细胞中的结构保守的蛋白质，阻止细菌细胞分裂，从而抑制细菌活性。百里香酚作用于细菌细胞膜上的双分子层，使细菌细胞膜蛋白构象发生改变，导致细胞内容物泄露[21]。

2.2.2 多酚类抑制剂

自然界中存在大量的多酚类化合物，而且动物和植物都可以产生多酚类化合物。Claudine 等[22]的研究发现植物产生的多酚类化合物一般都具有抗菌活性，因为试验发现植物产生的多酚能够用于防御病原菌感染。多酚类物质的抗氧化能力很强大，将它添加到食品中，可以清除人体内过量的自由基，有益于人体健康，同时它还具有抑制食品中病原性微生物的生长繁殖的作用，从而有利于延长食品的保质期。多酚类如香芹酚对致病菌的细胞膜有破坏作用，细胞膜的通透性改变导致细胞内容物外流，从而胞外离子如钾离子及一些酶类等含量升高；同时膜完整性的改变可能引起膜电势及胞内外pH 值差的改变及DNA、RNA 等紫外吸收物质的渗出；膜改变也能引起能量代谢的变化，导致细胞内外腺嘌呤核苷三磷酸（adenosinetriphosphate，ATP）的含量发生变化[23]。

麝香葡萄汁是酚酸和有机酸的丰富来源，包括重要的单宁酸对阪崎克罗诺杆菌表现出强烈的抑制作用。Kim 等[24]的研究表明麝香葡萄汁可能具有作为天然阪崎肠杆菌抑制剂在婴儿食品中使用的潜力。此后，研究发现红麝香葡萄汁中的多酚化合物能有效抑制阪崎克罗诺杆菌，而且联合使用鞣酸与红葡萄汁时，这二者表现出了更强的协同抑菌效果。此外，蓝莓中也含有的大量多酚类化合物，如原花青素、木樨草素、花青素等，因此蓝莓也具有很强的抑制病原菌活性的作用[25]。有研究也提到蓝莓果汁与蓝莓原花青素都能抑制阪崎克罗诺杆菌的生长繁殖[26]。此后，Kim 等[24]发现用水溶性麝香葡萄籽提取物处理的阪崎克罗诺杆菌可在1 h 内从6 log（CFU/mL）降至不可检测的水平；蓝莓原花青素可在1 h 内将阪崎克罗诺杆菌从约8 log（CFU/mL）降低至不可检测水平；此外，用5 mg/mL茶多酚处理1 h，可以完全消除约7 log（CFU/mL）的阪崎克罗诺杆菌菌株。这些报告表明，天然提取物可用作天然抗生素和/或杀菌剂，以防止食品工业中阪崎克罗诺杆菌对食品的污染，而且蓝莓原花青素的抑菌作用要强于水溶性麝香葡萄籽提取物和茶多酚[27]。

蜂胶也具有抗菌活性，其活性成分主要是多酚，Torlak 等[28]发现壳聚糖-蜂胶包覆聚丙烯薄膜对食源性病原体有更好的的抗菌效果。壳聚糖是一种线性多糖，是几丁质经过脱乙酰作用得到的，它的抗菌性质在很多文献中都有记载，但由于检测方法的不同，其在细菌生物膜中的抗菌效果是有争议的。壳聚糖具有膜形式的抗菌效果，其抑菌机制是直接接触细菌使其细胞膜破坏，使细胞的内容物发生渗漏，从而达到抑制细菌的效果。壳聚糖里添加蜂胶后测试其对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的抗菌效果，发现壳聚糖包衣膜的抗菌功效显著增加，该结果可归因于壳聚糖和蜂胶之间的协同效应。所以将多酚和壳聚糖这两种抗菌物质一起使用，抗菌活性比单独使用这二者更强。此外，已经研究了一系列天然有机化合物，它们的抑菌顺序是香芹酚=百里酚＞丁香酚＞二乙酰＞肉桂酸[29]。

2.2.3 生物碱类抑制剂

生物碱主要存在于植物体内，是一类含氮的碱性有机化合物，具有显著的生物活性。生物碱抑制克罗诺杆菌方面的报道相对比较少。盐酸小檗碱属于生物碱，又称为黄连素，具有广泛的抑菌作用，它可以抑制克罗诺杆菌的早期黏附，这抑制了新生物膜的发展。通过 3，3'-[1-（苯氨酰基）-3，4-四氮唑]-二（4-甲氧基-6-硝基）苯磺酸钠还原试验评价盐酸小檗碱对克罗诺杆菌初始黏附及其生物膜形成的影响，结果表明，盐酸小檗碱对克罗诺杆菌生物膜的抑制作用呈剂量依赖关系，盐酸小檗碱抑制90%克罗诺杆菌的最低药物浓度为512 μg/mL。当盐酸小檗碱浓度为1 024 μg/mL 时可以抑制克罗诺杆菌的早期黏附，而且在此浓度下，盐酸小檗碱也可部分破坏成熟的生物膜。因此，盐酸小檗碱在预防和控制克罗诺杆菌生物膜形成以及由该病原体引起的生物膜相关感染方面显示出巨大潜力[30]。

2.2.4 有机硫类抑制剂

有机硫化合物主要存在于石油和动植物体内。在植物体内它们有不同的存在形式，例如大蒜精油含有一系列的含硫化合物，如二烯丙基硫代磺酸酯（大蒜辣素）、二烯丙基三硫化合物、二烯丙基二硫化合物等，大蒜是二烯丙基硫化物的主要来源。现代医药化学的研究表明大蒜中的有机硫化合物是最主要的抗菌活性物质。有研究表明大蒜能够显著抑制革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌等，其中大蒜中的含硫化合物如二烯丙基硫醚起到了很重要的作用。冯少龙等[31]研究了大蒜提取物中有机硫化物对阪崎克罗诺杆菌的抑菌活性与抑菌机理。研究发现两种由大蒜中的不稳定的硫代亚磺酸酯降解产生的有机硫化物，即阿藿烯和二烯丙基硫醚，对阪崎克罗诺杆菌具有很强的抑制效果。阿藿烯与报道的大多数抑菌剂一样，也具有一个亚磺酰基，推测它的抗菌活性来自二硫键和亚磺酰基的共同作用，阿藿烯和二烯丙基硫醚的抑菌机理有很大的不同，之前的研究发现二烯丙基硫醚可以很容易的进入细菌的细胞膜，并与菌体细胞内含硫醇的蛋白质结合，但是现在研究发现阿藿烯和二烯丙基硫醚都可以和细胞内的-SH 基结合。阿藿烯和二烯丙基硫醚能够渗透通过菌体细胞膜，然后与细胞中的-SH 基结合形成S-S，随后相关的酶类和蛋白质构象发生变化，从而造成生物机体障碍。总体上来说，阿藿烯对阪崎克罗诺杆菌的抑菌效果要强于二烯丙基硫醚。

2.3 有机酸类抑制剂

2.3.1 乳酸抑制剂

有机酸可以穿过细菌外膜的孔道进入细胞内，主要作用于磷酸和脂多糖，从而破坏细胞膜的完整性，使细菌细胞的内容物外泄，达到抑菌的效果[21]。乳酸是一种弱有机酸，具有抗菌活性，已被用作食品中的抗菌剂。未解离形式的乳酸可以穿透细胞质膜，这导致细胞内pH 值降低和跨膜质子动力的破坏，这是其抗菌作用的重要部分。乳酸也是一种强力的外膜崩解剂，乳酸可以透过革兰氏阴性细菌的外膜，这种特性可以帮助其他抗菌剂渗透细菌细胞并产生毒性作用[32]。开菲尔是一种含有乳酸菌、醋酸菌和酵母的发酵乳（乳酸）。在研究中，Kim 等[33]评估了婴儿配方奶粉中开非尔上清液对阪崎克罗诺杆菌的抗菌活性，结果显示其具有抑制阪崎克罗诺杆菌的作用。铜被用作金属蛋白和酶的辅助因子，但是在高浓度下，可以产生对细菌生长的抑制。研究显示铜对克罗诺杆菌的抑制显示出剂量依赖性。在相对高pH 值的条件下，大多数乳酸以酸的离解形式存在，不能穿过细菌的细胞质膜。但当将乳酸与铜离子联合使用，解离形式的乳酸可能螯合铜离子，因此可以穿过细胞质膜并对克罗诺杆菌产生毒性作用。同样的，乳酸的透化性质可以促进铜离子进入克罗诺杆菌细胞，从而产生毒性作用，并且其本身也产生毒性作用。所以将乳酸与铜离子联合使用可以增强二者的抗菌作用，从而抑制克罗诺杆菌生长[32]。乳酸菌具有抑菌作用，其中的一个原因就是它可以产生有机酸类物质，包括乳酸、乙酸等。但是仅靠乳酸菌产生的酸性物质来抑菌作用是有限的[34]。有机酸也常用作防腐剂，比如山梨酸钾、双乙酸钠、丙酸钠、丙酸钙、脱氢醋酸钠均属于有机弱酸类防腐剂，这些防腐剂安全性较高，而且结构比较稳定[35]。

2.3.2 氨基酸抑制剂

氨基酸对克罗诺杆菌的生长起着很重要的作用，研究发现，当把克罗诺杆菌在固体溶菌肉汤（lysogeny broth，LB）培养基上培养时，克罗诺杆菌可以形成光滑的菌落，但当在氨基酸缺乏的M9 培养基上生长时则形成黏液菌落。而且在缺乏氨基酸的培养基中培养克罗诺杆菌时，与鞭毛形成和趋化性相关的基因显著下调，同时，与各种氨基酸生物合成相关的大多数基因也受到显著调节。说明氨基酸对克罗诺杆菌的影响是广泛的[36]。D 型氨基酸对克罗诺杆菌生物膜的形成和发展具有影响，因为D-蛋氨酸、D-酪氨酸、D-色氨酸、D-亮氨酸的混合物能有效的促进细菌的生物膜解聚[37]。D-色氨酸可以通过降低细胞之间的初始黏附和改变胞外聚合物（extracellular polymers，EPS）的性质来显著抑制阪崎克罗诺杆菌的生物膜发育[38]。此后，李辉[37]研究了6 种不同的D/L 型氨基酸（谷氨酸、酪氨酸、亮氨酸、赖氨酸、丙氨酸、色氨酸）对克罗诺杆菌生物膜的影响，L 型氨基酸在较低浓度下对克罗诺杆菌分离株有促进的作用，但在高浓度下，不论L 型还是D 型氨基酸都对克罗诺杆菌有抑制作用。之后研究还发现，D型氨基酸能够引发已形成的生物膜解散，原因可能是D 型氨基酸能转化成吲哚或者吲哚乙酸，这二者可以对生物膜的形成产生影响。吲哚是细胞间信号分子，通过影响细菌孢子形成，质粒稳定性，进而对细菌的抗药性、生物膜形成和毒力产生影响。但是色氨酸分解代谢物是否也调节哺乳动物肠道的微生物群落仍然不清楚[39]。

2.4 益生元抑制剂

益生元最初被定义为通过选择性地刺激结肠中一种或有限数量的细菌的生长和/或活性而为宿主提供有益效果的食物成分，主要成分是功能性低聚糖，是一种不能被消化的膳食补充剂，它可以刺激有益菌的生长[40]。益生菌主要包括乳杆菌属、双歧杆菌属、丙酸菌、芽孢杆菌属、酵母菌等，它的抑菌机理是通过直接与致病微生物相互作用，来竞争性抑制致病菌生长和黏附定植。钟亮等[11]发现鼠李糖杆菌和脆弱拟杆菌可以抑制阪崎克罗诺杆菌黏附和侵袭小肠上皮细胞（Caco-2），从而预防和治疗克罗诺杆菌引起的菌血症和脑膜炎。细菌导主致宿致病的一个重要阶段是细菌黏附于宿主细胞表面，预防细菌感染的其中一个关键就是寻找能有效抑制细菌黏附能力的抑菌物质。而益生元抑制有害菌的另一个原因是它能抑制细菌黏附到宿主细胞表面。例如半乳糖（galactooligosaccharides，GOS）可抑制细菌的黏附活性而抑制胃肠道感染。Quintero等[40]用显微镜或培养方法测量GOS（16 mg/mL）存在下阪崎克罗诺杆菌对人肠上皮细胞（HEp-2）的影响时，发现阪崎克罗诺杆菌对HEp-2 的黏附性显著降低（分别为56 %和71%）。聚葡萄糖（polydextrose，PDX）本身具有较小的作用，但是GOS-PDX 的混合物（每种8 mg/mL）抑制阪崎克罗诺杆菌黏附HEp-2 的比率达到了48%。所以联合使用聚葡萄糖和低聚半乳糖或者单独使用聚葡萄糖都能有效抑制阪崎克罗诺杆菌黏附到体外培养的肠上皮细胞表面，而且联合使用这二者的抑制效果更好。因此，它们在预防阪崎克罗诺杆菌相关的感染中具有很好的应用前景。

2.5 纳米粒子类抑制剂

由于突变、污染和环境条件的变化，多重耐药细菌和病毒株的数量不断增加。为了克服这种困境，科学家们正在尝试开发治疗这种微生物感染的药物[41]。在耐药菌株和传统治疗无效性的背景下，基于纳米材料的方法不会对细菌施加进化压力，因此从长远来看可能是有益的。纳米粒子，尤其是金属纳米粒子，倾向于提供克服细菌抗性的有效解决方案[42]。然而金属纳米颗粒具有不同程度的细胞毒性，这限制了它们在抗微生物药物中的使用。Bakkiyaraj 等[43]发现纳米粒子对细菌生物膜有抑制作用。之后Qureshi 等[42]利用硫化钼纳米检测其对生物膜的抑制作用。当用硫化钼纳米颗粒处理Hela 细胞，并测定代谢活性作为细胞数量的测量时，发现硫化钼纳米处理的细胞中的代谢活性几乎与对照中相同，表明它们是无毒的，因此，可以视为生物相容的，使其成为抗菌剂的良好选择。含有硫化钼纳米的制剂显示出生物膜抑制作用，基于硫化钼纳米的此类药物制剂可能在制药和生物医学工业中具有重要且前所未有的应用。另外，这些制剂可以用于外部应用，并且可以涂覆在医疗装置/设备上，例如导管和内窥镜，以减少生物膜的形成。

银和银盐的使用与人类文明一样古老，但最近才对银纳米粒子的制造有了更深入的认识。它们常用于农业和医药，如抗菌、抗真菌和抗氧化剂。已经证明银纳米颗粒可以阻止许多细菌如蜡状芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、柠檬酸杆菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、副溶血性弧菌和真菌白色念珠菌的增长和增殖[41]。最近发现银纳米粒子可以有效的控制阪崎克罗诺杆菌，银纳米颗粒比微生物小，它们扩散到细胞中并使细胞壁破裂，进而引起细胞膜损伤，伴随着银纳米颗粒吸附到细胞表面，可以引起细胞形态的变化，细胞膜超极化以及细胞内还原糖和蛋白质从细胞质向外加速渗漏。在用银纳米颗粒处理后还可以诱导细胞呼吸链功能障碍，ATP 合成减少[44]。此外，银纳米颗粒可以产生活性氧和自由基，导致细胞凋亡，阻止其复制[41]。在食品工业中，控制阪崎克罗诺杆菌的方法有很多，前面主要提到了一些天然抗菌剂，但是这些方法不能有效清除食品加工中的细菌，因为它具有强大的生物膜形成能力。随着纳米材料的发展，银纳米颗粒因其抗菌谱广，具有抗细菌、真菌和病毒的活性，因而成为了一种新型抗菌材料，可以有效的抑制克罗诺杆菌[44]。所以纳米粒子在抑制克罗诺杆菌方面显示出良好的前景。

3 结论

近年来，关于克罗诺杆菌引起危害的报道越来越多，在不同食品中也有较高的检出率[45]。与其他肠杆菌科相比，克罗诺杆菌是最耐热的生物体。新生儿和婴儿是克罗诺杆菌的主要易感人群[1]，而且接触克罗诺杆菌的婴儿和新生儿的感染死亡率很高，所以注重婴幼儿的食品卫生的同时也需要有效控制和消除这种病原体[46]。克罗诺杆菌容易形成生物膜，这为消除克罗诺杆菌的污染增加了难度，所以研制出有效的抑制剂非常重要[45]。对于克罗诺杆菌，干燥环境和适当的热或酸休克可导致对细菌的亚致死效应并增强其在不利环境中的抗性。使用两种或更多种方法的组合来避免克罗诺杆菌属的增殖可以产生协同效应，例如，壳聚糖和蜂胶联合使用，铜离子和乳酸联合使用都可以增强抑制克罗诺杆菌的效果。了解克罗诺杆菌对不利环境和灭菌过程的抵抗将有助于更好地理解克罗诺杆菌的生理特征和行为。这将有助于制定更有效的战略，包括全面的食品安全检测系统和控制克罗诺杆菌的干预措施，也有助于研制出更有效的克罗诺杆菌的抑制剂[46]。