一次性使用无菌注射器中残留单体检测*

李永贵，王大鹏，马丽霞，王晶△

(1.山东省药学科学院 山东省化学药物重点实验室，济南 250101；2.山东省药学科学院 山东省医用高分子材料重点实验室，济南 250101)

1 引 言

聚环烯烃(COP)是由双环戊二烯(DCPD[1])与其共聚单体四环十二碳烯(TCD)、甲基四环十二碳烯(MTE)等通过均聚和共聚反应而成的高分子材料[2-3]，目前广泛应用于一次性使用无菌注射器的制备[4]。但是未完全聚合的DCPD、TCD、MTE残留单体可能会随一次性使用无菌注射器的使用迁移到人体血液中，对人体有一定的危害。研究表明，高浓度DCPD、TCD、MTE均对肌体具有一定的刺激和麻醉作用，并能引起眼、鼻、喉和肺部刺激，以及头痛、头晕和其它中枢神经系统症状，甚至可能引起肝脏、肾脏损害，肌体在长期反复接触时可致皮肤损害[5-7]。因此，控制一次性使用无菌注射器中DCPD、TCD、MTE单体的残留量对无菌注射器的安全使用意义重大。

本研究建立了一次性使用无菌注射器中残留单体DCPD、TCD、MTE的气相检测方法，并对一次性使用无菌注射器在不同溶剂中的提取溶液进行检测[8]。通过分析检测结果，对一次性使用无菌注射器进行安全性评价。

2 仪器与试药

安捷伦气相色谱仪，7890B，氢火焰离子化器FID，美国Agilent 公司；BT125D电子天平，德国Sartorius 公司；一次性使用无菌注射器，厂家提供，规格5 mL；正己烷，色谱纯，山东禹王实业有限公司化工分公司；二氯甲烷，色谱纯，山东禹王和天下新材料有限公司；甲醇，色谱纯，山东禹王实业有限公司化工分公司；DCPD、TCD、MTF，厂家提供。

3 方法与结果

3.1 色谱条件

采用100%聚硅氧烷柱(30 m×0.32 mm×0.25 μm)，柱温为155℃，氢火焰离子化器(FID)检测温度为250℃，进样口温度为240℃，分流比为5∶1，进样量为1.0 μL，载气为氮气，流速为2 mL/min。

3.2 溶液制备

空白溶液：甲醇，正己烷，二氯甲烷。

对照品储备液：分别精密称取单体DCPD、TCD和MTF各100 mg置10 mL量瓶中，加入适量二氯甲烷使完全溶解后，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。

混合对照品溶液：精密量取对照品储备液50 μL置10 mL量瓶中，加入二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液。

供试品溶液：取一次性使用无菌注射器2支，去掉外包装及刻度贴膜，并用甲醇将刻度贴膜处粘合剂擦拭干净，剪碎，置100 mL圆底烧瓶中，分别精密加入甲醇、正己烷、二氯甲烷各50 mL，加热回流3 h，放冷，过滤。

3.3 专属性试验

精密量取3.2节中的空白溶液及混合对照品溶液各1.0 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图及峰面积，见图1。试验结果表明，在本检测条件下，三种空白溶液均无干扰，单体DCPD、TCD、MTF各峰之间分离度良好。

3.4 检测限与定量限测定

精密量取3.2节中的混合对照品溶液，用二氯甲烷进行逐级稀释，并按照3.1节中的色谱条件进行测定，精密量取1.0 μL，注入气相色谱仪，测得DCPD、TCD、MTF定量限分别为1.00、0.30、0.31 μg/mL(S/N≈10)，检测限分别为0.30、0.10、0.10 μg/mL(S/N≈3)。

图1 对照品溶液气相色谱图Fig.1 The GC chromatograms of reference substances

3.5 线性试验

精密量取3.2节中对照品储备液0.5 mL置50 mL量瓶中，加入二氯甲烷稀释至刻度，摇匀作为线性试验储备液；分别精密量取线性试验储备液30 μL、0.1、0.5、1、5 mL，分别置10 mL量瓶中，用二氯甲烷稀释至刻度，摇匀，作为线性试验溶液。

按3.1节中的色谱条件，分别精密量取上述线性试验溶液与线性试验储备液各1.0 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图与峰面积。以浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标做标准曲线，结果见表1。

表1 DCPD、TCD、MTF线性关系测定结果Table 1 The linearity test results of DCPD，TCD and MTF

3.6 精密度试验

精密量取3.2节中的混合对照品溶液1.0 μL，注入气相色谱仪，测定连续6次的峰面积，计算单体DCPD、TCD、MTF的峰面积RSD%值分别为1.83%、1.68%、1.48%。

3.7 溶液稳定性试验

精密量取3.2节中混合对照品溶液1.0 μL，分别于0、2、4、6、8、12、24 h注入气相色谱仪，记录色谱图及峰面积，结果单体DCPD、TCD、MTF峰面积RSD%值分别为1.32%、1.19%、1.37%。

3.8 回收率试验

精密称取单体DCPD、TCD、MTF适量，分别配制成浓度为混合对照品溶液100%的溶液各6份，按3.1节中的色谱条件，分别取1.0 μL注入气相色谱仪，记录色谱图，以峰面积按外标法计算，结果见表2。

表2 DCPD、TCD、MTF回收率试验结果Table 2 The recovery test results of DCPD,TCD and MTF

3.9 样品测定

取3.2节中供试品溶液，按3.1节中的色谱条件进行测定，分别取上述溶液各1.0 μL，注入气相色谱仪，记录色谱图及峰面积，按外标法计算单体DCPD、TCD、MTF在甲醇、正己烷、二氯甲烷中提取量，结果见表3。

表3 样品测定结果Table 3 The results of sample determination

4 讨论

本研究建立了气相色谱法检测一次性使用无菌注射器中残留单体DCPD、TCD、MTF的方法。选择氢火焰离子化检测器(FID)直接进样的检测方法，三种单体分离效果好，灵敏度高。本研究中DCPD、TCD、MTF三种残留单体的安全限度依据ICH Q3C中PDE(每日最大摄入量)的计算公式，并参考残留单体毒理学数据NOEL(不产生反应的量)计算所得。DCPD、TCD、MTF的限度分别为8.2、3.0、5.0 mg/d，远大于单体在三种溶剂中的提取量。本研究在对提取条件进行研究时发现，选用正己烷、二氯甲烷、甲醇分别进行提取，二氯甲烷的提取效果最好，甲醇提取效果最差；使用二氯甲烷加热回流3 h后，残留单体提取变化量不明显，因此选用二氯甲烷加热回流3 h，作为最优提取条件。研究结果表明，一次性使用无菌注射器中残留单体DCPD、TCD、MT在二氯甲烷、异丙醇、甲醇三种溶剂中的提取量均小于单体的每日最大摄入量。