全自动毛细管电泳系统在地中海贫血筛查中的应用

邓 利 胜

(广东省龙川县妇幼保健院 河源 517300)

地中海贫血是临床上较为常见的贫血类型，主要是因为珠蛋白链减少或消失导致的血红蛋白异常性疾病，主要表现为溶血性贫血，影响患者的身体健康。在地中海贫血的诊断上，主要采用PCR(聚合酶链反应)技术与其他分子生物学方法相结合的方式，但是在筛查诊断过程中操作较为繁琐，且费用高，故难以大面积推广[1～2]。全自动毛细管电泳仪是目前最先进的且自动化程度最高的仪器，能够提供原试管连续进样到最后电泳结果剖析的全过程。本次研究旨在探究地中海贫血筛查中全自动毛细管电泳系统的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

将2016年8月～2018年6月经我院诊断证实为地中海贫血筛查的190患者作为此次研究对象，分别给予琼脂糖凝胶电泳技术与全自动毛细血管电泳技术进行诊断，年龄22～32岁，平均年龄(27.15±2.23)岁。所有研究对象均采用PCR基因诊断技术进行确诊。

1.2 研究方法

采集研究对象6ml空腹静脉血，平均放置在3个试管中，每个试管中2ml。1号试管注入已加EDTA-K2血常规管中，用血细胞分析仪进行血常规检测，其余两个试管分别采用全自动毛细管电泳系统、琼脂糖凝胶电泳技术进行血红蛋白电泳检测，具体的检测方法如下。

琼脂糖凝胶电泳技术：使用法国进口的电泳系统和配套扫描系统，配套血红蛋白电泳试剂盒。根据仪器说明书上的内容，逐步进行洗涤、溶血制作溶血液。点样：在电泳单元中放入点样梳，使用相应程序进行电泳。半小时后，仪器自动完成电泳和烘干等步骤。完成电泳后，要将胶片及时取出，放入到仪器染色单元。选择相应的程序，对仪器进行自动冲洗、染色、脱色、烘干。染色结束后，将胶片取出，并使用配套系统扫描结果。

全自动毛细管电泳系统：使用法国进口的全自动毛细血管电泳仪和配套血红蛋白电泳试剂盒，将标本直接放试管架，仪器自动吸样，溶血，稀释，电泳，出结果。

1.3 判定标准[3]

当血常规结果出现异常且MCV<82fl、MCH<27pg，HbA2<3.2%，但是血清铁结果正常，为α-地中海贫血；HbA2<3.5%、HbF正常或有所增加，为β-地中海贫血。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 两种检查技术检查结果的比较

全自动毛细血管电泳技术检出α-地中海贫血与β-地中海贫血率均高于琼脂糖凝胶电泳技术，两种检查技术在HbH检出率中比较并无差异(P>0.05)，见表1。

表1 两种检查技术检查结果的比较[n(%)]

疾病类型例数琼脂糖凝胶电泳技术全自动毛细血管电泳技术χ2Pα-地中海贫血2214(63.64)20(90.91)4.658<0.05β-地中海贫血2617(65.38)25(96.15)7.923<0.05HbH65(83.33)6(100.00)1.090>0.05

2.2 各种类型地中海贫血的红细胞、血红蛋白、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量指标对比分析

通过对各种地中海贫血患者的红细胞、血红蛋白、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量等指标进行比较，发现地中海贫血患者的平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白含量与异常血红蛋白病、HbCS而言相对较低，差异具有统计学意义(P<0.05)，见表2。

类型红细胞(×1012/L)血红蛋白(g/L)平均红细胞体积(fl)平均红细胞血红蛋白(pg)α-地中海贫血4.52±1.21120.25±12.5582.23±0.1526.21±0.07β-地中海贫血4.68±1.22117.84±12.2276.54±0.1226.56±0.08HbCS4.33±1.18118.49±12.4883.39±0.19a27.48±0.09aHbH病4.47±1.20117.87±12.2582.45±0.17a26.89±0.10a

注：aHbCS及HbH病比较，P<0.05。

3 讨论

地中海贫血是临床上较为常见的贫血类型，可发生于各个年龄段，其中，α型和β型地中海贫血是最为常见的[4]。现阶段主要采用PCR基因诊断技术对地中海贫血患者进行确诊，但此种技术对操作的要求高，操作较为复杂，加上诊断费用较高，故很难在我国人群筛查中大面积的推广和普及[5]。

本次研究比较了全自动毛细管电泳系统和琼脂糖凝胶电泳两种技术的筛查准确率，经研究发现，无论是在α型还是β型地中海贫血的筛查中，全自动毛细管电泳系统均有较高的检出率，说明此种技术优势更为显著。全自动毛细血管电泳技术在充满电泳液的石英毛细血管中进行电泳，也就使红细胞样品在溶血实际中被稀释之后再注射进毛细管的负极端，然后实施电泳分离，经靠近正极端的415nm光波检测装置进行相对定量。而琼脂糖凝胶电泳技术在对样品进行处理时其过程较为复杂，主要以人工操作为主，极易受到外界因素的影响，而全自动毛细血管电泳技术在处理样品的过程中将复杂的过程简单化，自动化的处理方法可以有效避免人工干扰对结果造成的负面影响，且精确度相对较高，持续时间更短，经济性较强[6]。此外通过研究发现地中海贫血患者的平均红细胞体积与平均血红蛋白浓度比HbCS及HbH病要低，也就是说地中海贫血患者红细胞体积减少、脆性降低可作为筛查的标准之一。

综上所述，在地中海贫血的筛查中，全自动毛细管电泳系统的检出率高，可为地中海贫血的诊断和治疗提供科学依据，值得推广和应用。