紫苏黑木耳乳的制备工艺研究

张 宸，张凤秋，高贤娴，王丹妮，牛志多，洪 铁,*

(1.吉林大学药学院药理教研室，长春130021;2.锦州市林业草原保护中心，锦州121000;3.吉林省中医药科学院，长春130012;)

黑木耳（Auricularia auricula）属真菌门担子菌亚门木耳科木耳属，其主要活性成分是多糖[1]研究表明，黑木耳多糖具有降血脂、抗血栓、降血糖、抗凝血、抗衰老作用，抗肿瘤、提高免疫力等生物学活性[2]。

紫苏（Perillafrutescens）为一年生唇形科草本植物[3]。紫苏籽油作为一种药食两用的植物油,有着抗衰老、降血脂、防癌等诸多功效。

紫苏黑木耳乳，是由紫苏子油与黑木耳提取的多糖经混合、均质乳化等工艺制成的混悬乳液。本研究通过对混悬乳液中配方工艺优化，以及混悬乳液的制备，为紫苏黑木耳乳工业生产提供理论基础。[4]

1 材料与仪器

1.1 仪器

BS-124S电子天平，北京赛多利斯仪器系统有限公司；HH-W420S恒温电热三用水箱，金坛市现代仪器厂；高速万能粉碎机，北京市永光明医疗仪器有限公司；FSH-2可调高速匀浆器，常州市金坛区环宇科学仪器厂。

1.2 材料

黑木耳购于吉林桦甸；紫苏子油由长春花香四季科技有限公司生产；葡萄糖对照品购自中国食品药品检定研究院；纤维素酶（酶活力≥400 U/mg）、果胶酶(酶活力≥30 U/mg）、木瓜蛋白酶(酶活力≥30 U/mg）均购自自天津利华酶制剂有限公司；蜂蜡购自杭州保灵养泰禾生物科技有限公司；试剂均为分析纯，水为超纯水。

2 实验方法

2.1 黑木耳多糖提取工艺的确认及黑木耳多糖含量的测定

2.1.1 黑木耳多糖提取方法

参考姜洪彬[5]等人的方法，采用复合酶法提取黑木耳多糖。

流程：黑木耳粉碎过筛→加水和2%复合酶→酶解→加热提取→过筛→收集滤液→浓缩干燥→黑木耳多糖粉。

2.1.2 黑木耳多糖提取物含量测定方法（苯酚-硫酸法）

2.1.2.1 标准曲线的制备：

精确称取105℃干燥至恒重葡萄糖标准品0.04g，用蒸馏水定容至100ml，得葡萄糖标准溶液。将该标准溶液稀释成浓度为 40、20、10、5、2.5、1.25μg/ml的溶液，分别吸取稀释液2ml，加入5%的苯酚溶液1ml，混合后迅速加入5ml浓硫酸，混匀，30℃水浴中显色10min，另以蒸馏水代替葡萄糖溶液同上操作为空白对照，在490nm波长处测定吸光度。以葡萄糖糖浓度（C）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标，绘制标准曲线。

2.1.2.2 测定方法：

称取0.1g黑木耳多糖样品，精密称定，加蒸馏水定容至100ml，制成黑木耳多糖溶液，样品稀释10倍后，精密量取该溶液1ml，按上述葡萄糖吸光度测定方法操作，测定吸光度，根据标准曲线计算多糖的浓度和样品中多糖的含量。

2.2 紫苏黑木耳乳工艺条件的考察

2.2.1 紫苏黑木耳乳配方比例考察

本品是由紫苏子油与黑木耳提取的多糖及辅料制成的混悬乳。由于混悬乳易出现药液分层现象，影响本品的服用，因此应对混合比例进行实验考察，以便制成稳定的混合乳液。

2.2.2 紫苏油用量的考察

紫苏子油合理的用量即可保证混悬乳物料具有良好的流动性，以及物料适宜的粘度，提高产品的稳定性。通过查阅文献和实验摸索，对多糖提取物与紫苏子油配比进行研究，根据混悬乳流动性和颗粒分布均匀度综合评价，确定最佳配比。

2.2.3 多糖粉粒度的考察

以沉降体积比为指标，考察多糖粉的粒度对混悬乳液稳定性的影响，选取不同粉碎粒度的黑木耳提取多糖粉适量，分别按配方比例加入紫苏子油，制成混合乳液，精密称取样品适量，转入具塞量筒中，盖塞，记录混悬液原始高度H0，静置3h后，记录最终高度H，按公式F=H/H0计算沉降体积比，确定多糖粉的最佳粉碎粒度。

2.2.4 助悬剂的选择和用量

为保证混悬乳中多糖颗粒均匀分散在紫苏子油中，防止在贮存过程中颗粒沉降，须加入一定量的助悬剂，以提高制剂的稳定性。通过查阅文献及多次实验摸索确定以蜂蜡作为稳定剂添加。

称取紫苏子油适量，加入不同比例的蜂蜡，60℃加热熔融，放冷备用。分别称取上述混合溶液适量，按配方工艺加入多糖粉，制成混合乳，转移到具塞量筒中，37℃水浴保温，静置3h后，记录沉降体积比 F＜0.9时所需的时间并观察药液性状，确定蜂蜡的最佳加入量。

3 结果

3.1 多糖含量测定工作曲线结果

结果见表1，标准曲线的回归方程为A=0.0180C+0.0015（R=0.9999），式中：A 为吸光度；C 为葡萄糖溶液浓度，单位 μg/ml。

表1 葡萄糖标准曲线表（浓度单位：ug/ml）

3.2 多糖提取物含量测定结果

通过2.1.2.2中方法测得三次多糖含量的均值为96.2%，多糖提取率超过20%，说明该提取工艺稳定可靠，得到的黑木耳多糖可用于进一步应用。

3.3 紫苏黑木耳乳配方实验结果

3.3.1 紫苏子油与黑木耳多糖配比实验结果

表2结果表明：多糖提取物粉与紫苏子油1：1.5混合制成的混悬乳物料的状态较好，有适宜的粘稠度和较好的流动性，确定此配比为最佳工艺参数，后续实验采用此配方进一步研究。

表2 紫苏子油与黑木耳多糖不同配比对混悬乳的影响

3.3.2 多糖粒度实验结果

表3结果表明：随着膏粉粒度的增加，沉降体积比逐步增大，表明药液的稳定性逐步增强，且膏粉粒度达到120目水平以上，药液沉降体积比达到0.90以上，因此应当取过120目筛的多糖粉制备紫苏黑木耳乳液。

表3 多糖粒度对混悬乳液稳定性的影响

3.3.3 蜂蜡用量实验结果

如表4所示，蜂蜡用量为紫苏子油的8%及以上时，混悬乳液在24h内才不发生明显沉降，蜂蜡比例超过12%时，混悬乳液呈半固体，流动性很差。

当蜂蜡与紫苏子油的比例达到0.08:1时，混悬乳液发生明显沉降需要的时间较长，药液较稳定，流动性较好，故配方选用加入紫苏子油8%用量的蜂腊作为助悬剂。

表4 蜂蜡用量对混悬乳液性质的影响

4 结论

本研究优化后的紫苏黑木耳乳制备工艺为：称取紫苏子油，加入蜂蜡，于60℃加热熔融，放冷备用。黑木耳提取多糖，粉碎成能过120目筛的细粉，加入到上述冷却的紫苏子油蜂蜡的混合液中，充分混匀，用胶体磨均质乳化。通过本文的研究，为紫苏黑木耳乳提供了科学、可靠的制备工艺，使紫苏黑木耳乳的疗效和质量得到保障，适合进一步工业生产。