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LAMP法与PCR法快速检测B族链球菌的应用分析

2019-10-29河南省鹤壁市人民医院458030黄捷

首都食品与医药 2019年21期
关键词:链球菌灵敏度特异性

河南省鹤壁市人民医院(458030)黄捷

B族链球菌(GBS)是一种革兰氏阳性链球菌,能够定植于孕产妇肠道和阴道。母体围生期GBS定植是新生儿早发型GBS感染的主要危险因素[1]。数据资料显示,携带GBS的孕妇,超过40%会在生产过程中感染新生儿,部分会出现早期侵入性感染,引起新生儿肺炎、脑膜炎、败血症等,危及患儿生命[2]。对孕晚期妇女进行GBS筛查,对阳性患者采取预防措施,可以减少新生儿感染情况的发生。我院对比研究了LAMP法与PCR法快速检测B族链球菌的应用价值。现报导如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2016年2月~2018年10月来我院进行孕检并分娩的孕晚期妇女1188例的临床资料。孕妇年龄为22~39岁,平均年龄(28.57±4.11)岁;孕周为35~40周,平均孕周(37.14±0.58)周。

1.2 方法 取样:由妇产科医生完成。将无菌拭子插入孕妇阴道口1/3处,旋转1周,采取分泌物;每名孕妇同时取两份样本,分别进行检测。试验试剂:GBS核酸检测试剂盒(荧光PCR法)购自泰普生物科学(中国)有限公司;LAMP法试剂盒购自法国生物梅里埃公司。标准菌株:购自卫生部临床检验中心。Taq-DNA聚合酶、DNA marker:购自大连宝生物工程公司。质谱检测:送第三方实验室检测。

1.3 观察指标 观察检测情况、两种方法检测情况和确认情况,计算灵敏度和特异性。

椎间盘部分脱出患者表现:椎间盘椎体后缘表现为中央弧形突出;黄韧带肥厚合并钙化患者表现:韧带厚度在5.8~9.5mm以内,超过健康者,且均伴随有钙化现象;椎间孔狭窄患者表现:存在椎小关节增生,由于不断压迫,导致椎间孔狭窄,其中,3例患者伴随韧带肥厚,在6.5~8.5mm以内;硬膜囊受损患者表现:硬膜囊脂肪层受到挤压存在变形,具有不对称或消失情况,并且,神经根也被推压移位;侧隐窝狭窄患者表现:侧隐窝小于健康者,在2.3~3.0mm以内。

第Ⅲ类的3家研究机构中,辽宁省标准化研究院作为网站主办方建立了“辽宁省标准信息公共服务平台”,但网站功能较为简单,尚不能称之为门户网站,而贵州省标准化研究院和西藏自治区标准化研究所均难以在搜索引擎中找到相应网站。门户网站及功能的缺失,直接影响了这3家标准化研究机构的品牌关注度。

1.4 统计学分析 本次研究使用SPSS17.0处理数据,计数资料用百分率(%)表示,组间比较采取χ2检验,P<0.05表示差异显著。

2 结果

GBS是围生期新生儿和孕产妇最为常见的感染致病菌,孕妇在妊娠期感染GBS,会使得新生儿增加感染的风险,威胁着新生儿的健康成长[3]。采取有效的措施,预防和降低新生儿围生期感染,具有重要意义。一般情况下,可以通过灵敏度和特异度对检测方法的可用性进行评价,选择更为合适的检测方法。本文研究结果显示,本研究1188例样本中,GBS确认94例,阳性率为7.91%。两种方法阳性率对比,差异不显著;LAMP法检测灵敏度为100.00%,高于PCR法的80.91%,差异明显,LAMP法检测特异性为99.81%,和PCR法检测特异性的99.09%对比,差异不显著。说明LAMP法检测在灵敏度方面更有优势。

2.2 两种方法检测情况和确认情况对比 LAMP法检测阳性96例,阳性率为8.08%;PCR法检测阳性86例,阳性率为7.24%;两种方法阳性率对比,差异不显著(P>0.05);LAMP法检测灵敏度为100.00%,高于PCR法的80.91%,差异显著(P<0.05);LAMP法检测特异性为99.81%,和PCR法检测特异性的99.09%对比,差异不显著(P>0.05)。详见附表1、附表2。

附表1 LAMP法检测结果和确认结果对比(n)

附表2 PCR法检测结果和确认结果对比(n)

3 讨论

2.1 检测情况 1188例孕晚期妇女样本中,经两种方法检测均为阳性者76例,检测结果不一致的样本共30例,经质谱确认,9例为GBS。因此,本研究1188例样本中,GBS确认94例,阳性率为7.91%。

雾和云的区别仅仅在于是否接触地面[18],当云接地时即为雾,而雾抬升后形成低云,因此也可以用云水混合比来描述雾。一般认为[19-20]:近地面雾的云水混合比范围为0.05~0.5 g/kg,本文取0.05 g/kg作为雾区临界值来描述此次平流雾的生消过程。

LAMP法的特点是具有较高的特异性,不需要特殊的仪器,方法简便,容易被推广[4]。而且LAMP法检测在2h内就可以完成,符合快速检测理念。此外,临床在检测过程中,为了避免核酸扩增,需要对提取到的DNA模板进行核酸纯化,从而提高检测准确性。

总之,和PCR法对比,LAMP法快速检测B族链球菌具有更高的灵敏度,可以作为B族链球菌的首选检测方法。

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