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不同产地葛根药材的质量分析

2019-09-09蒲小兰林书兰王晓玉王娃金

中国保健营养 2019年10期
关键词:总黄酮葛根化学成分

蒲小兰 林书兰 王晓玉 王娃金

摘要:产地不同,葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮这几种成分的含量存在一定的差异。对不同产地葛根药材的化学成分进行详细地测定,为葛根药材质量标准提供一定的理论支持,分析研究结果可以将其作为研究此物质量标准提供一定的理论帮助。

关键词:葛根;产地不同;化学成分;总黄酮

【中图分类号】R197    【文献标识码】A     【文章编号】1004-7484(2019)10-0218-03

葛根主产于河南、湖南等地区。其用途比较广泛,可以缓解发热的症状,还可以升阳止泻等。它是一种豆科植物,葛根的主要的成分包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等成分。同时还包括一定的黄酮类物质、多糖以及很多的微量元素。葛根是一种分布十分广泛的药材。产地不一致,从而导致质量方面存在一定的差异。为了对药材的质量进行合理的控制,同时制定一定的标准,本次实验通过对不同产地的葛根药材中葛根素、大豆苷、大豆苷元、总黄酮进行详细地分析和测定,希望可以对葛根药材质量的控制提供一定的帮助。实验如下:

一、仪器、试剂及样品

高效液相色谱仪;色谱柱;真空泵;外分光光度计;电子天平;葛根样品;甲醇;乙醇;水。

二 、方法与结论

2.1葛根素含量的测定:在进行测定时,主要运用中国药典中的测定方法进行测定,测定结果如下图1所示:

2.2大豆苷、大豆苷元含量测定

2.2.1色谱条件 (如图二所示)

根据图2 的色谱图,可以明显地看出大豆苷、大豆苷元与其他成分分离的效果是很可观的,理论塔板数均高于4000。

2.2.2制备对照品溶液

用天平准确地称取大豆苷,大豆苷元的对照样品需按实际情况适量称取,加70%乙醇分别制成0.2和0.1mg/mL溶液.

2.2.3制备供试品溶液

用天平准确地称取药材细粉0.2克,放在100mL平底的烧瓶内;加入20ML70%的乙醇溶液;密封处理;对其称重;加热回流2h进行提取;冷却;继续用乙醇溶液补充溶液恢复至原刻度线的位置。

2.2.4精密度分析

对大豆苷以及大豆苷元对照品溶液进行精密吸取,体积分别为10ML,对两者分别连续进样5次,RSD分别为1.3%和1.5%,说明仪器具备良好的精密度。

2.2.5稳定性试验分析

对供试品溶液分别进行精密吸取,分别于0,2,4,6,8,10,12 等不同的时刻进样10ML,大豆苷和大豆苷元RSD分别为1.7%和1.3% ,表明供试液整个阶段内属于稳定状态。

2.2.6重复性试验

用天平准确地称取同一样品的粉末各6份,每一份质量为0.2g,重复上述制备供试液的方法继续制此溶液,测得大豆 苷、大豆苷元的平均含量没有明显地变化, RSD也是比较稳定的,这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。

2.2.7加样回收率试验分析

取同样的葛根粉末各6份,每一份大约在0.1g左右,在每份样品中加入一定量的大豆苷和大豆苷元的對照品。重复上述操作制备供试液,测定结果如表1所示。

从表格可以看出回收率比较可观。

2.3总黄酮含量实验分析

2.3.1制备对照品的溶液:称取葛根素的标准品20mg于100mL量瓶中,注意称取时尽量准确,加95%的乙醇溶解进行稀释处理,达到标准刻度位置的同时需要进行摇匀处理,避免一定的误差出现。

2.3.2制备供试品溶液:用天平准确地称取葛根粉末0.4 g于100ML的锥形瓶中,加进95%乙醇60 mL;放在热水中进行加热处理;大约50min并在加热时及时进行振摇处理;时间结束后进行冷却处理;加乙醇补足到原刻度线位置;摇匀处理;静置一段时间使溶液澄清;吸取上清液2 mL左右导入到25 mL的量瓶中;加入适量的蒸馏水进行稀释;恢复原刻度线位置并作摇匀处理。

2.3.3最大吸收峰的确定:吸取对照品溶液和供试品溶液,吸取时需要注意两点,一是吸取需精准,二是吸取需适量。以2mL 95%乙醇加水稀释至20mL量瓶中作为主要的对照溶液,进行扫描处理,结果显示在250nm附近的时候有最大吸收强度。

2.3.4精密度分析:对黄酮对照品溶液进行精密吸取,在250nm的时候测定其吸收光照的程度,连续操作5次,RSD为0.1%,说明仪器具备良好的精密度。

2.3.5稳定性试验分析:吸取同一种供试品溶液,在制备60min(每间隔10min测量一次)时间内分别测定其吸收光照的程度,测得RSD在60分钟之内变化处于稳定的状态,因此可以说明此实验的稳定性良好,不会因此而出现一定的误差现象。

2.2.6重复性试验:用天平准确地称取同一样品的粉末各6份,每一份质量为0.4g,重复上述制备供试液的方法继续制此溶液,在250nm下测定其吸收光照的强度,在此位置RSD为1%左右,这一结果表面该实验的方法的重复性方面基本没有问题。

2.2.7加样回收率试验分析:取同样的葛根粉末各6份,每一份大约在0.1g左右,在每份样品中加入一定量的葛根素作为主要的对照样品。重复上述操作制备供试液,测定结果如表2所示。

2.4不同地区的葛根成分分析

通过检测测出不同地区葛根含量明细如下(图3)

三、讨论

对大豆苷、大豆苷元标准品溶液进行紫外全波长的扫面,再加上对样品溶液进行紫外全波长扫描,结果显示都是在248 nm处吸收程度比较好,因此通过实验分析出大豆苷、大豆苷元含量进行相关的测定是时选择测定波长为248 nm时效果是最明显的,因此这个数值可以被用来以后的测定和研究,可以节省一定的人力、物力和财力。葛根中的黄酮物质对乙醇比较容易吸收,通过实验的分析可以发现,当浓度为70%时,乙醇提取大豆苷、大豆苷元效果是比较好的,因此在进行测定的时候一般可以采用70%的乙醇来进行操作。另外当大豆苷的元峰与其它峰交互在一起时。经过试验选用甲醇~水按上述实验的操作步骤进行,使大豆苷,大豆苷元可以完全分离的状态,这样往往分离效果是比较明显,方便结果分析。

四、总结

本实验主要是根据葛根的多种成分进行详细地分析,对收集的不同地区的葛根样品进质量分析,结果表明,产地不同,葛根的质量上均存在一定的差异。因此在不断地研究中,对于药材的产地和不同的品种之间进行相应的研究,可以在一定程度上对药材的质量进行保证。

参考文献

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].一部,北 京:化学工业出版社,2005:233.

[2] 易红,杨华.葛根的品种产地和提取工艺研究进展 概况[J].中国实验方剂学杂志,2006(11):60.

[3] 冀春茹,王浴铭,刘延泽,等.中药化学实验技术与实验 [M].郑州:河南科学技术出版社,1986:281.

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