2019 年江苏省兽医系统实验室检测能力比对

徐小艳，陈昌海，王相子，开 妍，邱 冬

（江苏省动物疫病预防控制中心，江苏南京 210036）

2019 年6 月，根据农业农村部办公厅和江苏省农业农村厅有关兽医系统实验室检测能力比对的文件要求，江苏省动物疫病预防控制中心组织实施了2019 年度江苏省兽医系统实验室检测能力比对。全省12 个市级、65 个县级实验室参加了比对，均在规定时间内完成了各项比对任务，比对结果较客观地反映了江苏省兽医系统实验室的检测能力现状。为更好地发挥比对结果作用，本文对此次比对结果进行了分析和讨论，旨在进一步做好兽医系统实验室管理工作，促进全省兽医系统检测能力提升。

1 材料与方法

1.1 比对项目

根据市级和县级实验室检测能力的不同，本次比对设置了市级比对项目和县级比对项目两大类。市级设置了高致病性猪蓝耳病病毒检测、非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gE 抗体检测和新城疫抗体检测4 个项目；县级设置了新城疫抗体检测、非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gB 抗体检测和小反刍兽疫抗体检测4 个项目。

1.2 比对方法、标准和试剂

针对不同的比对项目，明确了各自检测方法，采用国家标准或国家参考实验室推荐的方法进行比对，涉及5 种动物疫病、5 种检测方法。所用试剂由参加比对的实验室自行准备（表1）。

1.3 比对样品

由江苏省动物疫病预防控制中心完成所有比对项目样品的制备、标定、分装、编号和保存。分发时将样品用装有冰袋的冷藏箱运送，由各个市级实验室派专人在规定的时间内统一领取本市所有样品，并在当日分发到辖区内各个实验室。

1.3.1 高致病性猪蓝耳病病毒检测样品 参考值为阳性和阴性的高致病性猪蓝耳病疫苗稀释物样品中随机抽取5 份，组成1 组样品。

1.3.2 非洲猪瘟病毒检测样品 参考值为阳性和阴性的盲样中随机抽取5 份，组成1 组样品。

1.3.3 猪伪狂犬病gE 抗体检测样品 参考值为阳性和阴性的猪血清样品中随机抽取5 份，组成1组样品。

1.3.4 猪伪狂犬病gB 抗体检测样品 参考值为阳性和阴性的猪血清样品中随机抽取5 份，组成1组样品。

1.3.5 新城疫抗体检测样品 参考值为3log2、6log2、9log2 的鸡血清样品中随机抽取5 份，组成1 组样品。

1.3.6 小反刍兽疫抗体检测样品 参考值为阳性和阴性的羊血清样品中随机抽取5 份，组成1 组样品。

1.4 结果评判标准

高致病性猪蓝耳病病毒检测、非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gE 抗体检测、猪伪狂犬病gB抗体检测和小反刍兽疫抗体检测项目的评判标准：样品检测值与参考值完全一致判为正确，即阳性样品的检测值应为“阳性”，阴性样品的检测值应为“阴性”，否则判为错误；新城疫抗体检测项目的评判标准：检测值与参考值的偏差不超过1log2，判为正确，否则判为错误。

2 比对结果

2.1 总体情况

根据比对结果评判标准，在12 个市级、65个县级实验室中，有12 个市级和60 个县级实验室所有比对项目检测结果全部正确，其余5 个县级实验室部分比对项目检测值存在较大偏差；整体样品正确率为99.32%，实验室正确率为93.51%（表2）。

2.2 市级实验室比对

12 个市级实验室分别进行了高致病性猪蓝耳病病毒检测、非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gE抗体检测和新城疫抗体检测4 个项目的比对，所有检测值全部正确，样品正确率为100%，实验室正确率为100%。

2.3 县级实验室比对结果

65 个县级实验室参加了猪伪狂犬病gB 抗体检测、新城疫抗体检测和小反刍兽疫抗体检测比对，21 个县级实验室参加了非洲猪瘟病毒检测比对。有60 个实验室各个比对项目检测值均正确，实验室正确率为92.31%。个别实验室检测值出现较大偏差，1 个实验室非洲猪瘟病毒、3 个实验室猪伪狂犬病gB 抗体、1 个实验室新城疫抗体检测值出现较大偏差，样品正确率为99.17%（表3）。

表3 县级实验室检测能力比对结果

3 讨论

从比对结果来看，整体样品正确率为99.32%，实验室正确率为93.51%，说明参加比对的实验室均具备正常开展主要动物疫病监测和检测的能力与条件，对实验室质量管理较为重视，其检测能力与技术水平可以满足工作需要。需要关注的是，仍有个别县级实验室个别比对项目检测值存在较大偏差，说明这些实验室的质量管理和检测能力水平有待进一步提高。

在比对项目的设置上，根据当前非洲猪瘟疫情流行现状，首次在全省兽医系统实验室检测能力比对中设置非洲猪瘟病毒检测项目。在参加该项目比对的33 个实验室中，有32 个实验室检测值全部正确，实验室正确率为96.97%（32/33），有两份样品检测值出现较大偏差，样品正确率为98.79%（163/165）。同时，密切关注常见动物疫病检测能力，设置了高致病性猪蓝耳病病毒检测、新城疫抗体检测、小反刍兽疫抗体检测比对项目；着力推进动物疫病净化工作，设置了猪伪狂犬病gE 抗体检测、猪伪狂犬病gB 抗体检测项目，提高了检测能力比对工作的科学性、实用性和创造性，也取得了较满意的效果。

按市级和县级两类实验室进行统计，本次比对涉及12 个市级和65 个县级实验室。12 个市级实验室各个比对项目检测值均正确，样品正确率为100%，实验室正确率为100%；65 个县级实验室在4 个比对项目中，只有小反刍兽疫抗体检测项目的检测值全部正确，在非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gB 抗体检测和新城疫抗体检测3 个项目中，均出现个别实验室个别检测值出现较大偏差的情况，样品正确率为99.17%，实验室正确率为92.31%。结果表明：市级和县级实验室检测能力均达到较高水平，但市级实验室整体检测能力高于县级。这与之前的分析结果一致[1-2]，也进一步说明持续加强县级实验室建设的重要性和必要性。

按不同检测方法进行统计，将高致病性猪蓝耳病病毒检测和非洲猪瘟病毒检测归为PCR方法，将猪伪狂犬病gE 抗体检测、猪伪狂犬病gB 抗体检测和小反刍兽疫抗体检测归为ELISA 方法，将新城疫抗体检测归为HI 方法。三类方法的样品正确率分别为99.11%、99.15%和99.69%，均处于较高水平。但65 个县级实验室中，有44 个尚不能正常开展荧光PCR 检测，且大多数县级实验室技术人员对于分子生物学检测比较陌生，其操作水平和理论知识储备都存在很大上升空间，需要在完善分子生物学相关仪器设备配置的基础上，通过理论培训、实际操作等形式，进一步提高学习能力。

本次比对，各实验室自行准备的检测试剂涉及不同生产厂家，不同批次，但检测结果整体情况较好，各比对项目样品正确率均高于98%，说明目前的高致病性猪蓝耳病病毒检测、非洲猪瘟病毒检测、猪伪狂犬病gE 抗体检测、猪伪狂犬病gB抗体检测、新城疫抗体检测和小反刍兽疫抗体检测试剂质量较好。个别县级实验室的个别比对项目检测值出现较大偏差，可能是因为仪器设备配置不到位、理论知识学习不充分、技术人员操作不熟练等原因造成。

为进一步有效提升兽医系统实验室检测能力，发挥其在动物疫病防控中的重要作用，应加强以下工作：

一要高度重视检测能力比对工作。切实加强兽医实验室建设管理，落实相对稳定的实验室人员，保证实验室工作的连续性，采取各种措施减少拆迁、搬迁等不利因素的影响，保证实验室工作正常有序开展。本次比对中，个别市级和少量县级实验室由于拆迁、搬迁等原因未参加比对，或未按有关要求开展非洲猪瘟病毒检测工作，这些市、县要高度重视，加强实验室建设、仪器设备配置、人员配备，切实提高动物疫病防控能力。

二要强化整改完善。结合检测能力比对工作开展情况，认真总结经验，比对结果偏差较大的要深入分析，查找原因，研究制定改进和提高检测能力的措施，并狠抓落实，切实提高兽医实验室的能力和水平。

三要强化实验室质量管理。对照有关要求，采取针对性措施，进一步健全完善实验室质量管理体系。

四要强化培训指导。定期组织开展业务培训，提高实验室人员专业理论知识水平、设备维护使用能力、实验操作技能，全面提升实验室管理和运行水平。