五种中草药提取物对禽沙门氏菌的体外抑菌实验

沙门氏菌病是禽生产过程中的常见病，是造成鸡群散发死亡的重要病因，由鸡白痢沙门氏杆菌引起的称为鸡白痢；由鸡伤寒沙门氏杆菌引起的称为鸡伤寒；由有鞭毛能运动的沙门氏杆菌引起的禽类疾病统称为禽副伤寒。本病可以垂直传播和水平传播，一旦环境中有此类细菌存在，彻底治愈、消灭难度极大，因此常造成几批鸡连续发生本病。

从不同地区和不同鸡场分离的沙门氏菌病血清型差异很大，使用疫苗进行预防效果较差，目前其防治手段主要是化学类抗菌药物和抗生素。长期使用抗生素后耐药性的问题越来越严重，同时药物残留造成休药期很长，增加很多养殖成本。因此使用中草药防治本病具有重要的现实意义。

一、试验材料

黄柏、黄连、秦皮、穿心莲、白头翁等原药购于承德热河中药材有限公司；MH肉汤和普通营养琼脂培养基购自北京奥博兴生物科技有限公司；蒸馏水、乙醇等其他药品，由河北旅游职业学院动物疫病实验室提供。

二、菌株来源与鉴定

禽沙门氏菌菌株分离自承德周边鸡场。

三、试验方法

1.中药提取液制备（水提醇沉法）。按参考方法提取黄柏、黄连、秦皮、穿心莲、白头翁5种中药的水提物。

2.中药抑菌试验。按参考方法进行黄柏、黄连、秦皮、穿心莲、白头翁五种中药的水提物对禽沙门氏菌菌株分离菌的体外抑菌试验。判定标准：抑菌圈直径≥20mm为极敏，15mm≤抑菌圈直径＜20mm为高敏，10mm≤抑菌圈直径＜15mm为中敏，10mm以下的为低敏。

3.MIC值的测定。按参考方法测定黄柏、黄连、秦皮、穿心莲、白头翁五种中药的水提物对禽沙门氏菌菌株分离菌的MIC值。

四、实验结果

见表1。

五、小结与讨论

1.本实验选择的五种中药材以秦皮抑菌直径最大，表明在体外实验中秦皮提取物抑菌效率要高于其他四种中药；在MIC测定实验中穿心莲和黄连的数值最低，说明这两种中药可在较小浓度下发挥抑菌作用。综合以上实验数据笔者认为可以将黄连、秦皮、穿心莲三种药物进行进一步研究应用于防治禽沙门氏菌病。目前黄连、穿心莲的抗菌研究较多，关于秦皮的抗菌研究较少。秦皮主要有效抗菌成分比较复杂，包括香豆素类化合物，还含有酚类、皂苷、鞣质、生物碱等，杨天鸣等研究了九种秦皮类药用植物的抑菌作用，结果表明秦皮对金黄色葡萄球菌，白色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等致病菌均有不同的抗菌作用。

表1 五种中药提取物对禽沙门氏菌体外抑菌试验结果

2.中药的使用历史悠久，且价格低廉，毒副作用小，是一门具有独特理论体系和丰富内容的一门医学科学，是我国人民多年的经验总结和智慧结晶。利用现代化的提取方式，越来越多的中药药效被进一步揭示。在传统方剂的基础上，根据中医药理论重新组方是目前中医药研究创新的热点。动物与人相比有适口性的要求，像抗菌性能较好的黄连由于强烈的苦味，在实际诊疗中往往限制使用，用其他药物代替。本实验结果中黄连、秦皮、穿心莲如何组方、改善苦味、提高药效将是下一步要解决的重点问题。

3.提取工艺对有效成分的影响。不同中药对禽沙门氏菌的抑制作用不同, 而将中药有效抑菌成分更多地提取出来并发挥它的药效至关重要。本实验采用水提醇沉法（水醇法）代替传统的水煎法可以利用植物药材中大多数成分如生物碱盐、甙类、有机酸类、氨基酸、多糖等易溶于水和醇的特性，先用水提出，并将其提取液浓缩，加入适当的乙醇或水反复数次沉降，除去其不溶物质，最后得到澄明液体。此提取方式为下一步纯化有效成分，生产注射剂型中药方剂奠定基础。本试验对临床应用中草药防治禽类沙门氏菌病及筛选效果良好的抑菌中草药有一定指导意义，但由于中草药成分复杂，其有效成分及抗菌机制还有待进一步研究。