辛酰羟肟酸含量测定方法

周嘉欣 陈玉娥 黄亮 张利萍

（广州立白企业集团有限公司，广东广州， 510170）

辛酰羟肟酸是一种收录于《已使用化妆品原料名称目录》(2015年版)[1]，具有防腐性能的原料。但因为它不在《化妆品安全技术规范》(2015年版)[2]防腐剂范围内，所以,它在配方中的用量并无严格限制。专利号CN102920612A[3]报道，当它与苯氧乙醇等传统防腐剂复配时，可达广谱抗菌效果。

近十几年，随着对羟基苯甲酸酯类物质的雌性激素潜在影响研究越来越深入，欧美等国对该类物质在个人护理产品中的应用有了严格的含量限制[4-6]。辛酰羟肟酸除了具有一定的抗菌性能外，也具有一定的保湿、润肤功能，所以,它很快地替代了对羟基苯甲酸酯类物质，作为防腐剂及保湿剂用于膏霜、化妆水、面膜等个人护理产品中。但是近期，有文献[7]报道称，辛酰羟肟酸会导致受损性皮肤或敏感性肌肤发生接触性皮炎，它在个人护理产品中的用量及浓度需要慎重选择。

对辛酰羟肟酸进行准确的定量分析是辛酰羟肟酸应用的基础。郑晓等[8]用紫外分光光度法测定水中的辛酰羟肟酸含量。该方法虽然原理简单、仪器易得，但精密度较差、样品pH值也需要严格控制。基于此，笔者建立了采用高效液相色谱-二极管阵列检测器测定辛酰羟肟酸含量的方法，为后续个人护理产品中使用辛酰羟肟酸提供了一定的技术支持。

1 实验部分

1.1主要仪器与试剂

Agilent1260高效液相色谱仪，配有G1315D二极管阵列检测器，美国Agilent公司；ZORBAX SBC18色谱柱(4.6mm×250mm, 5μm)，美国Agilent公司；Sartorious电子天平，北京赛多利斯天平有限公司；Milli-Q去离子水发生器，美国Milli-Q公司；0.45μm微孔滤膜，天津津腾实验设备有限公司。乙腈、甲醇、无水乙醇，色谱纯，德国默克公司；辛酰羟肟酸(辛基异羟肟酸)，标准品，阿拉丁(试剂)上海有限公司；辛酰羟肟酸原料，市售。

1.2实验方法

1.2.1 标准溶液的配制

标准储备液：称取标准品辛酰羟肟酸0.05g(精确至0.0001g)于25mL容量瓶，先加入1mL无水乙醇将标准品溶解，再加入去离子水定容至刻度，充分混匀，即得到标准储备溶液，备用。

标准工作液：分别移取标准储备液3、4、6、8、10mL于10mL容量瓶中，用去离子水定容至刻度，摇匀，作为系列标准溶液备用。

1.2.2 样品溶液的配制

准确称取辛酰羟肟酸原料0.02g(精确至0.0001g)于25mL容量瓶，先加入1mL无水乙醇将样品溶解，再加入去离子水定容至刻度，摇匀、超声后用0.45μm的滤膜过滤后进样。

1.3色谱条件

ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6×250mm, 5μm)；柱温：30℃；流速：1.0mL/min；进样量：5μL；流动相：乙腈-水=55:45(体积比)；检测波长：218nm，参比波长：360nm。

2 结果与讨论

2.1色谱分离条件的优化

研究比较了2种相同规格(4.6mm×250mm, 5μm)的C18色谱柱(ZORBAX SB-C18、Agilent TC-C18)的分离效果及色谱峰形，结果表明，在上述色谱条件下，2种色谱柱都能达到较好的分离效果和良好的色谱峰形。考虑到方法的普及性，首先选用了高效液相色谱中最常用的C18柱(ZORBAX SB-C18)。

辛酰羟肟酸的结构中含有羟基酰胺基团，具有一定的极性。笔者考察了甲醇-水(75:25)(体积比)、乙腈-水(60:40)(体积比)、乙腈-水(55:45)(体积比)为流动相。根据峰形和响应等，最终选用乙腈-水(55:45)(体积比)为流动相进行分析，得到了较好的峰型。辛酰羟肟酸色谱图见图1-图3。

2.2线性考察

取1.2.1所配制的标准溶液，在1.3所确定的实验条件下对辛酰羟肟酸进行测定，以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程及相关系数。辛酰羟肟酸的回归方程为y=1.3334x- 18.536，相关系数R²=0.9992。从上述结果可看出：辛酰羟肟酸在112.0～1574.0mg/L的范围内具有良好的线性。具体标准曲线见图4。

2.3回收率与精密度

图1 辛酰羟肟酸液相色谱图(甲醇-水(75:25))

图2 辛酰羟肟酸液相色谱图(乙腈-水(60:40))

向辛酰羟肟酸原料样品中添加3个浓度水平(约10mg、20mg、30mg)的辛酰羟肟酸标准工作液进行加标回收实验，每一水平设6个平行，按1.2.2样品前处理方法制备待测样品，标准曲线法定量，计算回收率，结果如表1所示。由表1可知：方法的相对标准偏差(RSD)＜5%；方法的加标回收率为96.73%～101.39%，表明方法具有较好的准确度和精密度。

2.4实际样品的测定

用所建立的方法测定3个不同厂家的辛酰羟肟酸原料样品，每个样品溶液平行测定6次，结果见表2。由表2可知，不同厂家的辛酰羟肟酸原料样品测试RSD均在2%以内，表明该方法重复性良好。

3 结论

图3 辛酰羟肟酸液相色谱图(乙腈-水(55:45))

图4 辛酰羟肟酸标准曲线

表1 辛酰羟肟酸原料的回收率和相对标准偏差(n=6)

表2 不同厂家的辛酰羟肟酸原料中辛酰羟肟酸的含量测定

通过高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定辛酰羟肟酸原料中辛酰羟肟酸的含量和考察不同色谱柱、不同流动相对色谱出峰情况的影响，可以得出：当使用乙腈-水=55:45(体积比)为流动相、色谱柱为ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm, 5μm)时，样品出峰峰形对称，重复性良好。该液相色谱测定法准确、简便、灵敏、重复性好、精密度高，可为相关产品的日常检测提供参考。