苏百维尔浸膏对四氯化碳致大鼠肝损伤的保护作用

苏百维尔（醒久液）浸膏组方为我院基于中医治未病理论指导形成的经验方，由葛根、枸杞、大枣、玉竹、乌梅五味药食同源中药材组成。葛根具有解肌退热、透疹、生津止渴、升阳止泻的功效，主要用于表证发热，麻疹不透，热病口渴，脾虚泄泻等。玉竹具有养阴润燥、生津止渴的功效，主要用于肺、胃阴虚证，咳嗽、咽干痰结等[1～3]。该方具有解热抗炎，养肝护胃等功效，可用于免疫力低下、肝功能受损、慢性胃病等。本研究利用现代药理学理论对该方进行药效学验证，为该方二次开发提供理论依据，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 试验药品及试剂 苏百维尔浸膏组方为葛根、枸杞、大枣、玉竹、乌梅，加10倍量水浸泡45min，煎煮3次，每次煎煮1.5h，滤过，合并煎液，减压浓缩至流浸膏，4℃冰箱冷藏存放。其原药材含量为 0.268g/ml，批号：20180516。多聚甲醛，批号：20180112，规格：500g/瓶，国药集团化学试剂有限公司生产。

1.1.2 试验动物 SD大鼠，SPF级，全雄，体质量180～220g，由西南医科大学试验动物中心提供，试验动物生产合格证号：SCXK（川）2018-17，试验在西南医科大学城北校区试验动物中心进行。肝脏病理组织学检测委托成都里来生物科技有限公司完成。

1.2 试验方法

1.2.1 剂量设计 根据《保健食品检验与评价技术规范2003》相关规定，设计苏百维尔浸膏高剂量（H）为人体日用量30倍（2 041mg葛根每千克大鼠体重）、苏百维尔浸膏中剂量（M）为人体日用量10倍（680mg葛根每千克大鼠体重）、苏百维尔浸膏低剂量（L）为人体日用量5倍（340mg葛根每千克大鼠体重）。按每次浸膏灌胃2ml/100g计算，保持处方药材比例不变以主药示例，苏百维尔浸膏H、M、L浓度应分别为 102、34、17mg/ml。

1.2.2 分组与给药 将大鼠适应性喂养1周后，随机均分为模型组、空白组、苏百维尔浸膏高、中、低剂量组共5组，每组10只。对苏百维尔浸膏高、中、低剂量组开始灌胃给予对应剂量苏百维尔浸膏2ml/100g，每日1次，空白组灌胃给予等容量生理盐水，持续30天，期间将动物每周称重2次，以调整受试样品剂量。

1.2.3 造模 试验第30天各组动物隔夜禁食不禁水16h，除空白组外各组大鼠一次性给予四氯化碳（5ml/kg）灌胃，空白组给予等容量食用植物油。4h后，用药组和空白组继续灌胃给予对应受试品和生理盐水[4，5]。

1.2.4 指标测定 于第30天末次给药24h后，乙醚麻醉各组动物，剪开胸腔心脏取血5ml于EP管，3 000r/min离心，取血清按试剂盒方法测定ALT、AST。采血后取肝脏左叶，在4%多聚甲醛固定液中固定[6]，送病理组织学镜检。

1.2.5 统计学分析 所有数据使用Excel建立数据库，采用SPSS 12.0软件进行统计学分析，计量资料以±s表示，组间数据比较采用双侧t检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 苏百维尔浸膏对大鼠ALT、AST的影响模型组与空白组AST、ALT水平具有统计学差异（P<0.05），提示造模成功。其余各组AST、ALT水平与模型组比较，差异均具有统计学意义（P<0.05），其余各组与空白组比较差异无统计学意义（P>0.05），提示苏百维尔浸膏3个剂量均对大鼠化学性肝损伤导致的转氨酶升高有一定抑制作用，见表1。

表1 苏百维尔浸膏对大鼠ALT、AST水平的影响（U/L，±s）

表1 苏百维尔浸膏对大鼠ALT、AST水平的影响（U/L，±s）

注：与空白组比较，*P<0.05；与模型组比较，ΔP<0.05

组别 n AST ALT空白组 10156.13±37.6949.88±6.01模型组 10379.89±145.11* 298.89±171.45*苏百维尔H组 10136.60±25.56Δ 55.90±8.34Δ苏百维尔M组 10202.29±53.73Δ 64.43±21.33Δ苏百维尔L组 10219.56±134.93Δ 84.44±31.58Δ

2.2 大鼠肝脏病理学的改变空白组肝脏被膜完整，门管区结构完整，未见明显病理变化；模型组肝索排列紊乱，肝小叶内肝细胞气球样变，肝细胞肿大，胞浆疏松成网状，半透明，肝细胞灶状坏死，炎性细胞浸润；苏百维尔浸膏H组、M组肝脏被膜完整，有少量或部分肝细胞空泡变性，胞质内出现空泡状或颗粒状，门管区结构完整，未见明显病理变化；苏百维尔浸膏L组肝脏被膜完整，肝索排列紊乱，部分肝小叶内肝细胞气球样变，肝细胞肿大，胞浆疏松成网状，半透明，呈球形；部分肝细胞空泡变性，胞质内出现空泡状或颗粒状物质，胞质染色不均，门管区未见明显病理变化，见图1。

图1 各组大鼠肝脏病理镜检

3 讨论

随着社会生活节奏加快，人们熬夜、酗酒、饮食不规律等不健康的生活方式导致肝脏负担加重，肝功能受损，患有慢性肝病人群逐渐增多。唐代名医孙思邈认为：“上工治未病，中工治欲病，下工治已病”，中医经典理论对调理和预防肝病有自身的特色。苏百维尔浸膏组方为我院基于中医治未病理论指导形成的经验方，具有解热抗炎、养肝护胃等功效。本研究利用现代药理学理论对该方进行药效学验证，为该方二次开发提供理论依据。

该方的开发初衷是研发一种具有养肝护胃、提神醒脑功效的纯中药饮品。主要针对长途驾驶人员（缓解长时间驾驶疲劳和饮食不规律造成的慢性胃病）、饭店食客（缓解辛辣食物对胃肠道的刺激性）、长期应酬者及其他亚健康人群。目前市场上以植物为基础开发的饮料较多，但以中医理论为基础，且作用于亚健康人群，具有保肝作用的产品，尚未出现。苏百维尔浸膏及饮品的开发，将会填补该市场空白。

苏百维尔浸膏组方均为药食同源中药材，而传统药食同源中药材主要作为食材或佐料用于烹饪。本品以中医理论为指导，利用药食同源中药材作为饮品进行开发，并以现代药理学的理论对其功效进行验证。试验结果中，用药组动物肝脏病理组织学检查中仅发现有空泡形变或气球样变，而未出现模型组动物的炎性浸润及灶状坏死，这提示苏百维尔浸膏对大鼠肝脏化学损伤带来的炎性病变有抑制作用，但对肝细胞受损后水分增多引起肝细胞胀大、胞浆疏松化影响不明显。本试验仅对苏百维尔浸膏对肝损伤的保护作用进行了生化指标和病理组织学方面的药效学验证，而浸膏中具有保护作用的有效部位群和单体以及可能的作用机制，还需进一步研究探讨。