萃取剂对GC-MS 法测定天麻茎秆化学组分的影响

2019-11-11贾长青雷茹淋桂干北

云南化工 2019年9期

贾长青，马瑞，雷茹淋，桂干北

(1. 铜仁职业技术学院民族中兽药国家地方联合工程中心，贵州铜仁 554300;2. 铜仁职业技术学院药学院，贵州铜仁 554300)

天麻（学名：Gastrodia elata Bl.）为兰科植物天麻的根茎。国内主要产地为云南、四川、贵州等地。贵州省德江县是天麻主产地之一，德江天麻因其个大、肥厚、有效成分含量高而闻名于世。广阔的市场前景使得天麻种植成为德江大健康产业的重点项目，现今德江县天麻种植面积近3000 亩。在采摘收获季节，大量的天麻地下块茎被收获。与此同时，每年随之产生的天麻地上茎秆部分有几十吨，它们很少被重复利用，多数被作为烹饪燃料或者被遗弃，使得巨大的资源没有得到有效利用。

目前，对天麻地下块茎的主要成分和生物活性研究较多，其主要起药理作用成分为天麻素，主要功效为息风止痉，平肝潜阳，祛风通络等[1-3]。此外现在对天麻地上茎秆部分的研究也表明，天麻茎秆中也含有一定数量的天麻素，对天麻茎秆的化学成分及生物活性也有一定的研究[4-6]。目前对天麻地上茎秆化学成分的提取方法主要有水提法和乙醇提取法[7-8]，溶剂对其中化学组分鉴定的影响尚不明确。因此本文采用极性溶剂甲醇和非极性溶剂四氯化碳对天麻茎秆化学成分进行提取，结合以往工作，比较研究萃取溶剂对化学组分鉴定的影响。

1 材料与方法

1.1 材料来源、溶剂与仪器

试验用天麻地上茎秆从德江天麻种植基地采集。试验所用有机试剂均为常规的分析纯试剂。

GC-MS 法所用分析仪器为HP6890/5975C 气质联用仪( Agilent. )。

超声波发生器型号为洁盟JP-060S 超声波发生器。

1.2 试验过程

取两份新鲜天麻茎秆，每份100g，干燥粉碎后分别置于两个圆底烧瓶中。在55 ℃下，分别使用甲醇和四氯化碳作为提取溶剂，在超声波发生器中，边搅拌边提取30min，重复提取3 次，合并滤液，旋转蒸发得天麻茎秆提取浸膏。分别得甲醇提取浸膏3.2g，四氯化碳提取浸膏1.1g。

1.3 GC-MS 分析条件的选用

色谱柱为FB-5MS (30m×0.25mm×0.25μm)弹性石英毛细管柱，色谱柱温度初始46 ℃，然后以6℃/60s 的速度升温至310℃，维持15 min，整个检测过程运行时间，1h；汽化室温度250℃；载气为高纯氦气（He，99.999%)；柱前压7.06 Pa，载气流量1.0mL/min；分流进样时比例为20∶1；溶剂延迟时间：300s。离子源为EI 源；EI 源运行条件为常规运行条件[10]。

参照[10]中气质分析条件。

1.4 地上茎秆中化学组分鉴别

通过质谱计算机数据系统检索、文献检索及核对标准质谱图来确定总离子流图中的各峰代表的挥发性化学成分，用峰面积归一化法测定了各化学成分的相对质量分数[9]。

2 结果与分析

测试表明（见表1），在甲醇为萃取溶剂下，选用合适气质条件，从天麻茎秆提取浸膏中共检测出44 种峰面积较大化合物，占总数的88.386%。其中38 种化合物通过比对标准谱和查阅文献后，可以确认。甲醇提取浸膏总主要化学成分为苯酚、醇类、酯类、酰胺、酮类、甾醇等极性较大的化合物。与乙醇做提取溶剂时相比[10]，可识别的化学组分明显更为丰富，更有助于天麻茎秆化学组分的研究。

测定表明（见表2），使用四氯化碳作萃取溶剂，在气质条件合适情况下，从天麻茎秆提取浸膏中共检测出50 种峰面积较大化合物，占总数的80.096%。其中43 种化合物通过比对标准谱和查阅文献后，可以确认，其中有24 种化合物在甲醇提取浸膏中同样被检出。四氯化碳提取浸膏总主要化学成分为烷烃、醛类、酮类、酯类、甾醇等。与甲醇、乙醇[10]等极性溶剂做提取溶剂时相比，可识别的化学组分中烷烃等极性较小的化合物明显增多，更有助于天麻茎秆化学组分的研究，可以根据所需分析目标的不同选用合适的提取溶剂。

3 结论

研究表明，使用不同萃取溶剂时，利用气质联用法鉴别其中化学组分有较大的差别。使用甲醇作萃取溶剂时，在合适气质条件下，38 种化学组分可被鉴别确认；与乙醇做提取溶剂时相比[11]，可识别的化学组分明显更为丰富。使用四氯化碳作萃取溶剂时，43 种化学组分可别鉴别确认，其中有24 种化合物在甲醇提取浸膏中同样被检出；与甲醇、乙醇[12]等大极性溶剂做提取溶剂时相比，可识别的化学组分中烷烃等极性较小的化合物明显增多，更有助于天麻茎秆化学组分的研究，可以根据所需分析目标的不同选用合适的提取溶剂。