润喉清咽口崩片的处方筛选与含量测定

2019-09-10李洋王秀丽

世界中医药 2019年1期

李洋王秀丽

摘要目的：筛选润喉清咽口崩片的制备工艺与处方，建立润喉清咽口崩片中儿茶素、表儿茶素的含量测定方法。方法：选取粉末直接压片法制备润喉清咽口崩片，以硬度、脆碎度、口感、崩解時间为主要评价指标，对崩解剂、润滑剂、填充剂进行单因素筛选实验，采用L9（33）正交试验设计优化处方;采用高效液相色谱法测定润喉清咽口崩片中儿茶素、表儿茶素的含量，采用CAPCELL PAK C18色谱柱，以0.04 mol/L枸橼酸溶液N，N二甲基甲酰胺四氢呋喃（45∶8∶2）为流动相，检测波长为280 m，流速1.0 mL/min，柱温25 ℃;检测波长280 nm。结果：润喉清咽口崩片最佳处方制备的润喉清咽口崩片外观和口感良好，60 s内可完全崩解。儿茶素在0.148 6～2.972 g范围内线性关系良好，r2=0.999 9（n=5），表儿茶素在0.103～2.06 g范围内呈良好的线性关系，r2=0.999 6（n=5）。平均回收率分别为98.49%，98.56%，RSD分别为1.33%，1.87%。结论：优化得到的润喉清咽口崩片处方合理，工艺可行，崩解迅速，口感良好，质量可控。

关键词润喉清咽口崩片;处方筛选;含量测定

中图分类号：R289.5;R92文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2019.01.014

润喉清咽合剂为北京中医医院院内制剂（京药制字Z20053362），由竹叶、生寒水石、儿茶组成，具有清热解毒，利咽之功，在治疗上针对肺热内蕴、阴虚肺燥证。现代药理研究，儿茶利咽润喉，具有抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗炎作用[14]，因此将儿茶中主要成分儿茶素、表儿茶素作为含量测定的指标。

润喉清咽合剂现有说明书用法是“口服，含漱后徐徐咽下”，现实情况下临床上患者实现“徐徐咽下”存在一定困难，导致患者的依从性不高，而“徐徐咽下”的目的是为了增加合剂与咽喉部位的接触时间，以起到局部的治疗作用，而实际临床应用很难实现该目的。将润喉清咽合剂改造成口崩片可以解决这个问题并方便患者服用。口崩片作为一种新型固体速释剂型，在口中不需要用水即可迅速崩解和溶解，只须依靠唾液和简单的吞咽动作即可完成服药过程，提高患者的用药依从性，特别适合老人、儿童以及有吞咽困难的特殊患者[5]。

我们以休止角作为其流动性的评价指标进行预实验[6]，润喉清咽处方粉末休止角在40°以下，可知其流动性良好，能满足压片要求，故采用粉末直接压片法制备润喉清咽口崩片，即将药材水提浸膏粉粉碎过筛后与辅料混合直接压片。

1仪器与试药

1.1仪器

FA1204B分析天平（上海精密仪器仪表有限公司）;ZP10旋转式压片机（上海信源制药机械有限公司）;1011AB电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）;ZBID智能崩解仪（天津市精拓仪器科技有限公司）;YD1片剂硬度测试仪（天津市囯铭医药设备有限公司）;CS1片剂脆碎度测试仪（天津市囯铭医药设备有限公司）;岛津LC20A高液相色谱仪，DAD检测器，色谱柱CAPCELL PAK C18 5m（4.6 mm×250 mm）。

1.2试剂

羧甲基淀粉钠（DST，上海昌为医药辅料技术有限公司，批号：SSGCO2291），交联聚维酮XL（PVPPXL，安徽山河药用辅料股份有限公司，批号：141006），硬脂酸镁（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号：140502），微粉硅胶（二氧化硅，北京凤礼精求商贸有限责任公司，批号：20051004），滑石粉（安徽山河药用辅料股份有限公司，批号：141006），微晶纤维素（上海昌为医药辅料技术有限公司，批号：P0101F1510），蔗糖粉（北京化工厂，批号：20140519），甘露醇（天津市福晨化学试剂厂，批号：20150912），山梨醇（天津市福晨化学试剂厂，批号：20150912），NaCl（北京化工厂，批号：20141020），甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯;水为超纯水。儿茶素对照品（批号：877200001供含量测定用），表儿茶素对照品（批号：878200102供含量测定用）由中国药品生物制品检定所提供。

1.3分析样品

儿茶、竹叶、生寒水石由北京中医医院中药房鉴定并提供。

2方法与结果

2.1口崩片检测方法

2.1.1硬度测定

选择制得的口崩片5片置片剂硬度仪中测定，求取平均值。调整压片厚度使片剂硬度始终在4～6 kg之间，符合目前口崩片研究的相关要求[78]。

2.1.2崩解时间的测定

参照《中华人民共和国药典》2015版片剂崩解时间测定方法，每次取1片口崩片于崩解篮中，浸入1 000 mL烧杯中，杯内成有温度为（37±1）℃的水约900 mL，调节水位高度使不锈钢管最低位时筛网在水面下（15±1）mm，从口崩片接触水面开始计时，全部颗粒通过筛网的时间为体外崩解时间[9]。

2.1.3脆碎度测定

参照《中华人民共和国药典》2015版片剂脆碎度测定方法，取样品10片进行试验，未检出断裂、龟裂或粉碎片，减失质量未超过1%判为符合规定[9]。

2.1.4口感判断

选取5名健康志愿者（不吸烟，不饮酒，近周无服药史，未接触刺激性食物味觉正常，均签署知情同意书），用纯化水清洁口腔，随机取一片药片置舌面，不用水也不咀嚼，允许舌正常运动，待药片在口腔中完全崩解后，将药粉吐出，立即用纯化水漱口，并记录口感。将味道、沙砾感、爽口度从低至高分为5个级别，分别为1～5分，将3个分数相加得到最终结果，分数越高口感越好[1011]。

2.2润喉清咽药粉的制备

按照原处方比例和制备工艺，称取竹叶、生寒水石、儿茶饮片，加水煎煮、过滤、浓缩成浸膏，真空干燥得干浸膏，粉碎成细粉（过80目筛），备用[11]。

2.3辅料的单因素筛选

2.3.1润喉清咽口崩片的制备

取浸膏粉适量，崩解剂、填充剂以及微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉适量，均过80目筛，混合均匀，16 mm圆形冲模直接压片，控制片剂的硬度约为5 kg。

2.3.2崩解剂的筛选

试验选取DST、PVPPXL作为崩解剂，其他辅料不变，按照不同比例单独使用或联用分别与浸膏粉混合，直接压片，硬度控制在4～6 kg，参照《中华人民共和国药典》2015版四部测定体外崩解时间。见表1。

由实验结果可知，DST和PVPPXL 2种崩解剂联用相比单一崩解剂崩解时间比较长，单用DST和单用PVPPXL比较，DST的崩解时间更短，所以本实验选择DST单用作为润喉清咽口崩片崩解剂。

2.3.3润滑剂的选择

试验选取微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉作为润滑剂，其他辅料不变，按照不同比例单独使用或联用分别与浸膏粉混合，直接压片，硬度控制在4～6 kg，测定体外崩解时间，观察对外观的影响。见表2。

实验结果表明，选择单一或2种联用的润滑剂片剂都有可能使压出来的润喉清咽口崩片出现黏冲或者裂纹的问题，崩解时间也更长，故选择3种润滑剂合用。试验号9崩解时间最少，故将微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉的比例定为18∶1∶1。见表3。

2.3.4填充剂的筛选

润喉清咽口崩片口感比较差，主要是味道比较苦。其他辅料不变，加入不同比例的填充剂后，评分平均在7～11分之间，差异比较大。加入蔗糖粉口感最好，但是崩解时间大大增加，而单用甘露醇崩解时间最少而且几位志愿者表示口感尚可接受，故此次选用甘露醇为填充剂。见表3。

2.3.4填充剂的筛选

润喉清咽口崩片口感比较差，主要是味道比较苦。其他辅料不变，加入不同比例的填充剂后，评分平均在7～11分之间，差异比较大。加入蔗糖粉口感最好，但是崩解时间大大增加，而單用甘露醇崩解时间最少而且几位志愿者表示口感尚可接受，故此次选用甘露醇为填充剂。见表3。

2.3.5润喉清咽口崩片处方优化

通过单因素筛选试验得出影响润喉清咽口崩片质量的主要处方因素为崩解剂DST的用量A、润滑剂（微粉硅胶、硬脂酸镁、滑石粉：18∶1∶1）的用量B，填充剂甘露醇的用量C，以其为考察因素，选用3因素3水平的L9（33）表进行正交试验，因素水平见表4。

采用粉末直接压片法，片重1.4 g，硬度控制在4～6 kg进行压制润喉清咽口崩片，以口崩片的崩解时间为主要指标筛选出最佳处方[1213]。见表5。

由表4、表5可知，各因素对片剂影响大小为A>B>C，确定最佳处方条件为A2B2C2，即崩解剂羧甲基淀粉钠质量分数45%、润滑剂质量分数10%，（即微粉硅胶质量分数9%、硬脂酸镁质量分数0.5%、滑石粉质量分数0.5%），填充剂甘露醇质量分数10%，则药粉质量分数为35%，载药量符合要求。

2.3.6验证实验

采用粉末直接压片法按最佳处方配比制备3批口崩片（20170415，20170619，20170907）进行验证实验。由预实验得知压片厚度为1.9 mm，冲模为16 mm圆形冲模，结果所得口崩片片形完整，厚薄一致，色泽均匀，崩解时限迅速，口感良好，硬度适宜，片重差异符合药典要求，脆碎度均大于“药典”规定的限度1%，考虑到口崩片硬度较小，应适当增大脆碎度限度范围，可以提高至5%。见表6。

验证试验结果表明，通过正交试验设计优化的润喉清咽复方口崩片的处方和制备工艺可行。

2.4高效液相色谱法测定润喉清咽口崩片中儿茶素、表儿茶素的含量

2.4.1色谱条件

流动相：0.04 mol/L枸橼酸溶液N，N二甲基甲酰胺四氢呋喃（45∶8∶2）;检测波长为280 m[9];流速1.0 mL/min;柱温：25 ℃;理论板数按儿茶素峰计算应不低于4 000。

2.4.2提取条件的选择

1）提取方法的选择：试验选用20%甲醇、50%甲醇、70%甲醇、甲醇，作为提取溶剂进行比较，取本品0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入相应溶剂50 mL，密塞，称定质量，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）45 min，放冷，再称定质量，用相应浓度的甲醇溶液补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。按上述色谱条件进行测定[1417]。见表7。

从以上测定结果，50%甲醇提取效率较好，故选择50%甲醇作为测定提取溶剂。

2）提取时间的选择：以50%甲醇为溶剂，提取时间分别采用超声提取15、30、45、60 min。测定方法同正文。见表8。

根据以上测定结果，选用50%甲醇超声的方法，超声30 min即可提取完全。

2.4.3溶液配制

1）对照品溶液的制备：

取儿茶素对照品、表儿茶素对照品，精密称定，加甲醇和水（1∶1）混合溶液分别制成每毫升含儿茶素0.15 mg、表儿茶素0.1 mg的溶液，即得。

2）供试品溶液的制备：

取本品0.2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，称定质量，超声处理（功率500 W，频率40 kHz）30 min，放冷，再称定质量，用50%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4.4专属性试验（空白对照试验）

按处方中药味的比例，配制不含儿茶的群药，按其工艺制成空白的制剂，照供试品溶液制备方法制备并测定，结果阴性样品在与儿茶素、表儿茶素相同保留时间处，未见色谱峰，故认为无干扰。对照品、供试品及空白液相色谱图见图1～3。

2.4.5线性关系考察

分别精密吸取儿茶素对照品溶液（浓度：0.148 6 mg/mL）、表儿茶素对照品溶液（浓度：0.103 mg/mL）1、5、10、15、20 μL，注入高效液相色谱仪，在2.4.1色谱条件下测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，儿茶素回归方程为：Y=6.516×105X-2.432×103，相关系数r2=0.999 9（n=5），表儿茶素回归方程为：Y=6.483×105X+7.044×103，相关系数r2=0.999 6（n=5）。结果表明儿茶素0.148 6～2.972 g范围内呈良好的线性关系;表儿茶素在0.103～2.06 g范围内呈良好的线性关系。见表9～10。见图4～5。

2.4.6稳定性试验

精密吸取同一批供试品溶液，分别于配制后0、4、8、12、24 h，在2.4.1色谱条件下测定峰面积，结果儿茶素RSD为1.58%，表儿茶素RSD为1.24%。表明供试品溶液在配制后24 h内基本稳定。

2.4.7重复性试验

按正文方法，取同一批样品，平行制备6份进行测定，结果儿茶素、原儿茶素RSD分别为0.56%、0.98%，表明方法重复性较好。见表11。

2.4.8准确度试验

精密称取已知含量的同一批样品（儿茶素含量33.28 mg/g、表儿茶素20.69 mg/g）1.5 g，精密加入对照品溶液（儿茶素浓度为0.144 56 mg/mL，表儿茶素浓度为0.0904 mg/mL）25 mL;各平行制备6份，在2.4.1色谱条件下测定峰面积。见表12～13，表明本方法具有良好的准确度。

2.4.9样品测定

照2.4.1项下方法，测定样品。见表14。

2.4.10耐用性考察

已知含量的同一批样品（批号20170907），分别用另外2种不同的色谱柱，Kromasil C18 5 m（4.6 mm×250 mm），Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18 5 m（4.6 mm×250 mm）对其含量进行了测定，结果表明，不同品牌色谱柱测定结果基本一致，色谱峰均可达到基线分离。见表15。

3討论

近年来，口崩片作为一种新型口服固体制剂，在唾液中几十秒内快速溶解，或在口腔内快速崩解。可以提高患者的依从性，有利于提高临床治疗效果。

试验采用粉末直接压片法制备口崩片，具体流程为：35%药物浸膏粉+崩解剂（45%羧甲基淀粉钠）→粉碎→过筛（80目）→混合→加润滑剂（9%微粉硅胶质量分数、0.5%硬脂酸镁、0.5%滑石粉）、填充剂（10%甘露醇）→混合→压片，片重1.4 g。通过正交试验设计优化润喉清咽口崩片处方，以验证将润喉清咽合剂改造成口崩片的可行性。

口崩片既要保证有较短的崩解时限，又要有足够的硬度。在试验过程中，我们发现片剂的硬度对崩解时限影响较大。压片时压力越大，片剂的硬度越大，崩解时限越长。硬度为3 kg以下时，崩解时间少，但片剂粗糙无光泽;在硬度为4～6 kg时，外观光滑有光泽，崩解时间在60 s以内。

本文对口崩片的处方进行了筛选和优化，分离出润喉清咽口崩片中儿茶素、表儿茶素并且进行含量检测，方法简单、重复性好，回收率高，专属性强，可准确控制本品的质量，为进一步制定质量标准提供依据。

参考文献

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