高效液相色谱法测定泡棉材料中偶氮二甲酰胺的方法探究

江国栋

摘 要：本试验选择两种不同的萃取试剂，以及样品制备的两种不同状态，来探讨不同的前处理方式，对泡棉中偶氮二甲酰胺测试结果的影响。最终对比得到更优的检测方法，有利于对泡棉样品中偶氮二甲酰胺的检测。在高效液相的分析条件下，偶氮二甲酰胺在7min时间内可以得到很好的色谱峰，在1～20 mg/L的浓度范围内线性良好，线性相关系数达到0.999，检出限可以达到40 mg/kg。

关键词 泡棉;偶氮二甲酰胺;高效液相;二甲基亚砜

偶氮二甲酰胺作为是一种在工业中常用到的发泡剂，可用于瑜伽垫、橡胶鞋底等生产，以增加产品的弹性。同时也可以用于食品工业，增加面粉团的强度和柔韧性。还可用于泡棉、皮革等材料中，增加材料的韧性。偶氮二甲酰胺因具极强的致呼吸道致敏特性，2012年12月被列入SVHC有害物质清单[1]。二甲基亚砜对偶氮二甲酰胺有较好的提取效率，但二甲基亚砜凝固点为18.45℃[2]，在室温较低时容易凝固，不利于实验过程进行。因此，本试验选取两种较好的组合溶剂：二甲基亚砜：乙酸乙酯混合试剂（1：4），以及二甲基亚砜与甲醇的混合试剂（1+3）。由于泡棉样品在超声时容易悬浮，应将泡棉样品充分的与溶剂浸泡（上面可以压一些不含目标物的物体）。将泡棉研磨成粉末状，同时也剪成3mmx3mmx3mm的大小。在两种萃取试剂和两种样品制备状态下进行对照实验，最终得到4组结果。

1 实验方法

1.1 儀器及主要设备耗材

岛津高效液相色谱仪（HPLC）：（配二极管阵列检测器PDA）;

色谱柱：InertSustain C18 5μmx4.6mmx250mm;

超声波清洗仪;研磨仪;电子天平（精确至0.0001g）;

70ml螺口试管（带盖）。0.22μm过滤膜。

1.2 试剂及标物

二甲基亚砜（HP-LC级）;甲醇（HP-LC级）;乙酸乙酯;偶氮二甲酰胺标准物质（安谱，纯度99%）

2 实验方法

2.1 标准溶液配制

2.1.1 准确称取以偶氮二甲酰胺标准物质0.025g于25ml容量瓶，以二甲基亚砜溶解标准物质，配置成1000mg/L的标准储备液，然后用二甲基亚砜：甲醇（1：3）混合试剂作为稀释剂稀释成100mg/L的中间标准溶液。用100mg/L的中间标准溶液稀释成标准曲线，浓度分别为：1mg/L，2mg/L，5mg/L，10mg/L，20mg/L。

2.1.2 同2.1.1，换成以二甲基亚砜：乙酸乙酯（1：4）为基体，配置标准储备液，标准中间溶液及工作曲线：1mg/L，2mg/L，5mg/L，10mg/L，20mg/L。

2.2 样品的前处理

选取偶氮二甲酰胺阳性泡棉样品一个进行加标对照实验，每组进行4个平行测试：

2.2.1 泡棉样品用剪刀剪碎成3mmx3mmx3mm大小以下。称1.0000g±0.01g样品至70ml螺口试管。用10mL纯二甲基亚砜先50℃超声2h，再加入30mL甲醇，混匀后过0.22μm过滤膜，上HPLC测试。

2.2.2 泡棉样品用剪刀剪碎成3mmx3mmx3mm大小以下。称取1.0000g±0.01g样品至70ml螺口试管，用40mL二甲亚砜：乙酸乙酯（1：4）混合溶液50℃超声2h混匀后过0.22μm过滤膜，上HPLC测试。

2.2.3 泡棉样品经液氮冷冻后研磨成粉末。称取1.0000g±0.01g样品至70ml螺口试管。用10mL纯二甲基亚砜先50℃超声2h，再加入30mL甲醇，混匀后过0.22μm过滤膜，上HPLC测试。

2.2.4 泡棉样品经液氮冷冻后研磨成粉末。称取1.0000g±0.01g样品至70ml螺口试管，用40mL二甲亚砜：乙酸乙酯（1：4）混合溶液50℃超声2h混匀后过0.22μm过滤膜，上HPLC测试。

3 仪器方法

流速：0.4mL/min

流动相：100%甲醇等度洗脱

进样体积：10μL

柱温：40℃

定量吸收波长：268nm

总运行时间：7min[3]

4 结果与讨论

根据上述前处理及仪器方法的操作，偶氮二甲酰胺在7分钟左右出现良好的色谱峰，最低曲线点（1mg/L）信噪比都在5以上，线性相关系数达到0.999。不同的基体下的标准曲线点其响应面积很接近，无明显差别。

定量时2.2.1及2.2.3使用2.1.1的标准工作溶液曲线进行分析。

2.2.2及2.2.4使用2.1.2的标准工作溶液曲线进行分析。保持基体的一致性。结果如下表：

由表1数据可知：

（1）对比前处理方法2.2.1与2.2.2，以及2.2.3与2.2.4，相同的样品状态（研磨或不研磨），二甲亚砜：乙酸乙酯（1：4）组的结果都要比二甲基亚砜+甲醇（1+3）的结果要大。

（2）对比前处理方法2.2.1方法2.2.3，以及2.2.2与2.2.4，发现相同的萃取试剂，研磨组与不研磨组，结果很接近，无明显差别。

5 结语

本试验在测试泡棉样品中偶氮二甲酰胺时，通过对比两种不同的萃取试剂以及两种不同的样品制备状态，对比得到相应的结果：样品研磨与否对测试结果无影响，说明泡棉样较容易被萃取。试剂二甲亚砜：乙酸乙酯（1：4）比二甲亚砜+甲醇（1+3）萃取效率更高。说明试剂的选择才是此试验的关键。泡棉样品测试时可以剪碎3mmx3mmx3mm后，采用二甲亚砜：乙酸乙酯=1：4的混合溶剂进行超声萃取，过滤后，使用高效液相法定性定量分析。

参考文献

[1]严洪连，王华，林炼锋，等.泡棉中偶氮二甲酰胺的液相色谱法测定[J].中国化工贸易，2017（01）.

[2]汪多仁.二甲基亚砜[J].中外医疗，2001（3）：31.

[3]胡秀红，刘敏.高效液相色谱法快速检测鞋用发泡材料中偶氮二甲酰胺[J].化工管理，2017（01）：79.