液质谱联用技术在黑茶溯源研究中的应用

罗达龙

（广西梧州市食品药品研究所，广西梧州 543002）

1 引言

黑茶是我国六大茶类之一[1]，按地域划分主要有：泾渭茯茶、湖南安化黑茶、四川藏茶、云南黑茶（普洱茶）、广西六堡茶等。由于黑茶都属于后发酵茶，茶汤均具有红、亮特点。目前，黑茶的研究主要集中在黑茶的香气成分[2-4]、品质化学成分[5]以及黑茶鉴别等方法，采用黑茶水溶性成分进行黑茶的鉴别研究较少，而且，对黑茶鉴别和品种评判多依赖于感官评价，缺少先进科学仪器分析的客观判断。

液质联用技术多用于食品检测，具有精密度高、稳定性好、重复性优等特点，但极少用于茶叶的品种鉴别研究上，本实验采用该方法分析5种黑茶的水溶性成分，为黑茶辨别、溯源进一步研究提供理论依据。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

安捷伦1290-6550C液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用仪；超纯水器（ELGA PURELAB ClassicUVF）；乙腈（质谱级，美国欧姆尼公司），其它试剂均为分析纯（国药集团化学试剂有限公司）。实验用水为经ELGA PURELAB ClassicUVF净化系统过滤的去离子水。茶叶信息：泾渭茯茶4批次，湖南安化黑茶4批次，四川藏茶4批次，云南普洱茶4批次，广西六堡茶4批次。

2.2 色谱条件

色谱柱：Agilent poroshell 120 EC-C18（3.0×100mm 2.7 μm）；进样量：5μl；流速：0.3ml/min；流动相：A：0.1%甲酸-5mmol/L 乙酸铵水溶液，B：乙腈，梯度洗脱见表1。

表1 梯度洗脱程序表

2.3 质谱条件

离子源：ESI+，扫描范围：100～1700amu，采集频率：3 张/秒；参比离子（amu）：121.0509，322.0481，922.0098，1221.9906，1521.9715。

2.4 供试样品前处理

取各代表性茶样3.0g置具塞三角瓶中，加入150ml沸腾去离子水，超声20分钟，滤液取1ml，置于100ml容量瓶中，加去离子水稀释并定容，摇匀，过滤，上LC-QTOF测定。

2.5 空白对照前处理

不添加茶样，取沸腾去离子水同“2.4”同步处理。

2.6 统计学分析

获得各代表性茶样的TIC图后，利用统计学软件作主成分分析，以初步获得各代表茶样之间的差异性与雷同性。

3 结果与讨论

主成分分析可以有效地将多维变量进行降维处理，筛选出最少的可以代表复杂的待分析数据，删除无用信息，从而将分析简单化。由于黑茶的水溶性成分较多且复杂，难以用单种或极少几种的化合物去评价分析，所以本实验利用液质联用技术对黑茶的水溶性成分获取足够的信息量后，配合统计学软件对原始数据做主成分分析图，见图1，由主成分分析散点图可以看出，原始数据经过统计学处理后，不同茶种能有效区分，而相同的茶种又能有效聚集,能为黑茶进一步研究和溯源开发提供理论依据。

图1 5种黑茶主成分分析散点图