工业大麻叶提取大麻二酚工艺研究

郝红江 孙武兴 邢俊波 马燕珠 徐云云

摘要：为了优选工业大麻叶中大麻二酚的提取工艺。以出膏率和大麻二酚的含量为指标，应用正交试验设计筛选了工业大麻的最佳提取工艺条件。结果表明：最佳提取工艺为D2A2B1c3，即用7倍量的60%乙醇热回流提取3次，2h/次;优选得到的工艺稳定可行。

关键词：大麻;大麻二酚;提取工艺

中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2019）20-0149-02

1引言

大麻叶来源于桑科大麻（Cannabis sativa L）。大麻是一种经济价值极高的作物，全身是宝，茎皮纤维长而坚韧，广泛应用于纺织业。除此之外，大麻还具有极高的药用价值，在我国已有几千年药用历史，大麻叶、大麻花、大麻皮、大麻根及火麻仁等均可人药，大麻素是大麻中特有的萜类次生代谢产物，目前报道的大麻素就有120多种，其中主要活性成分为四氢大麻酚和大麻二酚等，四氢大麻酚因具有强致幻性和成瘾性使其应用受限，而大麻二酚无成瘾性且具有抗惊厥、抗风湿关节炎及抗焦虑等作用而成为近年来的研究热点。本文采用正交试验法探索大麻叶中的大麻二酚提取工艺，为大麻中大麻二酚的开发利用提供依据。

2材料与仪器

2.1仪器

安捷伦1260高效液相色谱仪（安捷伦公司）;电热恒温水浴锅（HH-8，常州荣华仪器制造有限公司）;电子分析天平（BSAl24S，sartorius）;电热鼓风干燥箱（GZX-9070MBE，上海博讯实业有限公司医疗设备厂）;纯水机（AXLA220-2，重庆阿修罗科技发展有限公司）。

2.2材料

药材样品本品为桑科大麻属植物（Cannabis sativaL.）的干燥叶，批号为20180502。

2.3试剂

大麻二酚标准品（含量99.0%，购自Cerlliant）;乙腈、甲酸為色谱纯，其他试剂均为分析纯。

3方法与结果

3.1大麻二酚的含量测定

3.1.1对照品溶液的制备

精密量取1mg/mL的大麻二酚对照品溶液适量，置25mL容量瓶中，加甲醇稀释成每1mL中含大麻二酚150ug/mL溶液，作为对照品溶液。

3.1.2供试品溶液的制备

精密量取提取溶液适量，制成当量于药材浓度为0.0143g/mL的溶液，作为供试品溶液。

3.1.3含量测定

色谱条件：色谱柱为sepax GP-C18（4.6mmx 150mm，3um）;流动相为0.1%甲酸水：0.1%甲酸乙腈梯度洗脱;检测波长220nm;柱温30℃;流速1.2mL/min;进样量10uL。梯度洗脱条件见表1。

3.1.4出膏率的测定

精密吸取提取液100mL，水浴蒸干，105℃烘至恒重，精密称定，计算出膏率。

3.2正交试验筛选大麻二酚的提取工艺

3.2.1正交试验设计

100g药材，选用L9（4³）正交试验表，以大麻二酚含量和出膏率为指标，选取乙醇浓度、乙醇用量、回流提取时间及提取次数4个影响因素，因素水平见表2。

3.2.2试验结果

通过正交试验，结果与方差分析见表3、表4、表5。

3.3验证试验

为了确保该提取工艺的可行性与合理性，按照上述提取方案，分别进行了3次验证试验。

4结论

由表3、表4可看出，各因素对浸膏得率的影响因素从大到小依次为D>A>C>B，且以D3A2C3B2为佳。由表3、表5可看出，各因素对大麻二酚含量的影响因素从大到小依次为D>A>B>C，因素D和A对大麻二酚含量有显著影响，且以D2A2B1C3为佳。对于浸膏得率影响，D2和D3的结果差异很小，B1和B2的结果差异也很小。考虑成本因素，故确定最佳提取工艺为D2A2B1C3，即用7倍量的60%乙醇热回流提取3次，2h/次。经过3次验证，结果重复性良好。