围生期孕妇B族链球菌带菌情况对妊娠结局的影响及耐药性分析

2019-11-14刘晓一凌云映王立丽刘建晖祁小真

国际检验医学杂志 2019年21期

刘晓一，刘畅，凌云映，陈熙，丁晗，王立丽，刘建晖，祁小真

(清华大学第一附属医院检验科，北京 100016)

B族链球菌(GBS)又名无乳链球菌，是一种革兰阳性链球菌。GBS主要定居于女性生殖道中，健康人鼻咽部也携带此菌。正常女性对此菌的抵抗力较强，但孕期女性雌、孕激素增加，糖原含量增高，阴道的pH环境改变可能导致阴道菌群失调[1]。GBS已被证实是孕产妇围生期感染的主要致病菌之一，在围生医学中占有不可忽视的地位[2]。

国内外研究均显示，孕妇在围生期发生GBS感染可能会导致早产、胎膜早破或产后感染等不良妊娠结局[3]。对于新生儿来说，顺产的过程中很有可能会被GBS感染，从而引发新生儿肺炎、败血症等疾病，甚至导致新生儿死亡[4]。本研究通过回顾性分析围生期(35～37周)孕妇GBS带菌情况对妊娠结局的影响及药敏情况，旨在为临床有效防治孕妇感染GBS，降低新生儿感染率及发病率提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料选取2017年4月至2019年2月在该院生产并自愿接受GBS产前筛查的3 055例孕妇。根据GBS培养结果分为带菌组，共95例。按1∶2比例在检测结果为阴性的孕妇随机抽取190例作为对照组。带菌组中初产妇54例，经产妇41例，年龄21～42岁，平均(30.56±4.59)岁，顺产55例，剖腹产40例。对照组中初产妇106例，经产妇84例，年龄18～40岁，平均(29.65±4.42)岁，顺产124例，剖腹产66例。2组孕妇的年龄、产次和生产方式比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。

1.2仪器与试剂 VITEK MS质谱分析仪及配套基质液、靶板、质控菌株大肠埃希菌ATCC 8739、VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定药敏仪及配套药敏卡、哥伦比亚血琼脂培养基均购自法国生物梅里埃公司；Todd-Hewrtt肉汤购自英国Oxoid公司；萘啶酮酸、多黏菌素购自中国北京奥博星生物技术有限责任公司；CO2培养箱购自中国广州安邦生物公司；触酶试剂和革兰染色试剂购自中国珠海贝索公司；金黄色葡萄球菌ATCC 29213购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

1.3方法

1.3.1标本采集根据2010年美国疾病预防控制中心发布的《围生期GBS预防指南》，孕妇需要在妊娠晚期35～37周进行GBS的筛查，推荐的取材方法[5]：先擦去外阴多余的分泌物，小心将1根无菌棉拭子置阴道下1/3处旋转1周取阴道分泌物，再将此拭子插入肛门，在肛门括约肌上2～3 cm处轻轻旋转取直肠分泌物。立即送检，用于细菌培养。注意不要使用直肠或阴道窥器。

1.3.2细菌培养将每份标本接种5%羊血的哥伦比亚血琼脂培养基和Todd-Hewrtt肉汤，将其置35 ℃、5%CO2中培养18～24 h。GBS菌落在血琼脂培养基上呈β溶血(狭窄)、灰白色、圆形、半透明、湿润、光滑，挑取可疑菌落进行分纯培养后，做涂片进行革兰染色镜检，镜下形态革兰阳性球菌，呈链状排列，触酶试验阴性确定为链球菌属，用全自动质谱分析仪鉴定为GBS，为GBS阳性。若没有观察到可疑菌落，将Todd-Hewrtt肉汤转种到5%羊血的哥伦比亚血琼脂培养基，观察同上。

1.3.3药敏试验采用全自动细菌鉴定药敏仪进行GBS药敏试验。

1.3.4临床处理根据2010年美国《围生期GBS预防指南》，所有GBS阳性孕妇临产或破水后预防性应用抗菌药物。首选青霉素和氨苄西林；对青霉素低危过敏妇女推荐用头孢唑啉，而对青霉素高危过敏者，则使用克林霉素。

1.3.5观察指标观察围生期孕妇GBS带菌率，分析临床常见7种药物的药敏试验结果，同时对比带菌组和对照组孕妇的妊娠结局、新生儿感染、新生儿评分等。

2 结果

2.1围生期孕妇GBS感染率 3 055例孕妇经检测共发现GBS阳性95例，阳性率为3.1%。

2.2药敏结果分析 95株GBS全部进行药物敏感性试验，7种抗菌药物的敏感率依次为青霉素(100.0%)、氨苄西林(100.0%)、左氧氟沙星(51.1%)、克林霉素(8.4%)、万古霉素(100.0%)、替加环素(100.0%)、利奈唑胺(100.0%)。见表1。

表1 95株GBS对临床8种抗菌药物的药敏结果分析(%)

2.32组孕妇的妊娠结局比较带菌组孕妇早产、宫内感染的发生率较对照组明显增高，差异均有统计学意义(P<0.05)；而2组孕妇胎膜早破、胎儿窘迫和稽留流产的发生率比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.42组新生儿结局比较带菌组新生儿感染的发生率较对照组明显增高，差异有统计学意义(P<0.05)，而2组的新生儿体质量和新生儿评分比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表2 2组孕妇的妊娠结局比较[n(%)]

表3 2组新生儿结局比较

3 讨论

对于妊娠妇女GBS的带菌率，可能与年龄、分娩情况、社会经济情况、种族、遗传等因素有关[6]。在不同的国家、地区差异性较大，国内外报道有所差别。国外研究显示健康人群GBS带菌率可达5%～35%[7]，我国妊娠妇女的带菌率为3.5%～32.4%[8-9]。如北京地区孕产妇带菌率为5.6%[10]，上海地区孕产妇带菌率为5.5%～7.4%[11]，河北地区的带菌率为9.5%[12]。

本院自2017年开始在临床开展围生期孕妇GBS的常规筛查，迄今共筛查3 055例孕妇，采用细菌培养法检测共发现GBS阳性孕妇95例，阳性率为3.1%，比国内一些报道低。原因可能是妊娠期妇女的GBS带菌率受到取材部位、培养基的不同及检测时间的影响[13-15]，也可能是妊娠期妇女保健、自我卫生等意识较强有关。还可能是阴道或肛周菌群较多，所以样本直接接种哥伦比亚血琼脂培养基时GBS生长受其他细菌影响较大。

李亚梅等[16]认为，孕妇携带GBS是宫内感染的高危因素。本研究结果显示，带菌组围生期孕妇发生早产、宫内感染的概率明显高于对照组，这与李亚梅的报道基本相符。不良的妊娠结局和新生儿感染的发生与多种因素有关，笔者认为GBS阳性可能是其中的原因之一。因此，围生期GBS感染可能会对孕妇造成一定的不良影响，同时GBS感染也可能增加新生儿感染的风险。因此，提倡围生期孕妇进行常规的GBS筛查。

药物敏感性试验结果显示分离培养的95例GBS对青霉素、氨苄西林、万古霉素、替加环素和利奈唑胺敏感率均为100.0%，对左氧氟沙星和克林霉素敏感率只有51.1%和8.4%，与国内其他研究相比，克林霉素的敏感率很低，可能与笔者做D试验复核有关。从药敏结果来看，GBS对青霉素、氨苄西林的敏感性很好，青霉素是预防用药的最佳选择，与美国疾病控制与预防中心推荐用药相符。若青霉素类及头孢菌素类药均过敏，则需考虑使用克林霉素作为备选药物。但药敏试验结果显示，克林霉素的耐药率高达91.6%，作为经验用药并不适用。有研究报道GBS对克林霉素的耐药主要由ermB基因介导。万古霉素敏感率是100.0%，但不易通过胎盘屏障，所以用在孕妇身上并不合适，但是新生儿发生GBS感染，在青霉素类及头孢菌素类均过敏时，万古霉素将是一个最终的治疗方法[17]。