食用农产品中农药残留、兽药残留快速检测技术探析

常建中 韩亚梅 石亚亭

摘 要：本文通过对食用农产品中农药残留和兽药残留快速检测常用方法酶抑制率法、酶联免疫吸附法进行系统的介绍，突出了农产品快速检测技术在样品前处理和检测仪器操作等方面的优势，指出快速检测技术将在农产品质量安全监管体系中起到重要的作用，为基层农产品安全监管、执法、检测、评估等部门提供重要的技术支撑。

关键词：农药残留; 兽药残留; 快速检测; 酶抑制率法; 酶联免疫吸附法

农产品质量安全是食品安全的前提和保障，农产品安全问题已成为目前社会广泛关注的一个热点问题。建立完善的农产品质量安全保障体系，加强农产品质量安全相关检验检测技术的研究和开发，发展快速便捷、成本低廉、准确度高、易于推广普及的检测技术，将为各级食品和农产品安全监管、残留监控和风险评估部门提供技术支撑。

实验室检测具有高选择性、高准确度和高精密度等优势，但存在检测仪器设备价格昂贵、操作复杂、所需试剂和耗材特殊、日常维护和后期管理十分严格等问题，在基层实验设备条件差、工作人员

专业水平普遍较低、检测样品任务量大、需现场检测并快速出具检测结果的实际工作中难以发挥重要作用。然而，快速检测技术作为食用农产品检验检测的基础手段，则从根本上解决了这一难题，目前已成为农产品安全检测领域不可或缺的一部分。本文就农产品安全中危害最大、影响最广的农药残留和兽药残留快速检测常用技术进行具体介绍，旨在促进农兽残快速检测技术的推广，使其成为基层检验检测机构和监管部门保障农产品质量安全的一种有力手段。

一、农药残留快速检测

有机磷和氨基甲酸酯类农药是目前使用量最大的农药品种，在蔬菜中具有较高的检出率。当前，高毒禁用农药，特别是有机磷类农药仍是蔬菜农药残留超标的主体，占到农药市场的57%以上，同时也是菜农首选的一类杀虫剂。

酶抑制率法具有较高的专一性、灵敏性、准确性及低成本等优点，是目前市面上应用最广泛、研究最多且相对成熟的农药残留快速检测技术，利用此技术生产的各种速测仪不但使用方便、检测速度快、灵敏度高，而且检测范围广、价格实惠，在业内普遍得到认可，适用于相对集中、具有一定规模的农产品生产基地和批发市场开展农药残留快速检测，已成为目前监管和控制农药残留的重要手段之一。因此，该方法目前在欧美等发达国家已成为农药残留普查和田间实地检测的基本手段，也是我国国家标准（GB/T 5009.199-2003）规定认可的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测主流技术。

1.酶抑制率法的原理

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物乙酰胆碱水解，其水解产物与显色剂发生反应，产生黄色物质，用农药残留速测仪在412nm处测定吸光度随时间的变化，计算出抑制率，通过抑制率来判定样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。

2.酶抑制率法的检测步骤（具体方法根据所购买试剂盒为准，图1）

3.酶抑制率法常见问题及注意事项

（1） 试剂从冰箱取出后放置至室温再使用;

（2）任何试剂使用时，应坚持用完一瓶配一瓶的原则，防止试剂变质;

（3）移液枪枪头要一一对应，不能混用，防止交叉污染;

（4）含色素较高的样品取样时，果肉不宜取太多，不宜切太细，否则提取液颜色过深，造成干扰，影响检测结果;

（5）对于韭菜、萝卜、葱、蒜、芹菜等含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性，可采用整株蔬菜浸提法进行处理;

（6）检测前，将仪器开机预热10min，以稳定仪器性能，提高实验的精确度;

（7）加入底物后，涡旋混匀，立即进行检测，尽量缩短操作时间，并保证操作的稳定性。

二、獸药残留快速检测

兽药残留是指在动物及其产品中，如肉类、牛奶、鸡蛋等样品中药物或其代谢物的积累。在兽药残留快速检测技术中，酶联免疫吸附法（简称ELISA）由于操作简便快速、特异性强、灵敏度高、分析通量大等优点，一直作为一种快速分析和筛选方法备受技术人员的青睐，在检测领域应用广泛，以后也必将在基层监管领域发挥重要的作用。

1.酶联免疫吸附法的原理

酶联免疫吸附法是把抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用有机结合起来的一种检测技术，它既可测抗原，也可测抗体。在特定固相载体的表面预包被免疫活性未被破坏的抗原（抗体），加入待测抗体（抗原），与相应的酶标记抗原（抗体）进行抗原抗体的特异性免疫化学反应，得到抗原或抗体的复合产物。然后通过洗涤的方式使固相载体上抗原或抗体的复合物与其他物质分离，最后与底物反应生成有色物质。样品中待测抗原或抗体的含量与有色产物量成正比，根据吸光度值计算抗原或抗体的含量。

2.酶联免疫吸附法的检测步骤（以盐酸克伦特罗兽残检测为例，具体步骤根据所购买试剂盒为准，图2）

3.酶联免疫吸附法常见问题及注意事项

（1）使用前将所有试剂温度回升至室温20-25℃。试剂及标本没有回到室温（20-25℃）会导致所有标准的OD值偏低;

（2）在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会伴随着出现标准曲线不呈线性，重复性不好的现象，所以洗板拍干后应立即进行下一步操作;

（3）混合要均匀，否则会出现重复性不好的现象;

（4）反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤;

（5）不要使用过期的试剂盒，不要交换使用不同批号的盒中试剂，稀释或掺杂使用会引起灵敏度、OD值的变化;

（6）不用的微孔板放进自封袋密封;试剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下;

（7）显色剂若有任何颜色表明变质，应当弃之。

三、结语

利用酶抑制率法测定的样品和农药种类有限，目前只用于蔬菜、水果中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留检测，且一般用于大批量样品的前期筛选，尚不能给出具体的定量结果;另外，检测葱、姜、蒜、香菜、芹菜等样品时，易产生假阳性结果。而酶联免疫吸附法测定兽药残留，目前也还停留于单项兽残检测，一次性检测多种兽药还存在很大的挑战，而这些问题也将成为今后快速检测技术领域研究的重中之重。

总而言之，采用酶抑制率法和酶联免疫吸附法进行农药残留、兽药残留快速检测实验中，试剂制备、样品处理、仪器操作都较为简单，对检测人员专业水平要求不高，快速检测技术的及时性和准确性也能够得以充分体现，这些优势都将进一步促进快速检测技术在基层监管、执法、检测、评估等部门的推广和普及，使得食品安全“从农田到餐桌”的全程监管制度得到更好落实，使党的十九大报告中提出的“全面实施食品安全战略，让人民吃得放心”的目标得以具体落实，有效解决人民群众对食用农产品质量安全的迫切需求，使我们的生活更加美好。

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