香菇种源菌种的不同保存期对生产种性的影响*

吕明亮，陈再鸣，薛振文，李伶俐，应国华**

（1.丽水市林业科学研究院，浙江 丽水 323000；2.浙江大学农业与生物技术学院，浙江 杭州 310058）

香菇（Lentinula edodes） 菌种是香菇生产的重要生产资料，菌种种源对香菇栽培有着举足轻重的作用，研究香菇种源菌种保存技术对香菇生产具有重要的意义。当前我国大部分产区香菇菌种生产还处于小作坊分散式生产，种源菌种保存技术相对落后，在实际生产中利用冰箱保存比较普遍[1]，通过对该保存方式的种源菌种进行出菇栽培试验，探讨种源母种不同保存期对栽培效果的影响，为香菇种源菌种保存利用提供参考。

1 材料与方法

香菇种源菌种：香菇L808，来自丽水市大山菇业研究开发有限公司，具体见表1。菌种保存方法：试管PDA斜面培养基（20 mm×200 mm），菌种长满培养基后，将试管棉塞蘸溶化石蜡封口。在家用冷藏箱，用水银温度计实测温度4℃～5℃下保存。保存的试管菌种经过转管1次培养活化后，进入正常的菌种扩繁栽培试验。

试验地概况：浙江省丽水市城郊，海拔60 m左右。

表1 参试香菇L808种源菌种Tab.1 Test of Lentinula edodes L808 strains of provenances

1.1 菌种扩繁

2017年4月6日用试管母种接种菌种瓶原种，生产种用规格为15 cm×32 cm×0.005 cm的聚乙烯菌种袋装料，高压灭菌，冷却后于6月19日接种生产种，在7月4日～7月20日测量菌丝生长速度。

1.2 试验菌棒生产和培养

用双袋法制棒，内层为保水袋，外层为常规聚乙烯筒袋，外筒袋规格为15 cm×55 cm×0.005 cm。栽培棒基质配方：杂木屑79%、麸皮20%、石膏粉1%。常压灭菌，冷却后于接种箱中接种。生产棒各菌株在9月1日接种，接种后套上外套袋于室外荫棚下常温培养，于9月18日～9月25日测量各菌株的菌丝生长距离。

按照参考文献[2]的方法进行培养出菇管理，根据发菌情况，菌种L808-1菌棒于10月25日脱去外套袋，刺孔，L808-12于11月1日刺孔，菌种L808-11菌棒在11月3日基本发满，于11月6日刺孔。刺孔用滑落式机械自动刺孔机，每棒刺孔数为50个左右。孔大小为0.5 cm×0.5 cm，深约2.5 cm。

1.3 出菇管理

各菌株制作试验菌棒150棒，各选取无污染菌棒90棒，以30棒为1个小区，重复3次。12月14日在层架上排放（天气为阴天），做好标记后脱袋管理，只脱去外袋，留下保水袋。主要管理是湿度管理，气温低于15℃时，每天中午喷水1次，到3月份，气温升高，改为早上和傍晚各喷水1次。每天察看，采收8分～9分成熟香菇子实体，对鲜菇称重记录。于1月2日对采收的菇体抽样测量子实体外观，拍照。

分别在1月11日第1次注水。2月27日第2次注水。于3月21日，第3次注水。到4月20日采菇结束。

2 结果

2.1 菌丝生长情况

分别对生产种菌包（7月4日～7月20日） 和生产菌棒（9月18日～9月25日） 的菌丝生长速度进行调查和统计，如表2、表3所示。

表2 生产种菌丝生长速度比较Tab.2 Comparison of the growth rate of spawn mycelia

表3 菌棒菌丝生长速度比较Tab.3 Comparison of the growth rate of artificial log mycelia

与对照相比，在香菇菌种的生长前期，经过低温保存的菌种菌丝生长较缓，到中后期二者菌丝生长基本接近，趋于一致。这可能是由于只通过一次转管斜面培养基培养，菌丝活化不够充分。但在生产棒菌丝培养阶段，各菌株的菌丝生长速度已相近。

前期菌种L808-1在培养基中萌发生长较快，于10月25日满袋，菌种L808-11、L808-12后期发菌速度也较快，满袋时间在10月28日～10月30日，差距在5 d以内。

2.2 转色出菇情况

从菌棒的转色出菇观察，刺孔放气后菌棒的转色期基本相近，脱袋后于12月29日～12月30日达到第一潮菇的出菇高峰期，各菌种间无明显的差异。但菇形色泽上稍有差别，见图1～图3。

图1 菌种L808-1的出菇情况Fig.1 Production of L808-1 strain

图2 菌种L808-11的出菇情况Fig.2 Production of L808-11 strain

图3 菌种L808-12的出菇情况Fig.3 Production of L808-12 strain

从第一潮出菇情况看，出菇后，菌种L808-1菇体菌柄粗短，菌盖表面色泽较深，而菌种L808-11与L808-12的菇体菌柄细长，且菌盖表面的色泽较浅。

2.3 产量

12月20日开始少量采菇，到4月25日采收结束。对香菇产量采用SPSS统计软件分析差异显著性，各菌种栽培的平均单棒产量数据如表4所示。

从整个生长周期的香菇产量来看，经过低温保存后的香菇菌种，3个重复栽培的平均产量有所下降，菌种L808-1与L808-11间有显著差异，其他菌种间无显著差异。

2.4 子实体外观指标

表4 不同菌种的平均单棒产量比较Tab.4 Comparison of the average yields of different strains

随机抽取30个子实体，测量每个菇体的单菇重、菌盖直径、菌盖厚度、菌柄长度、菌柄直径的平均值，统计数据如表5所示。

表5 不同菌种子实体外观性状Tab.5 Fruiting body characteristics of different strains

从表5统计结果可知，随着菌种保存时间的延长，子实体的单菇重明显下降，菌盖直径减小，菌盖厚度无明显差异，菌柄长度变长，菌柄直径变小，菌盖直径与菌柄长度比值变小。从各数据的变化，基本反映了香菇种源菌种随着保存时间的延长，其菌种栽培时的农艺活力的下降，香菇子实体外观性状的退化趋势。

3 结论

通过本试验，香菇种源菌种用冰箱经过低温保存（4℃～5℃），对香菇产量和子实体的外观性状有一定的负面影响，特别是子实体的外观性状指标与保存期长短具有相关性。

经过一定保存期的香菇菌种，使用时要充分活化，有利于菌丝活力的恢复，与蔡令仪等[3]的研究结果相符。保存后的菌种在投入生产前需要经过栽培试验评价。