UPLC-MS/MS 检测4种蔬菜中的二嗪磷

王圆圆 王秀平 李明亮

二嗪磷又名地亚农、二嗪农，具有良好的内吸传导作用，能够抑制昆虫体内的乙酰胆碱酯酶合成，对防治菜青虫、棉蚜、三化螟和地下害虫等有良好的效果。然而，二嗪磷对人的神经系统会产生不良影响。基于世界卫生组织国际癌症研究机构2017年10月27日公布的致癌物清单显示，二嗪磷在2A类致癌物清单中。二嗪磷残留量直接影响到农产品的质量安全。

目前，二嗪磷残留量的测定多用气相色谱法和气相色谱-质谱法等，但其前处理较复杂，灵敏度也不高。液相色谱-质谱法有处理简单、灵敏度高等优点，可以弥补气相色谱或者气相色谱-质谱法的不足。目前，使用液相色谱-质谱法检测二嗪磷的残留研究报道较少，而对于蔬菜中二嗪磷的测定则未有液相色谱-质谱法相关方面的报道。本文分别选取瓜类、茄果类、叶菜类和豆类蔬菜中的典型代表黄瓜、番茄、小白菜和豇豆4种蔬菜为试样，使用超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）在多反应离子监测（MRM）模式下进行快速检测，分析了UPLC-MS/MS测定4种蔬菜中二嗪磷农药的残留量，以期为提高蔬菜中二嗪磷残留检测的准确性提供参考。

一、材料和方法

（一）仪器设备

Waters Acquity H-class超高效液相色谱仪。BEH C18 2.1 mm×

50 mm×1.7μm色谱柱（美国Waters公司）。Waters Xevo TQ-S micro

三重四级杆质谱仪，电喷雾离子源ESI。法国默克Synergy?UV超纯水制备系统，德国IKA T18 digital 高速分散機。Dragonlab涡旋，Fisher公司）。乙酸、氯化钠（分析纯， 上海国药集团公司）。农药标准品：二嗪磷（质量分数为100 μg/mL，农业农村部环境保护科研监测所）。样品前处理净化剂PSA、GCB和MgSO4（Agilent公司）。供试蔬菜为黄瓜、番茄、小白菜和豇豆。

（二）试验方法

1.基质的制取方法。取蔬菜样品可食用部分，4种蔬菜各称取3 kg左右，用干净的布擦去表面的附着物，采用对角线分割法，将其切碎，充分混匀放入食品加工器粉碎，制成待测样。准确称取10 g试样于离心管中，加入20 mL乙酸-乙腈溶液，摇匀后用均质器于10 000 r/min均质30 s，加入5 g氯化钠后再均质30 s。10 000 r/min

离心5 min，移取上层提取液3 mL，加入装有净化剂的离心管中，涡旋混合1 min，10 000 r/min离心5 min，移取上清液经0.22 μm微孔滤膜过滤，作为基质备用。

2.标准溶液的配制。分别移取100 μg/mL的二嗪磷标准品1 mL置于10 mL和100 mL的容量瓶中，用乙腈为溶剂定容，配制成10 μg/mL和1 μg/mL的混合标准储备液。

3.纯溶剂加标准溶液的配制。用纯溶剂乙腈将混合标准储备液逐级稀释配制成0.5 ng/mL、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL的纯溶剂加标准溶液。

4.基质加标准溶液的配制。用基质制取法制得的4种蔬菜基质分别将混合标准储备液稀释配制成0.5 ng/mL、1 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、50 ng/mL的基质加标准溶液。

（三）质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI），多反应监测（MRM）。毛细管电压为3.0 kV，离子源温度为150 ℃，锥孔反吹气流量为50 L/h，脱溶剂气温度为500 ℃，流速为1000 L/h，碰撞气为氩气。具体参数见表1。

二、结果与分析

（一）标准曲线

因样品中的干扰物影响目标化合物的离子化，使得目标化合物在仪器上的响应发生增强或抑制的现象，从而产生基质效应，影响目标化合物测定的准确性。为了解不同蔬菜基质对二嗪磷测定结果产生的影响，本试验分别用乙腈溶液、4 种不同蔬菜空白基质溶液配成一系列的标准溶液，用高效液相质谱仪检测。结果表明，4种不同蔬菜的基质标样峰面积均小于乙腈标样的峰面积，说明这4种蔬菜中的基质对二嗪磷均有抑制作用。本试验为消除基质效应的抑制作用，采用不同蔬菜对应不同的基质配制的标准曲线计算结果，以待测物浓度为横坐标，待测物定量离子的峰面积为纵坐标，绘制线性方程（见表2）。在0.5 ～50 ng/mL浓度范围内均具有良好的线性关系，线性相关系数>

0.99。

（二）分析方法的准确度、灵敏度和精密度

分别在制备好的黄瓜、番茄、小白菜和豇豆等4种空白蔬菜样本中添加二嗪磷标准溶液。添加浓度分别为0.01 mg/kg、0.05 mg/kg、0.1 mg/kg，每个添加水平设5个重复，按照样品添加试验进行提取和净化，进行检测并计算回收率。二嗪磷在黄瓜中的平均添加回收率为97.5%～103.0%，相对标准偏差为0.60%～2.81%;在番茄中的平均添加回收率为98.7%～102.9%，相对标准偏差为2.01%～3.26%;在小白菜中的平均添加回收率为96.9%～104.2%，相对标准偏差为1.81%～2.64%;在豇豆中的平均添加回收率为96.3%～109.9%，相对标准偏差为1.81%～1.94%（见表3）。

三、讨论

本文建立了二嗪磷在黄瓜、番茄、小白菜和豇豆等蔬菜中使用UPLC-MS/MS检测其残留的方法。该方法前处理简单、回收率高，添加浓度为0.01～0.1 mg/kg，平均回收率为96.3%～109.9%，相对标准偏差为0.60%～3.26%。准确度和灵敏度均符合农药残留的分析要求，同时也为检测二嗪磷在其他蔬菜中的残留提供了参考。