三叶青抗肿瘤作用研究进展

黄明远 邹强

摘要：三叶青为葡萄科崖爬藤属植物，是我国传统的中药材，具有多种生物活性。肺癌、肝癌、乳腺癌均为临床上常见的癌症，药理学研究表明三叶青醇提取物，萃取物均具有一定的肿瘤抑制作用。现就三叶青的抗肿瘤活性进行综述，为以后更好的利用开发这一植物资源和临床抗肿瘤方面的应用提供理论依据。

关键词：三叶青;提取物;抗肿瘤

提起癌症让人们不寒而栗，一般人们所说的癌症泛指所有的恶性肿瘤，癌症是起源于上皮组织的恶性肿瘤。自上世纪来癌症已经成为人类的第二大类疾病，同时癌症也被世界卫生组织列为世界五大疑难杂症之一。近年来我国的癌症发病率一直表现出上升的一种状态。现在对恶性肿瘤的治疗主要包括手术治疗，但是对早期癌症治疗效果相对较好，对于晚期治疗效果就不太好;化学治疗主要是用化学药品对肿瘤细胞生长起到抑制或者直接杀死，同时化学药品也存在许多的缺点比如开发费用较为昂贵而且它的毒副作用也是比较大的，同时伴随不同程度的致突变毒性;目前中医中药治疗越来越吸引大量的医学研究者的目光，因为它的毒副作用较小的而且促进患者恢复，增强对放化疗的耐受力。目前，报道的中草药具有抗肿瘤作用的不在少数，其中就包括三叶青，同时它也是我国的珍贵的民间传统天然药食两用植物，古典药籍就有记载它的应用广泛，具有十分重要的价值，值得我们深入研究[1] 。

三叶青属于葡萄科崖爬藤植物，中国特有的植物，主要分布在我国华南以及西南地区[2] 。同时三叶青也是我国老百姓家中常备的一种中草药，因为根据古典药籍记录三叶青可以用于一些热毒病症及温毒并且具有比较好的药效。据现代药理学研究发现三叶青在抗肿瘤、抗炎、抗病毒和保肝等方面具有显著的效果。通过查阅国内外近年来有关于三叶青研究的相关的文献，对三叶青的活性成分及其生理活性作用的研究进行了总结。

1 三叶青抗肿瘤作用

1.1抑制肺癌

李礼斌等[3] 发现两产地不同处理三清叶的乙醇提取物对肺癌细胞A549存在抑制效果，呈现剂量依赖性，常温浸提后的来源于浙江的三青叶切片抑制腫瘤生长效果最佳。张祺箐等[4] 通过三叶青黄酮提取物对细胞进行干预，观察单核细胞分泌前列腺素E2、环氧化酶-2的情况，推测中药三叶青具有逆转肿瘤免疫抑制的作用。三叶青黄酮抗肿瘤作用与Treg 细胞生成及其CD152 表达有一定关系[5] 。研究表明三叶青中起到抑制肿瘤生长的作用的是黄酮类化合物[6] 。对荷瘤小鼠造模后，每日观察小鼠生活状态，采集相关数据，发现三叶青黄酮给药组抑瘤率在44.3%-15.4%之间，明显高于其他组。钟良瑞[7] 采用MTT法研究三叶青黄酮对对肺癌A549细胞生长变化，与空白对照组比较，随着黄酮含量的增加，肿瘤细胞数量明显减少，呈现一定的浓度依赖性。

1.2乳腺癌

邱模昌[8] 对三叶青分别用三种溶剂进行提取，观察提取物在体外抗乳腺癌MCF-7细胞作用，采用流式细胞双染色法进行检测，其中乙酸乙酯提取物对肿瘤细胞凋亡最明显。郭菁菁[9] 探讨了三叶青多糖对乳腺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用的影响，可增强机体免疫功能，提高抗肿瘤免疫应答，研究表明多糖提取物与免疫相关的T淋巴细胞有关。前期实验已经得出三叶青水部位具有一定的抗肿瘤作用，现将水部分进行分离得到6个不同组分，分别进行活性筛选，对得到的化合物进行纯化分离，绘制药物浓度对细胞增殖影响的曲线[10] 。

1.3结直肠

吴晓尉等[11] 采用MMT法观察三叶青对结肠癌SW620细胞的抑制情况，不同浓度的三叶青提取物均可以使肿瘤细胞活性下降，当浓度继续增加时，抑制作用更明显。以结肠癌HT29 细胞为肿瘤细胞模型，在小鼠腹腔注射乙酸乙酯提取物，连续给药5天，与对照组进行比较，观察小鼠体重变化，及肿瘤抑制率[12] 。三叶青总黄酮对多种肿瘤具有较强的抑制作用。观察三叶青总黄酮对SW620和TH29结肠癌细胞株的抑制作用，随着作用时间增加，其抑制作用增强，在3.2、6.4mg/mL浓度下作用效果最佳[13-14]。

1.4肝癌

罗梅秀等[15] 对三叶青水提后用乙酸乙酯进行萃取，得到萃取物进行细胞凋亡实验，加药后24小时，进行检测分析。随着乙酸乙酯提取物的增加，肝癌细胞HepG2 增殖与凋亡发生变化，可明显抑制HepG2 细胞增殖和诱导凋亡。大量临床数据表明，三叶青具有抗肝癌作用，其中黄酮类化合物抗肿瘤活性最为明显，随着黄酮含量的逐渐增加，患有肝癌的小鼠中肿瘤细胞生长速率明显下降，同时检测HepG2 细胞凋亡率，也进一步得到了证实[16] 。彭昕[17] 建立了三叶青萃取物抑制肝癌细胞HepG2生长的实验模型，探究了不同浓度下乙酸乙酯部分对肝癌HepG2细胞周期的阻滞和凋亡诱导作用，为探究作用机制提供基础。孙永[18] 采用不同极性有机溶剂分别对三叶青进行提取，进行细胞活性筛选出最佳提取物。进一步发现三叶青叶片酚类成分能够抑制肝癌细胞 HepG2的增殖。

2作用机制

2.1诱导凋亡

对三叶青块根经乙酸乙酯提取浓缩，对不同浓度的乙酸乙酯提取物进行PANC-1 细胞增殖实验，发现机制可能与上调p53 和Bax 的表达，下调Bcl-2 的表达有关，乙酸乙酯提取物能有效调节凋亡的相关基因[19] 。三叶青黄酮处理肺癌细胞A549 后，差异表达已知miRNA 靶基因KEGG 聚类，通过测序和富集分析，发现内吞作用的异常表达与肿瘤细胞诱导凋亡密切关系[20] 。

2.2抑制肿瘤细胞增殖

恶性肿瘤中肺癌的存活率最低，研究表明在对三叶青黄酮处理24小时后，采用流式细胞分析仪分析细胞凋亡情况，发现可显著抑制SPC-A-1细胞增殖，并诱导其凋亡[21] 。张胜强[22] 观察不同黄酮浓度三叶青对EC9706 细胞的影响，随着浓度的增加和作用时间的增加，细胞增长的速率明显下降，乙酯作用越发明显。实验数据表明三叶青黄酮能明显抑制增殖，降低细胞迁移和侵袭能力，与其下调Notch1 有关，可能是其抗食管癌的机制之一。

近年来，癌症发病率越来越高，合成类药物对治疗恶性肿瘤效果并不是那么理想而且有一定的副作用，科学家把目光从合成类的药物转向天然产物类的药物，从一些中药成分中寻找毒副作用小且治疗效果比较于合成类的药物较好成为了科学家研究的重点。同时随着科学技术的发展，不少学者利用体外细胞培养、色谱、核磁、红外以及质谱等方法对中草药中的一些抗肿瘤化学成分进行提取、结构鉴定、活性评价的研究，同时对分离出来的活性化合物进行结构修饰得到副作用更小的，治疗效果更好的新型化合物。

参考文献：

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作者简介：

黄明远（1991.7-），男，汉族，籍贯：黑龙江哈尔滨人，沈阳科技学院，助教，硕士学位，专业：药学，研究方向：天然產物活性成分研究

（作者单位：沈阳科技学院）