冷浸提代替索氏抽提检测大豆粗脂肪酸值

武寅 王斯峥 杜娟 钱国平 周洲

摘要采用冷浸提方法代替索氏抽提法（GB 5009.229—2016）提取大豆中的粗脂肪，经过滤后蒸干残留的溶剂，再测定酸值。比较2种试验方法显示，冷浸提法检测结果与GB 5009.229—2016检测结果的相对相差为5.7%～12.4%，符合精密度要求，可节约检测时间6 h，场地占用少，操作方便，检测成本较低。

关键词冷浸提法;索氏抽提法;大豆;粗脂肪酸值;石油醚

中图分类号TS 207文献标识码A

文章编号0517-6611（2019）18-0215-03

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2019.18.060

开放科学（资源服务）标识码（OSID）：

Detecting Crude Fatty Acid Value of Soybean by Cold Extraction Instead of Soxhlet Extraction

WU Yin1，WANG Si-zheng2，DU Juan2 et al（1.Sinograin Zhenjiang Grains & OiLs Quality Testing Center Co.，Ltd.，Zhenjiang，Jiangsu 212006;2.Sinograin Oils and Fats Co.，Ltd.，Beijing 100043）

AbstractExtracting crude fat from soybean by cold extraction method instead of Soxhlet extraction（GB 5009.229-2016），after filtration， the residual solvent was evaporated and the acid value was measured. The comparison between the two experimental methods showed that the relative difference between the test results of cold leaching and GB 5009.229-2016 was 5.7% - 12.4%，the result met the precision requirements，the detection time can be saved for 6 hours， the site occupancy was small， and the operation cost was low.

Key wordsCold extraction method;Soxhlet extraction method;Soybean;Crude fatty acid value;Petroleum ether

大豆是我国主要的粮食作物之一，其中含有丰富的蛋白质、脂肪和膳食纤维等营养成分，营养价值很高，被称为“豆中之王”“绿色的牛乳”，是广受营养学家推崇的食物;同时大豆也是我国的一个非常重要的油料作物，由大豆加工生产的豆油以其物美价廉的特点成为我国人民餐桌上最主要的食用油之一[1]。它是人体不饱和脂肪酸的重要来源，能起到降低胆固醇的作用，对高血压、心血管疾病也有辅助治疗 功效[2]。

由于大豆富含蛋白质和脂肪，因此在储存过程中极易因为保管不善，出现吸湿生霉、发芽涨大、走油赤变、热损碳化、氧化酸败、腐败变质等不良现象[3]。大豆的粗脂肪酸值的结果是判断大豆储存品质的一个非常重要的指标。GB/T 31785—2015 《大豆储存品质判定规则》中推荐先用GB/T 14488.1—2008提取粗脂肪[4]，再按照GB 5009.229—2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》进行酸值的测定。此方法检测时间较长、步骤繁琐，且抽提出足够检测的脂肪需要较多的索氏抽提器和水浴锅，对实验室空间要求也较高[5]。因此，笔者考虑通过参考GB/T 5510—2011《粮油检验 粮食、油料脂肪酸值测定》方法，采用冷溶剂浸泡加振荡提取大豆粉中的脂肪，然后再按照GB 5009.229—2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》进行酸值的测定。

1材料与方法

1.1原料

国产东北大豆、进口阿根廷大豆、进口巴西大豆 （预估样品粗脂肪酸值检测结果分别为<1.0 mg/g、1.0～ 2.0 mg/g、>3.0 mg/g）[6]。

1.2试剂与材料

石油醚，沸点30～60 ℃，分析纯;乙醚，分析纯;异丙醇，分析纯;脱脂棉;滤纸;KOH标准溶液， 0.1 mol/L;酚酞指示剂，10 g/L;滤纸筒和脱脂棉;无石油醚可溶物。

1.3仪器及器具

分析天平，感量0.001 g;平板式加热器;旋转蒸发仪;保水磨;标准筛网，1.0 mm孔径;电热鼓风干燥箱;水浴锅;回流式抽提器;圆底烧瓶;微量滴定管，10 mL，最小刻度0.02 mL;锥形瓶（具塞），500 mL;锥形瓶，250 mL;康氏振荡器;短颈玻璃漏斗，90 mL;恒温水浴锅;索氏抽提器，250 mL。

1.4样品准备

1.4.1扦样、分样。

按照GB 5491—1985《糧食、油料检验 扦样、分样法》进行，样品应具有代表性。

1.4.2样品制备。

选择合适的分样器将样品进行缩分至约100 g，使用保水磨进行粉碎，并通过1.0 mm的筛网，混匀，装入磨口瓶或样品袋中备用。

1.5试样处理

1.5.1冷浸提前处理方法。

将粉碎后的样品置于500 mL具塞锥形瓶中，加入石油醚使溶剂高出料层4～5 cm[7]，加塞摇动几秒钟后，打开塞子放气，再盖紧瓶塞置于振荡器上振摇 2 h，取下锥形瓶，静置3～5 min，在玻璃漏斗上放入滤纸进行过滤，弃去最初几滴滤液，用洁净的250 mL锥形瓶收集剩余全部滤液[8-9]。

收集滤液的锥形瓶使用加热平板或旋转蒸发仪基本蒸干溶剂，再放入（103±2）℃电热鼓风干燥箱中烘干30～ 60 min，确保溶剂和水分等易挥发物完全蒸干，取出冷却至室温，锥形瓶中的油样即为待测大豆的粗脂肪样品。

1.5.2索氏抽提前处理方法。

按照GB/T 14488.1—2008《植物油料 含油量测定》中第8、9步的方法进行，获得的油样即为待测大豆的粗脂肪样品。

1.6测定

称取足量的油样按照GB 5009.229—2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》第一法进行酸值测定，记录消耗的氢氧化钾的体积V。

1.7结果表示

（1）粗脂肪酸值。按下式计算：

X AV=[56.1×c×（V-V0）]/m（1）

式中，X AV为酸值（mg/g）;V为油样消耗KOH标准滴定液的体积（mL）;V0为空白消耗KOH标准滴定液的体积（mL）;

c为KOH标准滴定溶液的浓度（mol/L）;m为油样的称样量（g）;56.1为KOH的摩尔质量（g/mol）。当酸值≤1 mg/g，计算结果保留2位小数;1 mg/g<酸值≤100 mg/g，计算结果保留1位小数;酸值>100 mg/g，计算结果保留整数。

（2）精密度。

根据GB 5009.229—2006精密度要求：当酸值<1 mg/g，在重复条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的15%;当酸值≥1 mg/g，在重复条件下获得的2次独立测定结果的绝对差值不得超过算数平均值的12%[10]。

2结果与分析

2.1冷浸提法试验重复性分析

选取国产东北大豆、进口阿根廷大豆和进口巴西大豆3种不同国别大豆，分别按照冷浸提法进行8次粗脂肪酸值的重复性检测试验，检测结果如表1所示。按照冷浸提法测得3种不同国别大豆8次平行试验结果的变异系数符合GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》中附录F中对于精密度的要求[11]，该方法变异程度较小，重复性良好。

2.22种检测方法检测结果比较

在国产东北大豆、进口阿根廷大豆和进口巴西大豆中每种分别选取3份大豆，分别按照GB/T 14488.1—2008方法抽提脂肪和冷浸提法抽提脂肪，再按照GB 5009.229—2016第一法进行酸值的滴定，检测结果如表2所示。由表2可知，冷浸提法检测结果与GB/T 14488.1—2008方法抽提脂肪检测结果的相对相差满足GB 5009.229—2016精密度的要求，该方法可用于进行大豆粗脂肪酸值的检测。

2.32种测定方法的综合因素比较

2.3.1检测时间比较。

按照GB/T 14488.1—2008中规定的方法进行检测需要8 h以上，即使因为检测粗脂肪酸值不需要完全抽提出样品中的全部粗脂肪，对方法进行优化，也需要至少2～4 h;而采用冷浸提法仅需振荡浸泡2 h即可提取出样品中70%～80%的脂肪[12]，极大地节约了检测时间，明显提高了检测效率。

2.3.2使用仪器及场地条件比较。

按照GB/T 14488.1—2008中规定的方法进行检测需要使用水浴锅、索氏抽提器等仪器装置，如检测用脂肪需20 g时，则需要至少8～10个索氏抽提器和水浴锅孔位[13-14]，且试验均需要在通风橱中进行。而采用冷浸提法，无需使用索氏抽提器和水浴锅，且由于瓶口密封，在振荡浸提时也无需在通风橱中进行，对环境条件和仪器设备的要求远远低于GB/T 14488.1—2008的方法。以检测10份大豆样品为例，2种方法的使用仪器及场地比较如表3所示。

2.3.3消耗成本比较。

按照GB/T 14488.1—2008中规定的方法进行检测时，需消耗大量的自来水进行冷凝，水浴锅和通风橱也需要消耗较高的电量;而采用冷浸提法，使用试剂量基本一致，额外消耗了少量快速滤纸，但是在水电燃料成本上有了很大的节约，最终检测成本的消耗上要远低于GB/T 14488.1—2008的方法（表4）。

3结论

该研究中介绍的大豆冷浸提粗脂肪酸值的检测方法所测得的酸值结果的相对相差符合GB 5009.229—2016精密度要求，满足结果准确性的要求。该检测方法适用于场地环境条件受限制情况下大批量样品的检测工作，在获得与原国标方法检测结论一致的同时，极大地缩短了检测时间，也节约了检验仪器费用和水电燃料费用的消耗，同时对场地的要求相对较低，特别适合基层实验室使用，同时也符合国家节能减排、提质增效、低碳环保的工作理念。

参考文献

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[10]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.食品中酸价的测定：GB 5009.229—2016[S].北京：中国标准出版社，2016.

[11]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局，中国国家标准化管理委员会.实验室质量控制规范 食品理化检测：GB/T 27404—2008[S].北京：中国标准出版社，2008.

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