竭红跌打巴布剂中血竭素的含量测定

叶星辰 班俊峰 吕竹芬 陈燕忠 黄思玉

（广东药科大学 广东省药物新剂型重点实验室，广东 广州 510006）

“竭红跌打酊”是由龙血竭、红花、当归等10种中药材组成的复方制剂，具有显著的消肿镇痛，活血化瘀作用，对机体软组织损伤有独特疗效[1-2]。根据前期研究制备的竭红凝胶膏剂改善了原制剂因酒精含量高对皮肤产生的不良反应，具有重要意义。方中血竭由棕榈科植物麒麟竭果实渗出的树脂经加工制成[3]，具有止血与活血、抗微生物和抗病毒活性、镇痛、抗氧化、抗炎、伤口愈合等广泛的药理作用[4]。本文采用HPLC法对制剂中的血竭素进行含量测定，方法简便可行。

1 仪器与试药

高效液相色谱仪（Dionex Ultimate 3000 Pump，Ultimate 3000 Photodiode Array Detector，德国Dionex corp），CP225D型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司），KQ-100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），血竭素高氯酸盐对照品（中国药品生物制品检定所，批号：10811-200704），竭红跌打巴布剂（自制），乙腈（色谱纯），其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件：色谱柱Kromasil C18柱（5 μm，4.6×250 mm）；以乙腈-0.05m ol/L磷酸二氢钠溶液（50∶50）为流动相；流速1.0 mL/min，进样10 μL，等度洗脱22 min，采用检测波长为440 nm；柱温40 ℃。理论板数按血竭素峰计算3000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备：将血竭素对照品置于干燥器中36 h，充分干燥后精密称取对照品适量，置于10 mL棕色量瓶中，加3%磷酸甲醇溶液溶解、定容。精密量取所得溶液1 mL，于25 mL棕色量瓶中，以甲醇定容。

2.2.2 供试品溶液的制备：精密称定竭红巴布剂膏体适量置烧杯中，加3%的磷酸甲醇溶液研匀，超声10 min，放至室温后转移置50 mL棕色量瓶中，用3%的磷酸甲醇溶液定容；精密量取溶液2 mL置5 mL棕色量瓶中，用甲醇定容，0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得。

2.2.3 空白对照液的制备：取缺血竭的膏体，按2.2.2项下方法制备，作为阴性对照样品。

2.3 专属性考察：按2.1项下方法，分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液测定，结果见图1。可知供试品溶液中血竭素峰的保留时间与血竭素对照品的一致，而阴性对照液在出峰范围内没有干扰，说明测定的专属好。

图1 对照品、样品、阴性样品HPLC色谱图

2.4 标准曲线的绘制：分别吸取对照品溶液5、10、15、20、25 μL，注入色谱仪中，以峰面积值和进样体积作线性回归，得到回归方程为：Y=0.0271+0.1414x（r=0.9999），说明血竭素对照品进样量在0.0452～0.2260 μg/mL范围内有很好的线性关系。

2.5 精密度考察：依2.1项下方法，精密吸取同一浓度的供试品溶液，连续进样6次，测定血竭素的峰面积。计算得RDS为0.87%。

2.6 稳定性考察：根据2.1项下方法精密吸取供试品溶液，于0、2、4、6、8、10、12 h重复进样测定，计算得血竭素峰面积RSD=4.34%。可知在12 h内溶液的稳定性良好。

2.7 重复性试验：按2.2.2项下方法以同一批样品制备供试品溶液6份，按2.1项下方法测定峰面积，计算得RDS值为4.7%，重复性良好。

2.8 加样回收率：精密称取已知血竭素含量的样品6份，根据2.2.2项下方法制成供试品溶液，分别精密加入适量血竭素对照品溶液。按2.1项下方法进样，测定样品中血竭素含量。结果得平均回收率为99.08%，RSD=3.13%。

2.9 样品含量的测定：按2.2.2项下方法，取3个不同批次的巴布剂样品制备样品溶液，按2.1项下方法进样。见表1。

3 讨 论

竭红巴布剂处方药味多，成分复杂多样。龙血竭具有散瘀止痛，收敛止血，生肌敛疮之功效，用于跌打损伤、闭经痛经、外伤出血等多种疾病的治疗。

本研究建立了竭红跌打巴布剂中血竭素含量的HPLC测定方法，该法简便、结果准确，具有较好的稳定性、精密度、重复性，阴性无干扰[5-7]。可用于竭红巴布剂的质量控制，也为龙血竭质量标准的提升进行了有益的探索。

表1 样品中血竭素的含量测定结果