394例疑似ABO新生儿溶血病实验结果研究分析

高杨 宁冈 韦海春

（柳州市妇幼保健院 广西 柳州 545001）

新生儿溶血病（Hemolytic Disease of the Newborn，HDN）是一种相对常见的新生儿疾病。其主要是由于孕妇和胎儿之间的血型差异，两者的部分血液交换致孕母血液产生针对胎儿红细胞抗原的IgG血型抗体，发生免疫反应，引起分娩前后胎儿红细胞不同程度的溶血。导致新生儿黄疸、肝脾损害、贫血、高胆红素血症、严重感染等，严重时可引发神经系统症状、胆红素脑病、心衰甚至死亡[1]。临床上由ABO血型不一致引起的新生儿溶血病远远高于其他血型系统[2]。因此新生儿溶血病检测实验对及早诊断和治疗ABO新生儿溶血病（ABO-HDN）有重要意义。本文选择2018年4月—12月期间394例怀疑为ABO-HDN的新生儿样本的新生儿溶血病检测结果进行研究分析。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年4月—12月中394例怀疑为ABO血型不合新生儿溶血病患儿送检样本，对送检性别、年龄、血型、直接抗人球蛋白实验（简称直抗实验）、游离抗体实验（简称游离实验）、红细胞抗体释放实验（简称放散实验）等结果进行研究分析。

1.2 仪器与试剂

新生儿血型鉴定检测卡、抗人球蛋白检测卡由长春博迅生物技术有限公司提供；ABO血型反定型试剂盒由长春博德生物技术有限责任公司提供；血库专用离心机KA-2200；FYQ型免疫微柱孵育器、TD-A型血型血清学用离心机由长春博研科学仪器有限责任公司生产。

1.3 方法

新生儿血型鉴定检测卡做新生儿血型及直抗实验，抗人球蛋白检测卡做游离实验和放散实验。所有检测均严格按照国家临床实验室程序和试剂盒说明进行操作。

1.4 结果判定

HDN三项实验中有二或三项阳性或只是放散实验阳性可诊断为HDN；单项直抗实验或游离实验阳性，判定为可疑HDN[3]。

1.5 统计学方法

采用SPSS软件进行数据处理，计数数据用n（%）表示，卡方检验用于组间比较，以P＜0.05被认为具有统计学意义。

2.结果

2.1 本次统计的394例检测结果中，证实为新生儿溶血病的有287例，检出率为72.8%。直抗实验阳性检出率占7.6%（30/394），游离实验阳性检出率占53.0%（209/394），放散实验阳性检出率占72.8%（287/394），放散实验在所有确诊病例中均为阳性。放散实验分别与直抗实验、游离实验结果比较，差异有统计学意义（P＜0.05），见表。

表 不同性别、血型及年龄HDN三项实验结果阳性率比较[n（%）]

2.2 三项实验阳性检出率女性均高于男性。男性确诊率占69%（136/197）；女性确诊率占76.6%例（151/197），两者差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 三项实验阳性检出率A型均高于B型。A型确诊率占79.4%（143/180）；B型确诊率占67.3%（144/214），两者差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.4 三项实验阳性检出率≤7d组新生儿均高于＞7d组新生儿。≤7d组确诊率占76.1%（268/352）；＞7d组确诊率占45.2%（19/42），两者差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3.讨论

本研究中，直抗实验阳性率明显低于游离实验和放散实验阳性率，且其阳性强度多数较弱。由于血型抗原在新生儿红细胞上表达较少，所以IgG抗体吸附量小，并且细胞被IgG抗体致敏后，大量溶解，致使直抗实验阳性检出率降低。另外由于实验用的红细胞悬液浓度只有0.8%，被稀释度较大，致红细胞量较少，也是引起直抗实验阴性率高的原因之一。有研究[4]表明直抗实验阳性强度可初步区分ABO-HDN和Rh-HDN，前者大多阳性强度较弱，多为1+左右，后者阳性强度多为2+以上。直抗实验阳性只说明IgG类抗体已致敏新生儿红细胞，但还不能诊断为ABO-HDN[5]，对抗体的特异性，需结合临床资料、游离实验和放散实验等证实。

游离实验作为ABO-HDN的参考实验，单项阳性只能判为“可疑”，仅指示新生儿血浆中有IgG抗体的存在，这些抗体能否致敏胎儿红细胞还要依赖于抗体的滴度和亲和力，以及红细胞上的抗原结构和数量[6]。当进入到胎儿体内IgG免疫抗体的量小，且全部吸附到红细胞上时，血浆游离抗体实验可呈阴性，因此游离抗体实验阴性也不可轻易排除患儿患ABO-HDN的可能性，还需结合直抗实验和放散实验加以判断。游离实验对病情病程和严重程度有提示作用，其阳性患儿病程多较长，也较严重，因为致敏红细胞被破坏后，骨髓造血系统新生成的红细胞可与血浆中过量的游离抗体结合，继续破坏红细胞，导致病程延长[7]。

放散实验阳性率显著高于其他两项实验（P＜0.05）。直抗实验和放散实验都是检测致胎儿敏红细胞上的血型免疫抗体，放散实验的阳性检出率却明显高于直抗实验，是因为放散实验使用未稀释的圧积红细胞进行实验，细胞量远远高于直抗实验，其通过特殊放散液将大量致敏红细胞上的免疫抗体从红细胞上释放、浓缩到放散液中，由此达到更高的敏感性和特异度。因此，放散实验成为ABO-HDN最重要的指标，实验结果检出阳性即可明确诊断为ABO-HDN[8]。

三项实验结果中，女性患儿阳性率均高于男性阳性率，但两者确诊率比较，却不具统计学差异（P＞0.05），即本研究未发现性别与ABO-HDN患病率有相关性。但有其他研究报道[9]与本次研究结果不符，究其原因可能是新生儿性别因地域不同而造成的分布差异所致。

A型患儿阳性率均高于B型患儿，且两者确诊率比较，具有统计学意义（P＜0.05）。其原因有可能是由于新生儿红细胞表面A抗原决定簇多于B抗原决定簇，免疫原性A抗原强于B抗原，更易诱导免疫应答所致[10]。但是血型在不同地域之间的分布差异，仍可能导致实验结果的不同，发病率也因此不尽相同，不能一概而论。

年龄≤7d的患儿各项实验阳性率明显大于年龄＞7d的患儿，两组确诊率相比较具有统计学差异（P＜0.05）。实验结果说明检出阳性率随时间推移降低,其原因是患儿出生后致敏红细胞不断被破坏,血中的游离抗体也不断随时间推移被消耗而破坏红细胞,红细胞大量减少,最终导致阳性检出率降低。另外临床症状也有可能随着患儿年龄天数的增加而逐渐消退，令真正的新生儿溶血病漏检[11]。

本院作为一家三级甲等妇女儿童医院，入院进行产检及分娩的孕产妇较多。在临床实践中发现多次妊娠的孕妇正常分娩后新生儿溶血病的发生率明显高于初次妊娠的孕产妇。因为多次妊娠的孕妇反复接触胎儿的红细胞抗原刺激，产生高滴度的IgG抗A和抗B抗体，使免疫应答效应增强，导致新生儿溶血病的发病率增高[12]。因此，在妊娠期间详细了解母亲既往的血型抗原接触史和检测母亲血清中的免疫性抗A和抗B抗体，对预测新生儿是否会发生ABO血型不合溶血病有较大价值。

综上所述，新生儿溶血病三项检测实验中放散实验是诊断价值最高的实验。A型患儿比B型患儿的ABO-HDN患病率要高，但要考虑地域分布差异。新生儿性别对ABO-HDN患病率影响无意义。出生前，可对妊娠期孕妇做产前免疫抗体效价检测，有助于在早期采取有效的防治措施，降低发病率。出生后怀疑为新生儿溶血病的患儿要尽早送检标本进行新生儿溶血病检测，以免耽误病情，提高治疗效率。