初发急性白血病患者外周血T淋巴细胞亚群的表达探讨

潘苑 任建敏 任茗睿

[摘要] 目的 探讨初发急性白血病患者外周血中相关T淋巴细胞亚群表达情况。 方法 选取2017年2月～2019年3月于我院诊治的34例初发急性白血病患者作为研究对象（试验组），选择同期于我院体检的34例健康體检者作为对照组。检测两组外周血中相关T淋巴细胞亚群指标，对两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10进行比较。 结果 试验组初发急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分别为（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明显低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;而试验组初发急性白血病患者CD8+水平为（44.14±3.50）%，明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;试验组初发急性白血病患者IL-2为（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ为（23.25±2.50）pg/mL，均明显低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。试验组初发急性白血病患者IL-4、IL-10分别为（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明显高于照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。 结论 初发急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ表达下降，CD8+、IL-4、IL-10表达提升。

[关键词] 初发急性白血病;外周血;T淋巴细胞亚群

[中图分类号] R733.71          [文献标识码] B          [文章编号] 1673-9701（2019）31-0116-03

Expression of T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with initial acute leukemia

PAN Yuan   REN Jianmin   REN Mingrui

Department of Clinical Laboratory， Lishui Central Hospital in Zhejiang Province， Lishui   323000， China

[Abstract] Objective To evaluate the expression of related T lymphocyte subsets in the peripheral blood of patients with newly diagnosed acute leukemia. Methods Thirty-four patients with initial acute leukemia treated in our hospital from February 2017 to March 2019 were selected as the experiment group and 34 healthy subjects admitted to our hospital during the same period were selected as the control group. Relevant T lymphocyte subsets in the peripheral blood of the two groups were detected. The CD3+， CD4+， CD8+， CD4+/CD8+， IL-2， IFN-γ， IL-4 and IL-10 levels were compared between the two groups. Results The CD3+， CD4+ and CD4+/CD8+ levels of the experiment group were （61.20±4.64）%， （30.53±3.70）% and （1.02±0.23）， respectively， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The CD8+ level of the experiment group was （44.14±3.50）%， which was significantly higher than that of the control group， with statistically significant difference （P<0.05）. The IL-2 and IFN-γ levels of the experiment group were （11.60±1.13） pg/mL and （23.25±2.50） pg/mL， which were all significantly lower than those of the control group， with statistically significant differences（P<0.05）. The IL-4 and IL-10 levels of the experiment group were （41.36±3.50） pg/mL and （34.50±2.75） pg/mL， respectively， which were all significantly higher than those of the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. Conclusion The expression of CD3+， CD4+， CD4+/CD8+， IL-2 and IFN-γ decreases and the expression of CD8+， IL-4 and IL-10 increases in the peripheral blood of patients with initial acute leukemia.

[Key words] Initial acute leukemia; Peripheral blood; T lymphocyte subsets

急性白血病为造血干细胞出现恶性克隆而引发的一种疾病，属于造血组织的恶性肿瘤，又称为“血癌”，目前临床尚无有效的治疗方法，且在诊断、治疗以及预后过程中缺乏有效的且检测方便的指标，因此寻找有效诊治急性白血病的指标成为临床医学工作者不断探寻的课题。文献报道[1-3]急性白血病患者的发病和疾病进展与身体免疫紊乱存在严密相关性。于抵抗肿瘤的机体免疫反应过程中，与体液免疫对比，细胞免疫存在更加重要的影响效果。急性白血病患者体内外周血T淋巴细胞及NK细胞主要发挥机体细胞免疫作用，在抵抗肿瘤过程中存在重要价值[4-6]。本文将2017年2月～2019年3月我院诊治的34例初发急性白血病患者纳入实验调查研究资料，对初发急性白血病患者外周血中相关T淋巴细胞亚群指标检测结果进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年2月～2019年3月于我院诊治的34例初发急性白血病患者作为研究对象（试验组），选择同期到我院体检的34例健康体检者作为对照组。对照组：年龄20～71岁，平均（39.62±4.63）岁;男14例，女20例。试验组：年龄21～70岁，平均（39.55±4.45）岁;男15例，女19例。两组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1   两组患者一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 ELISA检测IL-2、IL-4、IL-10以及IFN-γ水平  检测外周血中白细胞介素-2（IL-2）指标、白细胞介素-4（IL-4）指标、白细胞介素-10（IL-10）指标、干扰素（IFN-γ），方法：患者早晨空腹取静脉血，离心后收集血清，-80℃保存待测。血清因子水平使用酶联免疫吸附试剂盒（ELISA试剂盒）（Thermo，上海）进行测定，操作方法依据说明书进行。

1.2.2 流式细胞术检测CD3+、CD4+、CD8+水平  试验组初发急性白血病患者和对照组健康体检者早上维持空腹采集5 mL肘静脉血，将2 mL肘静脉血放进EP管中，在4℃放置30 min，以800 rpm离心处理10 min，得到上清液，用于指标检测，将其余3 mL血液放进EDTA抗凝管内实施混合[7-8]。于2 h内采用PBS缓冲溶液开展稀释处理，分离得到单个核细胞，采用DMEM细胞培养液对细胞浓度调节至2×106个/mL。将100 μL细胞悬液添加CD3相关抗体、CD4相关抗体、CD8相关抗体，放在4℃遮光半小时，以800 rpm离心处理10 min，采用PBS缓冲液开展2次洗涤操作，将上清液吸出，添加染色缓冲液，采用流式细胞仪予以检测[9]。

1.3 观察指标

统计对照组健康体检者及试验组初发急性白血病患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平。

1.4 统计学分析

数据分析采用软件SPSS 23.0。计量资料以均数±标准差（x±s）表示，组间比较采用独立t检验，计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比较

试验组初发急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平分别为（61.20±4.64）%、（30.53±3.70）%和（1.02±0.23），均明显低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）;而试验组初发急性白血病患者CD8+水平为（44.14±3.50）%，明显高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.2两组IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平比较

試验组初发急性白血病患者IL-2为（11.60±1.13）pg/mL、IFN-γ为（23.25±2.50）pg/mL，均明显低于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。试验组初发急性白血病患者IL-4、IL-10分别为（41.36±3.50）pg/mL和（34.50±2.75）pg/mL，均明显高于照组，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

急性白血病作为起源于造血干细胞的恶性克隆性疾病，主要表现为骨髓中原始细胞大量异常增殖，且出现骨髓外浸润，正常造血受到抑制。众所周知，免疫系统受累在白血病发生发展以及后续转归过程中起重要作用，而CD8+T细胞、CD4+T细胞以及NK细胞于急性白血病患者机体抵抗肿瘤免疫过程中存在一定效果[10]。本研究通过观察急性白血病患者外周血中相关T淋巴细胞亚群指标变化，以期为急性白血病临床诊断治疗以及预后提供有效指标。

CD4+细胞可以促使T细胞及B细胞得以激活，促使T细胞以及B细胞产生细胞因子，促使CD8+T细胞及吞噬细胞激活情况加快，对B细胞抗体的合成过程带来一定影响，促使机体抵抗肿瘤相关反应加强[11-13]。CD8+细胞于免疫应答过程的后期出现增加，予以靶细胞发挥细胞毒效果，对可溶的相关抗原予以辨别，合成抑制因子位置，对免疫应答实行抵抗，抑制CD4+细胞[14]。CD4+/CD8+有助于保证机体免疫内环境相对稳定性，在免疫调节过程中存在重要作用，能够对体内免疫反应调整作用予以反映。本文相关数据值指标体现，初发急性白血病患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平低于健康体检者，而初发急性白血病患者CD8+高于健康体检者[15-17]。急性白血病患者因自身疾病所致其体内辅助性T细胞含量减少，或辅助性T细胞功能下降，对白血病细胞辨认能力降低，对白血病细胞杀伤作用减少，辅助性T细胞和急性白血病发病及进展均具有相关性。

细胞因子能够将肿瘤细胞杀死，或将抗肿瘤效应细胞予以激发获得抵抗肿瘤效果，在抵抗肿瘤过程中存在重要作用[18]。辅助性T细胞包含Th1细胞及Th2细胞，而Th1细胞因子涵盖白细胞介素-2（IL-2）、γ-干扰素（IFN-γ）指标等，参加机体细胞免疫过程;Th2细胞因子涵盖白细胞介素-4（IL-4）、白细胞介素-10（IL-10）指标等，参加机体体液免疫过程。Th1相关细胞因子/Th2相关细胞因子出现不正常表达为引发肿瘤细胞不被机体免疫检测的原因之一[19-20]。本研究结果显示，初发急性白血病患者IL-2、IFN-γ水平低于健康体检者，而初发急性白血病患者IL-4、IL-10水平高于健康体检者。提示：急性白血病患者体内免疫平衡往Th2发生转移，为引发抑制体内抵抗肿瘤效果的因素之一，建议予以Th1相关细胞因子/Th2相关细胞因子平衡调节，促使Th1细胞引发的细胞免疫加强，有效抵抗肿瘤。

综上所述，初发急性白血病患者外周血中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IL-2、IFN-γ指标表达减少，CD8+、IL-4、IL-10指标表达增加，检测以上指标有助于对初发急性白血病患者病情状况予以评定。

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（收稿日期：2019-06-26）