四项血清肿瘤标志物联合检测和ROMA指数在卵巢癌中的应用价值

赵 冬，贾良勇，李春艳，王兴宁，李 慧*

(1.延安大学附属医院检验科，陕西延安716000；2.云南省昭通市镇雄县中医院检验科，云南昭通657200)

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一，发病率仅次于子宫颈癌和子宫体癌而位居第三，死亡率却占据首位[1]。卵巢深藏于盆腔，发病隐匿，恶变早期无特异性症状，目前缺乏有效的早期筛查手段，约70%的患者确诊时已为晚期，且术后复发率极高、预后极差，5年生存率仅为20%～30%[2]。而早期发现的卵巢癌患者经过手术和化疗后，生存率可达90%[3]。目前卵巢癌确诊的“金标准”是病理学检查，但其为有创检查，多数患者难以接受，不利于早期筛查，因此，寻找能够早期诊断卵巢癌的血清标志物以及检测手段具有重大意义。随着人们对肿瘤标志物研究的不断深入，应用肿瘤标志物的联合检测成为研究癌症的重点。近几年来，为了进一步提升早期诊断卵巢癌的准确性，有专家学者将研究结果与统计学相结合提出了ROMA指数，即利用CA125和HE4值建立的卵巢风险预测模型，可用于鉴定女性盆腔包块的良恶性[4,5]。在本次研究中，选择临床上常用的肿瘤标志物人附睾蛋白4、癌胚抗原、糖类抗原125和糖类抗原72-4并结合ROMA指数进行分析，旨在研究上述四项肿瘤标志物的联合检测以及ROMA指数在卵巢癌中的应用。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取延安大学附属医院2018年4月至2019年3月收治的因卵巢肿瘤住院的患者116例，根据术后病理确诊分为恶性组和良性组。其中恶性组55例，年龄31～72岁，平均(52.13±7.73)岁；良性组61例，年龄28～69岁，平均(50.07±8.90)岁；另选同期我院体检中心体检合格的健康女性60例，为对照组，年龄32～70岁，平均(49.2±8.83)岁，三组年龄差异均无统计学意义(P>0.05)。所有入选病例均没有心、肝、肾等重要器官上的病变，并且排除同时患有其他部位良恶性肿瘤、家族肿瘤史的患者。

1.2 标本采集

所有研究对象(良性组、恶性组术前)均在清晨空腹状态下采集静脉血3～5 mL于分离胶促凝管中，室温下静置30 min后，以转速3000 r/min离心10 min，分离血清，并立即检测。

1.3 仪器与试剂

采用德国罗氏CobasE602型全自动电化学发光分析仪，所有试剂、质控品、校准品均为原厂配套提供，并严格按照试剂说明书和仪器操作程序进行实验。

1.4 方法

用电化学发光免疫分析法检测三组血清中的HE4、CEA、CA125、CA72-4水平。根据本实验室各标志物的参考区间(HE4≤140 pmol/L、CEA<4.7 ng/mL、CA125<35 U/mL、CA72-4<6.9 U/mL)判断，若检测值高于正常参考值上限，则为阳性，反之为阴性。四项肿瘤标志物任何一项检测为阳性则判定联合检测结果为阳性。灵敏度=真阳性人数/(真阳性人数+假阴性人数),特异度=真阴性人数/(真阴性人数+假阳性人数)。在HE4和CA125值的基础上计算出绝经前后相对应的ROMA指数，ROMA指数计算公式：绝经之前：PI=-12.0+2.38*LN[HE4]+0.0626*LN[CA125]；绝经之后：PI=-8.09+1.04*LN[HE4]+0.732*LN[CA125]；ROMA(%)=[Exp(PI)*100]/[1+Exp(PI)]。以良性组为参照，绘制ROC曲线用以评价HE4、CEA、CA125、CA72-4和ROMA指数对卵巢癌的诊断价值。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 三组四项肿瘤标志物水平及ROMA指数的比较

三组患者HE4、CEA、CA125、CA72-4水平和ROMA指数比较差异有统计学意义(P<0.05)见表1。

2.2 三组四项肿瘤标志物单项和联合检测以及ROMA指数阳性率比较

三组各血清肿瘤标志物阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)，三组各组内四项肿瘤标志物联合检测的阳性率高于相应组内的单项检测，ROMA指数的阳性率高于相应组内联合检测的阳性率。恶性组中单项CA125的阳性率最高，其次是HE4的阳性率，CEA的阳性率最低(见表2)。

表1 三组HE4、CEA、CA125、CA72-4水平及ROMA指数的比较

注：a、b：与恶性组比较差异均有统计学意义(P<0.05)；c：与良性组比较差异无统计学意义(P分别为：0.520、0.756、0.984、0.940、0.896)。

表2 三组HE4、CEA、CA125、CA72-4单项和联合检测及ROMA指数阳性率比较[%(n)]

注：采用卡方分割，按α′=0.017的检验水准进行比较：

d：与恶性组比较差异均有统计学意义(P<0.017，χ2分别为：39.370、9.367、13.694、10.948、25.715、17.093)；

e：与恶性组比较差异均有统计学意义(P<0.017，χ2分别为：42.304、14.616、16.402、10.672、30.482、24.890)；

f：与良性组比较差异无统计学意义(P>0.017，χ2分别为：0.992、2.000、0.169、0.001、0.295、1.002)。

2.3 四项肿瘤标志物和ROMA指数单项及联合检测对卵巢癌的诊断性(价值)评价

对单项而言，HE4诊断卵巢癌的特异度最高，其灵敏度亦较高；CA125的灵敏度最高，而特异度比其他三项的单独检测的特异度低；四项肿瘤标志物联合检测的灵敏度均高于其他三项标志物中的任意一项，特异度则较低，ROMA指数的灵敏度较四项联合检测高，而ROMA指数与四项指标联合检测，灵敏度最高，而特异度却减低(见表3)。

表3 四项肿瘤标志物和ROMA指数单项及联合检测对卵巢癌的诊断性(价值)评价

续表3

指 标病理诊断阳性(n)阴性(n)合计(n)灵敏度(%)特异度(%)正确诊断指数(%)CA72-4阳性18523阴性37569332.791.724.4四项联合阳性431962阴性12425478.271.149.3ROMA阳性493382阴性6283489.150.039.1ROMA+四项阳性514091阴性4212592.743.836.5

2.4 四项肿瘤标志物和ROMA指数诊断卵巢癌的ROC曲线分析

HE4、CEA、CA125、CA72-4单项和联合检测及ROMA指数诊断卵巢癌的ROC曲线下面积分别为0.820、0.706、0.774、0.736、0.839、0.880(见表4，图1)。

表4 四项肿瘤标志物单项和联合检测及ROMA指数曲线下面积

图1四项肿瘤标志物和ROMA指数诊断卵巢癌的ROC曲线

3 讨论

HE4是一种新型的卵巢癌标志物，本研究中，恶性组的HE4水平高于良性组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且阳性率也高于良性和对照组，差异有统计学意义(P<0.017)。有研究表明卵巢癌分泌的HE4是一种N-糖基化的分泌型蛋白，分子量很小，约为25 KDa，这可能是HE4在卵巢癌早期更易分泌入血的原因[6]。在Galgano等[7]发表的文献中：就单一肿瘤标志物来说，HE4对卵巢癌诊断的特异度很高，为95%。而在本次研究中，HE4的特异度高达99.2%，其在ROC曲线下面积为0.820，对卵巢癌的诊断价值较高，但其灵敏度为52.7%，可与其他血清肿瘤标志物联合检测进一步提高对卵巢癌诊断的灵敏度。且HE4水平可作为上皮性卵巢癌不良预后的危险因素[8,9]。

CEA是一种广谱肿瘤标志物，对卵巢癌诊断的阳性率不高，但其有较高特异度[10]，有其特殊价值。本研究结果显示，恶性组CEA水平高于良性组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，这是因为CEA在肿瘤细胞癌变过程中，由于癌基因表达生成的抗原可在肿瘤癌变患者的血液中检出，正常组织或良性疾病中不产生或产量极微。CEA对卵巢癌的阳性检出率仅为21.8%，这对于卵巢癌的诊断价值不大，但其特异度相对较高为98.3%，可用作辅助判断，或联合其他肿瘤标志物弥补其对卵巢癌诊断阳性率低的缺陷。

CA125是一种高分子糖蛋白，临床常用的卵巢癌肿瘤标志物，分泌于胚胎发育期的体腔上皮[11]。普遍分布于子宫内膜、生殖道等间皮组织细胞表面，当这些部位发生恶性病变或炎症时，血清中CA125的含量会升高[12,13]。本研究中,恶性组CA125的水平高于良性组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，在恶性组内，其阳性率为54.5%，高于HE4、CEA和CA72-4的阳性率。有研究表明，CA125是一种非特异肿瘤标志物，在胰腺癌、乳腺癌等不同的恶性肿瘤组织中也呈高表达[14]，此次研究中，CA125的特异度较其他三项标志物任意一项特异度低，为80.02%。

CA72-4是一种肿瘤相关糖蛋白复合物，是粘液性卵巢癌较好的血清肿瘤标志物，正常组织一般很少表达[15]。本次研究中，恶性组CA72-4水平高于良性组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，对卵巢癌的阳性检出率是32.7%，特异度相对较高为91.7%，有助于卵巢癌的诊断。

ROMA指数是一种卵巢恶性肿瘤风险判定规则。此次研究中，恶性组ROMA指数的水平及阳性率，均相应高于良性组和对照组，且其阳性率均高于组内其他单项及联合检测。由表3可知，ROMA指数对卵巢癌诊断的灵敏度高于四项标志物联合检测，由此可见，ROMA指数对盆腔肿块良恶性的筛查具有十分重要的意义。以良性组为参照绘制ROC曲线图，由表4、图1可知，ROC曲线下面积最大的是ROMA指数，为0.880，对卵巢癌的诊断效率最高。所以ROMA指数可以作为一种重要的检测手段，帮助临床医生对卵巢癌进行更准确的诊断。

本研究结果显示：恶性组的HE4、CEA、CA125、CA72-4的水平和ROMA指数较良性组和对照组升高，差异有统计学意义(P<0.05)，且良性组和对照组组间差异无统计学意义(P>0.05)，说明四项参数及ROMA指数仅在恶性病变时显著增高。肿瘤标志物单项检测阳性率均不够理想，联合检测提高了卵巢癌诊断的阳性率，而ROMA指数对卵巢癌诊断的阳性率高于四项联合检测，这对盆腔肿块良恶性的区分具有重大临床应用价值。四项标志物联合检测的AUC面积高于四项中的任意一项，而ROMA指数的AUC更高，提高了对卵巢癌诊断的准确性。单项肿瘤标志物检测特异度较高灵敏度却不足，将上述四项标志物联合检测，灵敏度从单项最低21.8%提高到了78.2%，将ROMA指数联合四项标志物检测，灵敏度得到进一步提高，为92.7%，大大降低了漏诊率。

综上所述，HE4、CEA、CA125和CA72-4四项肿瘤标志物对于卵巢癌的诊断各有优势，但也存在不足，若将上述四项肿瘤标志物及ROMA指数联合检测，则既提高了阳性率、灵敏度又保证了特异度，对卵巢癌具有较大的预测价值，利于早期诊断和早期治疗，同时可使患者避免不必要的有创检查。