口蹄疫诊断和防控技术

拜克力·米吉提

（新疆阿克苏地区库车县北山牧场公路动物检查消毒站，新疆库车 842000）

1 病原

口蹄疫病毒对酸、碱特别敏感。在pH3时，瞬间丧失感染力，pH5.51s内90%被灭活；1～2%氢氧化钠或4%碳酸氢钠液1min内可将病毒杀死。-70～-50℃病毒可存活数年，85℃1分钟即可杀死病毒。牛奶经巴氏消毒（72℃15min）能使病毒感染力丧失。在自然条件下，病毒在牛毛上可存活24日，在麸皮中能存活104日。紫外线可杀死病毒，乙醚、丙酮、氯仿和蛋白酶对病毒无作用。

2 临床症状

主要是口、鼻、蹄、乳头等部位出现水泡。发泡初期，牛有流涎症状，猪、羊表现跛行。

羊的潜伏期为2～8d。症状轻微，不易被察觉。口腔粘膜 、舌上时有水泡，但较小，有米粒至豆粒大小。蹄部病变和牛相似，发生水泡时表现跛行。

3 口蹄疫病料采集运送

3.1 检验样品

水泡皮（液）、O/P液、血液样品。

3.2 水泡皮采集

选采新鲜、成熟、未破裂或刚破不久的水泡皮，陈旧、结痂或腐败变质的残破水泡皮不好用，甚至不能用。

牛样应采取舌表面的水泡皮，在水泡尚未破溃或刚破溃时，牛的口中少量流涎或不流涎，这是采集病料的最佳时机。

猪样应采取蹄叉部、蹄冠部或鼻镜部的水泡皮，不要采取蹄踵部角质化表皮。

羊的水泡材料较难采集，水泡通常小而分散，需要仔细寻找。

采取水泡皮时应尽量保持无菌，用消毒剪子剪下水泡皮后，置入无菌小瓶中，加入由等量甘油和0.04mol／L磷酸盐缓冲液（pH7.2～7.6）配制成的运输液中，可加入适量抗生素。加盖及用胶带封口，帖上标签，-20℃下保存。水泡皮样品每份至少1～2g。

3.3 水泡液采集

用消毒过的注射器从未破溃水泡中吸出水泡液，水泡液应清亮透明，装入灭菌瓶中，（可加入适量的抗生素，如青霉素1000IU/ml，链霉素1mg/m1），加盖后用胶带封口，贴上标签，冷藏保存。

3.4 O/P液的采集

O/P液是动物食道/咽部刮取的粘膜样品。用于查明牛、羊等反刍动物感染FMD及持续带毒状况。

3.5 注意事项

采样前禁食12h（可饮水）。食道探杯使用前用2% NaOH溶液浸泡消毒3～5min，再用清水冲洗后使用。采到的样品应立即冷冻保存。

3.6 样品保存液

在0.04mol/LPBS 缓冲液中按每升加1%酚红2ml，样品保存液pH值一定要在7.2～7.6之间。

3.7 血清样品

无菌采取动物血液10～15ml，分离血清（每头动物不少于2m1），分装入两个灭菌的离心管里。加盖、封口并贴上标签，编号，置于4℃保存或冻结保存，但不能反复冻融，否则抗体效价下降。包装：与水泡皮／水泡液样品的方法相同。

诊断方法及免疫监测。

口蹄疫的实验室诊断主要是病原学诊断和抗体检测两个方面。

4 病原学检测方法包括：

（1）补体结合试验；

（2）RT-PCR 试验；

（3）反向间接血凝试验；

（4）间接夹心ELISA。

5 预防措施

平时要积极预防、加强捡疫，常发地区要定期注射口蹄疫疫苗。常用的疫苗有口蹄疫弱毒疫苗、口蹄疫亚单位苗和基因工程苗，牛在注射疫苗后14d产生免疫力，免疫力可维持4～6个月。

（1）严格执行卫生防疫制度，保持牛床、牛舍的清洁、卫生；粪便及时清除；定期用2%苛性钠对全场及用具进行消毒。

（2）加强饲养管理，保持牛舍清洁、通风、干燥、卫生，平时减少机体的应激反应。

（3）强化日常消毒工作，圈舍、场地和用具以2%的火碱或10%的石灰乳，坚持每两天消毒一次，粪便进行堆积发酵处理。

（4）加强检疫制度，保证牛群健康。不从病区引购牛只，不把病牛引进入场。为防止疫病传播，严禁羊、猪、猫、犬混养。

（5）定期接种口蹄疫疫苗。

（6）注射血清抗体天健牛毒清做紧急预防，可有效的预防该病。

（7）病牛一旦确诊为口蹄疫，要及时隔离病牛、并及时进行治疗。