关于紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性的研究

许广元

摘 要：土壤中过氧化氢酶活性高低，将直接影响土壤的肥力，它是现代生物研究分析的主要内容。基于此，本文采取实验分析法，着重对紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性的结果进行剖析，以达到充分发挥技术优势，实现科学性、绿色化农业开发的目的。

关键词：紫外分光光度法；土壤过氧化氢酶；活性测定

引言：过氧化氢酶活性分析，是土壤透气性、营养含量等方面检测的重要指标之一。研究发现：利用精准性、高效率的过氧化氢酶活性检验方式，对土壤情况进行综合检测，不仅节省了土壤环境治理的投资成本，也能够为科学调节土壤肥力带来方法借鉴。由此，关于紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性的探究，是现代生物工程研究的理论代表。

1、实验目的与材料

1.1 实验目的

土壤中过氧化氢酶活性，是土壤中有机物活性和反应强度检测的直接表现。通过紫外分光广度法对土壤中过氧化氢酶活性的探究，可借助双氧水、高锰酸钾溶液，在紫光照射下出现过氧化氢酶活性变化。实验结果也进一步明确了过氧化氢酶活性检测技术分析优化带来的便捷性，进而为绿色化、循环性农产业开发提供方法参考。

1.2 实验材料

本次实验中所选用的土壤包括：红壤、黄壤、黄棕壤三类。

实验中所有药品、器材包括：浓度为0.3%的双氧水，1.3mol/L硫酸、饱和铝钾矾、高锰酸钾、紫外分光光度计、以及振荡器、三角容器等[1]。

2、实验方法与步骤

2.1 实验方法

对实验中所用原料进行初步处理，操作过程为：（1）30%的双氧水稀释100倍；（2）浓硫酸40ml进行稀释，按照2：25的标准调节即可。（3）将3g高锰酸钾放置在1升的溶解杯子中，并进一步精确测量其中草酸的含量。

实验中分别运用高锰酸钾和紫光对土壤过氧化氢酶活性、土壤基本性质进行测定。

2.2 实验步骤

按照实验一般流程，将操作要点归纳为：（1）分别取三种土壤样品2g，并将其分别放入到三角瓶中，加入35ml蒸馏水，摇均后放入3-5ml的双氧水，震荡15min。取下后立即放入饱和铝钾矾溶液0.5m。静置5-10min后，将土壤中水分滤干后用吸光器进行处理。（2）取土壤样本2g，放置到三角瓶中，按以上标准加入蒸馏水、双氧水后，震荡，加入饱和铝钾矾，并在盛有稀释过的硫酸液体中融合，滤干后滴入高锰酸钾至紫色，分析实验效果。（3）按照过氧化氢酶活性计算公式，计算实验结果。其一，紫外分光光度测定过氧化氢酶计算：F=A1×T/G。其中“F”表示土壤中过氧化氢酶含量，“A1”表示样品溶液吸光能力，“T” 表示过氧化氢克数，“G”表示土样重量。其二，R=（V-V1）C ，其中“V”表示体积溶液中高锰酸钾的体积，“V1”表示溶液所消耗的高锰酸钾体积，“C”表示土壤重量[2]。（4）采取常规土壤检测法，采取有机质硫酸重铬酸钾外加热法进行光度分散效果处理；同时，运用电位法测定土壤的PH值。

3、实验结果与讨论

3.1 实验结果

运用两种方法对土壤过氧化氢酶活性进行检测结果表明：（1）第一次检验土壤样本中过氧化氢酶活值为5.17，第二次样本检验的结果为5.29，且差异变化系数分别为：3.81、5.17，误差值P分别为0.03和0.32；（2）土壤样本检验初步进行过氧化氢融合后，土壤中有基质含量为0.67，无基质含量0.10。静置3-5min后，土壤中有基质含量为0.64，无机质含量0.05，说明实验中土壤的无基质在实验中发生了变化。（3）实验加入稀释后的浓硫酸过滤后，土壤中有基质数含量为0.16，无基质0.14，溶液中有基质数含量为0.74，无基质0.76。

3.2 实验讨论

过氧化氢酶活性检验，是绿色农业种植中常见的土壤状况分析检测指标，它不仅实现了土壤中有机物成分的科学性检测，也是一种有效的土壤资源综合利用探究方式。本次实验中为了证明紫外光光度分法，在土地过氧化氢酶活性中测定应用的价值，采取对比分析法，对土壤中过氧化氢酶活性的检验情况进行了综合探究，实现了现代化农业资源的整合与运用。

3.2.1 紫外分光光度法测定方法便捷

紫外分光光度法用于土壤中过氧化氢酶的检测方法中，可保障土壤实践检测值的便捷性。其一，传统的高锰酸钾检验测定法，主要利用土壤中酸碱反应情况，测定土壤中过氧化酶的含量。而运用紫外分光光度法进行测定时，可直接利用光度分层仪器，对土壤中有基质和无基质进行检测，且检验中无需多次进行检测溶液的调配，因此，检测过程自然比较便捷。其二，紫外分光光度法是数字化仪器性综合性检测，它充分利用了紫光对土壤分子结构进行分层的特性，对实验样本土壤中营养成分进行测定。由此，测定过程是系统性、批量性的检测，实际检测结果可靠性也比较高。

3.2.2 紫外分光光度法可对土壤成分进行分析

紫外分光光度法测分析法进行土壤中过氧化氢测定时，也可以结合土壤原有成分分析资料，对土壤的营养含量、土壤保水性等方面进行测定，由此，紫外分光光度法的应用，也是一种延伸性土壤检测分析手段。

首先，土壤样本检验初步进行过氧化氢融合后，土壤中有基质含量为0.67，无基质含量0.10。静置3-5min后，土壤中有基质含量为0.64，无机质含量0.05，这一结果也侧面说明了本次检验样本土壤中有机质物质含量较多。

其次，结合本次土壤实验前分析资料可知：三种样品本身的有机质含量分别为：10.15g/kg、15.14g/kg、19.12g/kg，土壤中含有碱解氮含量分别为：80.91g/kg、95.66g/kg、109.30g/kg，含有有效磷量分别为：11.03g/kg、5.89g/kg、1.13g/kg。土壤中丰富的营养物质，能够通过紫外分光光度法测定中有基质和无基质的含量情况给予综合反馈。由此，紫外分光光度法的应用具有检测效果好、检测范围广的特征。

3.2.3 紫外分光光度法誤差值较低

紫外分光光度法应用于土壤中过氧化酶检测过程中，具有检测结果准确、误差值低的优势。如，本次实验中第一次检验土壤样本中过氧化氢酶活值为5.17，第二次样本检验的结果为5.29，且差异变化系数分别为：3.81、5.17，误差值P分别为0.03和0.32，两次数据对比差异性不大，也说明紫外分光光度法对土壤中过氧化氢酶活性检验的准确性较高。

结论：综上所述，关于紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性的研究，是现代生物研究技术实践中综合应用的体现。在此基础上，本文将方法测定讨论结果归纳为：紫外分光光度法测定方法便捷、紫外分光光度法可对土壤成分进行分析、紫外分光光度法误差值较低三方面。因此，本篇文章的研究结果，将为新技术科学应用提供新思路。

参考文献：

[1]王群，刘朝巍，徐文娟.紫外分光光度法测定玉米过氧化氢酶活性新进展[J].中国农学通报，2016，32（15）：159-165.

[2]杨兰芳，曾巧，李海波，闫静静.紫外分光光度法测定土壤过氧化氢酶活性[J].土壤通报，2011，42（01）：207-210.