血清IL-17和IL-23水平与梅毒病期的相关性

荚琳琳 季必华

在近年来，梅毒发病人数一直居高不下，这严重威胁了人们的健康。梅毒螺旋体在机体内长期存在的感染机制至今未明，目前的研究主要在T细胞介导的免疫反应中。Th17细胞是近年来新发现的细胞，它在病原体感染的过程中通过诱导中性粒细胞的细胞因子来间接清除细胞外的细菌和真菌[1]。目前对于Th17细胞如何参与梅毒螺旋体的免疫致病过程,以及它在梅毒不同病程中起的作用，仍不明确。Th17细胞主要分泌IL-17、IL-21、IL-22等细胞因子，其中以分泌IL-17为主[2]。IL-23属于IL-12细胞因子家族，它可以刺激真皮组织中的Th17细胞产生Th17相关的细胞因子，维持Th17细胞的发育，对IL-17的产生起着重要作用[3]。本研究通过比较早期与晚期梅毒患者外周血清中IL-17、IL-23的水平，并分别比较两组与正常对照组IL-17、IL-23的水平，以明确梅毒患者在梅毒感染各期中IL-17、IL-23水平是否存在差异及变化趋势，从而为有效治疗梅毒以及梅毒患者的转归提供一定的理论依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 在2013年10月至2014年10月期间收集18例早期梅毒患者(病程小于2年)，男9例，女9例；年龄23～51岁，平均(34.667±11.571)岁，18例晚期梅毒患者(病程大于2年)，男7例，女11例；年龄21～52岁，平均(35.278±9.981)岁。多数早期患者都有硬下疳、玫瑰疹及扁平湿疣等表现。晚期患者均无任何皮肤黏膜损害。同期收集12例健康志愿者作为正常对照组，男5例，女7例；年龄21～49岁，平均(33.333±9.247)岁。

1.2 研究方法 所有入选早晚期梅毒患者及正常对照组人群均抽取外周静脉血5 mL，静置于室温下血液自然凝固10～20 min后，放入离心机(2000～3000 r/min)，离心20 min，收集血清，立即行TPPA和RPR试验，同时进行HIV抗体的检测。另取1 mL血清于冻存管分装，并标注编号放置于-70℃冰箱冷冻保存，以备IL-17及IL-23因子的检测。所有细胞因子检测操作按说明书进行450 nm测吸光度利用标准曲线计算浓度。检测步骤按说明书进行，通过标准曲线计算出血清中IL-17及IL-23的浓度。

1.3 统计学方法 应用SPSS 17.0统计软件，多个样本均数的两两比较采用LSD-t检验，两独立样本均数比较采用t检验，显著性检验水平为0.05。相关性指标采用直线相关法分析，并作相关系数r的假设检验，显著性检验水平为α=0.05。

2 结果

2.1 早期梅毒组、晚期梅毒组及正常对照组IL-17、IL-23的水平 早期梅毒组、晚期梅毒组血清中的IL-17及IL-23均高于正常对照组，差异有显著性。见表1。早期梅毒组的IL-17、IL-23水平高于正常对照组，差异有显著性(P<0.05)；晚期梅毒组的IL-17、IL-23水平高于正常对照组，差异有显著性(P<0.05)；晚期梅毒组血清中的IL-17、IL-23水平较早期梅毒组水平偏高，差异没有统计学意义(P>0.05)。

表1 早期梅毒组、晚期梅毒组及正常对照组的血清中的IL-17、IL-23水平的比较

注：晚期梅毒组血清中IL-17的水平高于早期梅毒组，P>0.05,差异无统计学意义；晚期梅毒组血清中IL-23的水平高于早期梅毒组，P>0.05,差异无统计学意义

2.2 早期梅毒组及晚期梅毒组的血清中的IL-17及IL-23水平的相关性分析 早期梅毒组的IL-17和IL-23水平的相关系数r=0.917，呈正直线相关关系，P<0.05；晚期梅毒组的IL-17和IL-23水平的相关系数r=0.891，呈正直线相关关系，P<0.05。见表2。

表2 早期梅毒组及晚期梅毒组的血清中的IL-17及IL-23水平的相关性

3 讨论

3.1 IL-17与梅毒病程的关系 IL-17主要由Th17细胞分泌，此外γδ17细胞、树突状细胞以及NKT细胞都能够产生[4]。Burehill等[5]在研究由博氏疏螺旋体感染引起的莱姆病关节炎时发现，博氏疏螺旋体感染人体后可诱导机体产生IL-17，而抑制机体IL-17水平可以阻止病情的发展。故推测梅毒螺旋体的感染也可导致机体产生IL-17，而IL-17可以诱导巨噬细胞、软骨细胞等分泌IL-6、IL-lβ及TNF-a等炎性细胞因子[6], 而IL-6、IL-1β和IL-23一起可以再次诱导Th17分化[7]。这样的正反馈机制可能是梅毒患者血清中IL-17的水平高于正常组的原因，也是本试验中晚期梅毒组中IL-17的水平略高于早期组的原因，虽然没有统计学意义，但由于其接近检验水准，若增加样本量，极可能出现新的结果，即：晚期梅毒组患者血清中IL-17的水平高于早期梅毒组。故猜测随着TP感染时间的延长，IL-17水平有上升趋势。

Pastuszczak等[8]通过实验发现，在部分无症状神经梅毒患者脑脊液中IL-17水平较高，且脑脊液中细胞计数量与IL-17的水平呈正相关。2014年有报道指出：IL-17水平的升高与神经梅毒的预后不良呈正相关[9]。这些结果均提示在梅毒患者中IL-17水平的升高，这些结论与成果也与本次试验中梅毒患者血清中IL-17的水平高于正常对照组的结果相符。

3.2 IL-23与梅毒病程的关系 IL-23是一种异二聚体蛋白，它有它特有的IL-23p19亚基和IL-12/23p40通过二硫键配对组成。IL-23主要由抗原递呈细胞分泌,活化的巨噬细胞、T细胞、内皮细胞、B细胞都能够产生IL-23p19亚基。目前IL-23水平上升的具体机制不明，但在多种疾病中IL-17与IL-23的水平均呈现正相关[10-12]，故猜测IL-17与IL-23之间可能存在某种反馈机制。国内有人在研究二期梅毒时指出，在二期梅毒患者血清中IL-23的水平高于正常对照组，且与其RPR滴度没有明显的线性相关性[12]。这与本研究的结果相符合。

3.3 IL-17及IL-23与梅毒病程迁延的关系 本研究结果中早期及晚期梅毒组的血清中IL-17及IL-23的水平均明显高于正常对照组。说明了Th17细胞确实参与了TP的致病和感染机体的过程。在未治疗的前提下，晚期梅毒组的IL-17和IL-23的水平略高于早期梅毒组的IL-17和IL-23的水平之间，虽然其没有统计学意义，但由于P值都接近0.05，故猜测随着TP感染病程的迁延，IL-17及IL-23的免疫应答进行性增强。

有研究表面降低体内IL-17或IL-23的水平，可以缓解银屑病患者的病情，甚至比常规全身性药物更有效[13]。说明IL-17及IL-23水平的上升可能是银屑病活动的原因之一。在既往的研究中银屑病一直属于Th1型疾病，而Th1细胞在梅毒的发病过程中也起着重要作用，而且在本次研究中，晚期梅毒组的血清中IL-17及IL-23的水平有高于早期梅毒组的趋势。结合上文，故猜测IL-17或IL-23水平的上升可能是梅毒慢性化的原因之一。但是目前国内外文献中，没有直接的证据证明这一点，可能还需要后续的研究加以佐证。

3.4 结语 血清中IL-17及IL-23的水平在早期梅毒组与晚期梅毒组之间的差异无统计学意义，但是P值均接近0.05，这可能与本研究中样本量较少有关。今后再继续观测该类患者治疗前后的IL-17及IL-23动态水平变化，可能有更大的意义。