胎儿染色体异常血清学筛查与无创DNA 检测的有效性及其可行性分析

杜升烨，李娜，黄宪霞，刘雪梅，曹呈国

1.济南市人民医院产科，山东济南 271100；2.济南市人民医院中医妇科，山东济南 271100

染色体异常会导致多个器官或组织发生畸形病变，且该疾病属于无法治疗疾病，因此及早发现，并终止妊娠是减少该疾病的关键[1]。据临床数据统计显示，在我国每年由1 600 多万的新生儿出生[2]，而因染色体异常导致的先天性致愚致残缺陷儿可以占总出生人口的5%以上， 属于世界上天生残缺儿童出生率最高的国家，这对患儿及其后代的生存质量带了严重影响，也会使患儿家庭以及社会带来负担[3]。针对孕妇产前进行有效的筛查和诊断可以有效降低先天性畸形儿的出生率，是保证分娩质量的关键手段[4]。此次研究针对来该院进行染色体异常筛查的孕妇， 选取2016年5 月—2018 年5 月该院接受筛查的1 500 名孕妇，采用血清学筛查以及无创DNA 检查， 分析两种检测方式的准确性，并针对高危孕妇转上级医院进行产前诊断，进一步随访检查结果，跟踪妊娠结局。通过临床资料，为染色体异常胎儿提供可靠的诊疗流程，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院接受筛查的1 500 名孕妇， 年龄19～45岁，平均年龄（28.8±3.2）岁；孕周15～20 周，平均孕周（18.1±2.3）周。 根据患者年龄将其分为Ⅰ～Ⅵ组，Ⅰ组孕妇40 名，年龄19～20 岁；Ⅱ组孕妇422 名，年龄21～25 岁；Ⅲ组孕妇463 名，年龄26～30 岁；Ⅳ组孕妇299 名；年龄31～35 岁；Ⅴ组孕妇172 名，年龄36～40岁；Ⅵ组孕妇104 名，年龄41～45 岁。前提是在拒绝羊水穿刺，自愿选择DNA 检测的。该次研究是在获得医院伦理委员会批准的前提下开展。 纳入标准：①经B超检测进行孕周校准， 确定孕妇孕周在14～21 周之间；②入组孕妇均为单胎妊娠；③体重低于100 kg；④入组孕妇对于该次研究内容知情，并自愿接受两种检测方式进行染色体异常筛查，且在同意书上签字。 排除标准：①孕妇近期曾接受过细胞治疗、异体输血或移植手术等治疗； ②孕妇自身属于染色体异常状态；③孕妇在4 周内曾接受过免疫治疗；④孕妇自身不愿参与该次研究。

1.2 方法

①对入组患者进行血清学筛查，具体如下：取孕妇清晨空腹上肢静脉血， 采用化学发光免疫分析仪（MP8 型）进行检测，对绒毛膜促性腺激素、游离雌三醇以及甲胎蛋白水平进行测定， 然后对孕妇18 三体综合征、21 三体综合征和神经管畸形的风险率进行计算，≥1/270 为21 体综合征高风险，在1/500～1/270之间为临界风险，将检测结果为高风险孕妇诊断为阳性[5]。

②无创DNA 检测，该院与安诺优达基因科技（北京）有限公司协作，具体如下：使用专用CF 采血管进行采血，取孕妇外周静脉血5 mL，将血液置于-4℃的冰箱中进行保存，通过离心获得血清，对样品DNA 进行提取分离，对cffDNA 采用PCR 技术扩增，并对样本DNA 进行检验，对需检验样本进行，生物信息分析采用其配套软件BGPDV2.0.1 进行，对检测见过进行判读[6]。

1.3 诊断标准

针对检测后为高危孕妇，建议转入山东省立医院进行羊水穿刺，做染色体核型分析和芯片分析，追踪诊断结果。 染色体异常的以羊水穿刺作为金标准，针对未进行羊水穿刺的产妇， 以最终分娩结局作为金标准[7]。

1.4 统计方法

数据应用SPSS 18.0 统计学软件进行分析，计数资料以[n(%)]表示，进行χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同检测方法筛查结果分析

血清学筛查检出率为13.7%， 准确率88.1%，无创DNA 检测检出率为9.8%，准确率92.5%，两种联合检测检出率为5.2%，准确率97.9%，见表1。

2.2 不同检测方法效能分析

表1 不同检测方法筛查结果对比

联合筛查灵敏度以及特异度明显高于血清学筛查和无创DNA 检测（P＜0.05），无创DNA 检测灵敏度以及特异度明显高于血清学筛查，差异有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 不同检测方法效能对比（%）

2.3 不同年龄检出情况分析

不同年龄段染色体异常检出率存在明显差异，且年龄越高出现染色体异常的概率越高，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 不同年龄检出情况分析

3 讨论

染色体异常是起始于胚胎时期的严重疾病，目前针对该疾病并没有有效的治疗方案，而且该病症具有较高的发病率，借助有效的产前筛查和诊断，降低染色体异常胎儿的出生率，是减少染色体异常患儿出生的关键[8]。临床最为常见的染色体异常综合征为21 三体综合征、18 三体综合征以及13 三体综合征[9]。 现阶段针对染色体异常的筛查手段非常多样，其中常见的方式有核磁共振、血清学、超声等[10]。 目前临床应用最为准确的诊断方式为超声诊断辅助和羊水穿刺，但是该操作属于有创检测，检测风险较高，且操作难度大，不适合作为广泛检测方式[11]。 而血清学筛查是目前临床应用最广泛的染色体异常筛查方式，该方式可以在没有任何相应疾病提示孕妇人群中广泛应用，可以将存在疾病危险的人群筛选出来，进行产前诊断[12]。

随着医疗科技的不断进步， 无创DNA 产前检查技术在胎儿染色体异常筛查中得到广泛应用[13]。 在孕妇怀孕中期，血液中会有游离状态的胎儿DNA，通过对胎儿游离DNA 进行收集， 分析其染色体变异发生情况， 该方式检测与常规血清检测相比准确率更高，与羊水穿刺相比不会对孕妇机体造成损伤，减少危险事件发生率，是目前对于染色体异常检查最受孕妇欢迎的一种检测方式。

此次研究，针对来该院接受染色体异常筛查的孕妇采用两种不同的检测方式进行检测， 研究结果显示，与血清学筛查相比，无创DNA 检测的灵敏度以及特异度均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05），这一结果说明，与传统血清筛查相比，无创DNA 检测具有更高的灵敏度和特异度， 且两种检测方式联合，使其灵敏度可特异度明显提高。此次研究根据最终确诊结果，对两种检测方式以及两种方式联合应用的准确率进行计算，得出血清学筛查检出率为13.7%，准确率88.1%，无创DNA 检测检出率为9.8%，准确率92.5%，两种联合检测检出率为5.2%，准确率97.9%，这一结果进一步说明， 无创DNA 检测准确率明显高于血清筛查，此研究数据与王传霞等[14]研究中的，22 例无创DNA 检测异常孕妇中羊水穿刺染色体正常为3 例，19 例筛查结果与羊水穿刺结果相一致， 阳性率为86.4%的研究结果相近。此外，两种联合应用可以提高筛查准确率。该研究对不同年龄孕妇胎儿染色体异常发生率进行分析， 发现其发生率与孕妇年龄有关，年龄越大，发生胎儿染色体异常的概率越高。因此，建议选择最佳育龄期进行生育，针对高龄产妇应加强产前检查，尽量避免或减少染色体异常胎儿的出生。

综上所述， 高龄产妇会增加染色体异常的发生率， 与血清学筛查相比， 无创DNA 具有更高的特异性，但是仍存在检测误差，针对高危孕妇建议其进行羊水穿刺， 从而更好地为产妇提供产前检测方案，减少异常儿的出生，提高了人口素质。 有效地做到了出生缺陷的二级预防措施。