富硒蛹虫草对小鼠受孕的影响研究初报

王佳星 徐方旭 柳叶飞 王升厚

摘   要   观察富硒蛹虫草对雌鼠、雄鼠生殖功能及胚胎发育的影响。通过不同剂量的富硒蛹虫草溶液给药小鼠，观察富硒蛹虫草对小鼠行为状态、体量，雌鼠、雄鼠生殖功能，以及自然分娩的仔鼠形态、体重等生理指标的影响。试验结果表明，富硒蛹蟲草对小鼠行为状态、体重无明显影响;雄鼠、雌鼠及仔鼠各项生理指标与对照组比较差别均无统计学意义（P>0.05）;雄鼠随富硒蛹虫草剂量增大精子数量增加，行为更兴奋。由此可见，富硒蛹虫草对雌鼠、雄鼠生殖功能及受孕无毒性影响，对胚胎及自然分娩的仔鼠无致畸作用。

关键词   富硒蛹虫草;小鼠;生殖发育

中图分类号：S567.3   文献标志码：A    DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.25.020

蛹虫草（Cordyceps militaris）又名北冬虫夏草，为子囊菌门[1]。硒元素是人体必需微量营养元素，它与人体内一些酶结合形成具有较强氧化能力物质，可增强人体免疫力[2]。富硒蛹虫草则是通过将硒元素富集于蛹虫草中进行培养的产物。目前对富硒蛹虫草对小鼠受孕及致畸方面的研究少见报道。本试验通过富硒蛹虫草对雌鼠、雄小鼠生殖功能影响的试验，旨在检测富硒蛹虫草是否影响小鼠受孕以及对胚胎及分娩后的仔鼠是否有致畸作用，为其安全性评价提供一定的科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

主要材料有富硒蛹虫草粉（马云鸿+后丁香22号），来自于沈阳师范大学微生物试验室。

1.2 试验方法

6～7周清洁级昆明小鼠，性成熟，未孕，无生孕史[3]。雌鼠体重为27.99±0.21 g，雄鼠体重为31.3±0.3 g。一共54只小鼠，雄鼠共18只，雌鼠36只。随机分组，分别为对照组、试验组1、试验组2。每组雄鼠6只，雌鼠12只，且雌鼠、雄鼠分笼培养。

适应培养一周，开始经口每日定时给药。对照组为自然饮用清水，根据试验需求配制不同浓度富硒蛹虫草溶液，试验组1为300 mg·kg-1剂量给药，试验组2为按900 mg·kg-1剂量给药。雄鼠连续给药21 d，雌鼠连续给药35 d[4]。

于给药14天后，按雄鼠∶雌鼠=1∶2合笼，合笼的第2天起，每天清晨观察雌鼠阴道出现阴道栓情况，观察到阴道栓的认为该雌鼠已经交配，当日作为“受孕”第0天[5]。于合笼第7天将雄鼠与雌鼠分笼，分出的各组雄鼠以脱颈方式处死。合笼后第14天后，各组雌鼠半数处死，另一半给药至自然分娩前[6]。观察不同浓度的富硒蛹虫草溶液对雌鼠、雄鼠生育功能的影响。

1.3 观察指标

观察各组小鼠日常饮食、饮水、活动，体重变化等一般情况。观察并计算雄鼠生殖器官脏器系数、精子数量、精子有无畸变。合笼后雌鼠受孕率，受孕雌鼠生育的仔鼠数及仔鼠平均体重以及仔鼠是否出现畸形。

附睾脏器系数=附睾重量（g）/小鼠体重（g） × 100%

睾丸脏器系数=睾丸重量（g）/小鼠体重（g） ×100%[7]

2 结果与分析

2.1 行为状态

试验过程中，各剂量组雌鼠行为活动均正常，无死亡现象出现。试验组雄鼠与对照组相比行为活动更兴奋，未出现死亡现象。各试验组饮食量饮水量未出现异常情况。各剂量组雌、雄鼠体重均平稳增长（表1、表2）， 与对照组比较无显著性差异，P>0.05。

2.2 雄鼠

各组雄鼠精子形态正常均无明显畸变，试验组雄鼠睾丸、附睾重量及脏器系数与对照组相比较均无显著性差异（P>0.05）（表3）。随着富硒蛹虫草溶液浓度的增加精子数量呈增长趋势。

2.3 孕鼠和胎鼠

试验过程期间，各组雌鼠状态良好，合笼后各组雌鼠均进行交配受孕率为100%。孕14 d雌鼠各剂量组卵巢重、平均胎仔鼠、每窝体重、吸收胎数、胎鼠平均体重、胎盘质量与对照组比较，差别均无统计学意义（P>0.05）（表4）。

2.4 仔鼠

各试验组雌鼠自然分娩仔鼠外观均无畸形出现，试验组自然分娩的仔鼠数量，体重与对照组相比，差别均无统计学意义（P>0.05）（表5）。

3 小结与讨论

蛹虫草含有多种生物活性物质，主要包括：虫草菌素、核苷类、氨基酸类、糖醇和甾醇类、肽类、有机酸类、微量元素等[8]。硒元素是人体必需微量元素之一，在过去一段时间里硒元素被认为是有毒试剂，直到1957年德国科学家Schwarz和Foliz证实硒对肝脏具有很强的保护作用[9]。随着深入研究，硒元素是人体必不可少的一种微量元素，对于人体健康有着重要作用，它不仅有抗癌、抗氧化、保护机体免受活性氧自由基损伤等功能，还与增强人体免疫力、保护心血管系统、肌肉耐力、以及生殖密切相关[10]。将硒元素富集于蛹虫草中，既可获得蛹虫草所有的活性物质，又补充了人体所需硒元素，价值更加提升。本试验意在检测富硒蛹虫草对小鼠生殖功能是否有影响，为其安全性提供科学理论依据。

本试验过程中小鼠饮食饮水量均正常，体重平稳。小鼠行为无异常，且雄鼠随富硒蛹虫草浓度的增加，行为更加活跃。各剂量雄鼠睾丸、附睾重量及脏器系数与阴性对照组相比均无显著差异（P>0.05）。雄鼠精子数量随富硒蛹虫草浓度升高而增加，精子形态无明显畸变。

各剂量组孕鼠体重、卵巢重、平均胎仔鼠、每窝体重、吸收胎数、胎鼠平均体重、胎盘质量与阴性对照相比，差别均无统计学意义（P>0.05）;各剂量组雌鼠生育仔鼠外观均无畸形出现，试验组自然分娩的仔鼠数量，体重与阴性对照组相比，差别均无统计学意义（P>0.05）。说明在本试验的剂量条件下，富硒蛹虫草对雌雄鼠生殖功能及受孕无明显毒性影响，对胚胎及自然分娩的仔鼠无致畸作用。

参考文献：

[1] Gi-Ho Sung， Nigel L. Hywel-Jones， et al. Phylogenetic classification of Cordyceps and the clavicipitaceous fungi[J]. Studies in Mycology， 2007（57）： 5-59.

[2] 王明洋，方勇，裴斐，等.硒对杏鲍菇营养品质和抗氧化酶活性的影响[J].食品科学，2016，37（11）：208-213.

[3] 吴晟妮，林球珍，陆武弟，等.男用和女用避孕药对育成KM小鼠生育能力影响的比较研究[J].现代医药卫生，2018，34（4）：495-496，499.

[4] 黄燕，张会军，王莎莉，等.青蒿水提物对小鼠生殖功能及胎鼠生殖发育的影响[J].生殖与避孕，2010，30（8）：505-508.

[5] 郭瑞新，蔡承妹，曾慶元，等.冬虫夏草提高“肾阳虚”小鼠生殖功能的实验研究[J].基层中药杂志，2002（2）：3-5.

[6] 王玉娥，宋毅，冯玲玲，等.苦蒲汤对小鼠受孕及死胎的影响[J].湖北预防医学杂志，2000（S1）：68.

[7] 申涌，刘咏梅.枸杞多糖对甲醛所致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用[J].贵州医科大学学报，2017，42（4）：440-443，448.

[8] 傅岚，陈作红.虫草属真菌化学成分及药理作用研究进展[J].生命科学研究，2004（1）：1-7.

[9] Schwarz K， Foltz CM. Selenium as an integral part of factor against dietary necrotic liver degeneration[J]. Journal of the American Chemical Society， 1957， 70（32）： 92-93.

[10] Mehdi Y， Hornick JL， Istasse L， et al. Selenium in the environment，metabolism and involvement in body functions [J]. Molecules， 2013， 18（3）： 3292-3311.

（责任编辑：敬廷桃）