围产期妇女感染GBS 体液免疫功能变化的研究

杨丽玮 郭淑丽 贾海英 马晶 王婧

无乳链球菌，又称B群链球菌（B group streptococcus，GBS），曾被认为是美国新生儿细菌感染的首位致病菌，常定殖在肠道和生殖道，是引起孕妇胎膜早破、产后感染的主要病原菌[1-3]。正常情况下, 各种淋巴细胞亚群、免疫球蛋白含量等保持一定的数量和比例，维持着机体正常的免疫功能。一旦外源病原微生物侵入，机体会出现各样变化淋巴细胞或免疫球蛋白的消长, 以抵御病原微生物的感染。GBS可通过垂直传播或上行感染，引起新生儿败血症和脑膜炎[4-5]。本文旨在了解本地区GBS感染的围产期妇女机体体液免疫功能状态，为孕妇GBS感染的临床诊治工作奠定基础，具体如下。

1 资料与方法

1.1 病例资料

收集2017年1月—2018年9月新疆维吾尔自治区人民医院门诊及住院的35～37周常规产检者，进行GBS带菌状况筛查，收集病例组GBS阳性者孕妇135例，年龄25～46周岁，汉族51例，维吾尔族79例，回族3例，哈萨克族2例，平均年龄（33.2±4.5）周岁，对照为同孕期35～37周的健康体检者为对照组，GBS阴性者100例，年龄20～43周岁，平均年龄（31.89±3.3）周岁，汉族41例，维吾尔族55例，回族2例，哈萨克族2例，且年龄（t=0.259，P=0.796）、民族（χ2=0.617，P=0.685）无统计学差异。所有受试者均经B超证实为单胎宫内妊娠，胎儿存活，自愿加入本研究且签署知情同意书，排除标准：多胎妊娠者；免疫缺陷者；精神病患者；不愿意合作者，本研究项目已通过医院伦理委员会审核批准。

1.2 细菌培养及鉴定方法

将分泌物标本接种于珠海迪尔生物工程有限公司的B群链球菌选择性显色培养基，并采用B群链球菌培养分析系统进行自动判别。阳性者取肉汤转种，挑取可疑菌落涂片行革兰染色阳性链球菌，触酶试验阴性、最终通过梅里埃MS确认GBS。试剂由法国梅里埃生物有限公司提供。所有标本检测均严格按照试剂盒说明书及相应仪器标准操作程序进行，并进行实验室质量控制。

表1 GBS 阳性孕妇组与健康对照组免疫球蛋白含量（）

表1 GBS 阳性孕妇组与健康对照组免疫球蛋白含量（）

组别 IgG（g/L）IgA（g/L） IgM（g/L）C3（g/L）C4（g/L）CRP（mg/L）KAP（g/L）LAM（g/L） β2-MG（mg/L） KAP/LAM病例 6.62±4.87 3.46 ±0.58 3.06±0.43 1.22 ±0.65 0.3±0.07 12.35±4.43 6.85±1.43 3.65±1.08 2.51±0.78 1.92±0.55对照 13.52 ±5.73 3.38±0.72 0.95±0.35 1.15±0.52 0.38 ±0.06 3.81±0.74 6.79±1.85 3.76 ±1.12 0.98±0.33 1.89 ±0.57 t 值 9.99 0.12 11.5 0.76 0.95 15.4 0.49 0.74 13.2 1.50 P 值 0.00 0.91 0.00 0.45 0.34 0.00 0.62 0.46 0.00 0.14

1.3 免疫球蛋白和补体检测方法

采用速率散色比浊法，利用BN proSpec特种蛋白分析仪进行测定受试者血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）和补体C3、补体C4、CRP、KAP、LAM、 β2-MG，试剂由Marburg GmbH公司提供，室内质控均在控。

1.4 统计学方法

使用SPSS 13.0统计学软件采集和处理数据。计量资料呈正态分布，以表示。病例组与对照组民族比较采用χ2检验，病例组与对照组年龄比较及免疫球蛋白含量组间比较采用t 检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

135例GBS阳性孕妇血清IgG（6.62±4.87）g/L明显低于健康对照组（13.52±5.73）g/L，t=9.99，P=0.00，而IgM、 CRP、β2-MG分别为（3.06±0.43）g/ L、（12.35±4.43）mg/L、（2.51±0.78）g/L高于健康对照组（0.95±0.35）g/L、（3.81±0.74）mg/L、（0.98±0.33）g/L，差异有统计学意义（t=11.5，10.4，13.2，P=0.00，0.00，0.00）；而两组间IgA、补体C3、补体C4、KAP、LAM、KAP/LAM无统计学差异（P＞0.05），具体详见表1。

3 讨论

由于孕期机体免疫功能减低，孕妇中的GBS携菌率较高。美国和北欧等国家孕妇携菌率相似约5%～35%；而国内孕妇GBS携菌率约2.4%～10.1%。各年龄携菌率无明显差异，但种族和地区的差异比较大，GBS的检出率受较多因素的影响，例如采集的样本质量、检测时间、检测方法等。妊娠妇女感染GBS的高危因素包括肥胖、多次妊娠、多个性伴侣等。

正常妊娠时，母体会产生维持妊娠的一种独特型封闭抗体，利于胚胎着床、生长、发育和成熟，免受致敏淋巴细胞的攻击[6]。本研究发现妊娠合并GBS感染时母体IgG水平明显降低，提示IgG类封闭抗体减少，母胎间的免疫耐受破坏，从而引起异常免疫反应，出现胎膜早破、早产、流产等现象。GBS的主要致病因子包括荚膜多糖、溶血素等，可对孕产妇和新生儿造成严重后果[7]，但目前，关于妊娠合并GBS感染者血清免疫球蛋白变化的研究不多，有报道孕妇IgM水平低于非孕期妇女[8]，本研究发现妊娠合并GBS感染者IgG降低而IgM显著性增高，可能与IgG减少导致IgM反应性增多有关，或是由GBS通过其致病因子引发免疫反应所致，另外，大分子IgM不能经尿液排出也会致其增高。

补体是存在于人体和动物血清、组织液，经活化具有酶活性的蛋白质，在细胞免疫和体液免疫介导的胎儿损伤中发挥重要作用[9]。CRP是一种急性时相蛋白，是独立于年龄、体重指数、CD4淋巴细胞之外的预测因子，彭凤梅[10]，张艳[11]通过多元回归分析证实CRP水平与孕妇宫内感染相关，CRP升高可预测如GBS等的宫内感染，与本研究结论一致，孕妇出现GBS感染时，炎症指标CRP会升高。β2-MG是一种低分子量蛋白质，正常人血中含量甚微，但若受病毒感染或肾脏早期损伤，血中β2-MG含量可升高[12]。唐永霞[13]报道β2-MG随着孕周的增加而增高，但在32 周之后升高的比例不大。本研究显示GBS感染的孕妇β2-MG水平会较正常孕妇升高，提示GBS感染后机体可能出现肾脏的早期损伤，由于GBS致病力较强，且孕妇GBS感染时机体出现体液免疫功能失衡。GBS的主要黏附作用是通过与宿主细胞的外基质蛋白结合，从而启动细菌与宿主细胞表面整联蛋白的相互作用，通过该途径入侵细胞[14]。研究这些细胞间的相互作用及其相关蛋白，可为开发新的治疗药物提供科学依据。

综上所述，我们有必要关注GBS阳性孕妇肾脏的情况，同时需要进一步扩大样本量，并进行分子生物学、毒力学等方面的深入研究。