实验性高脂血症大鼠模型的建立和评价

王 俊,孙雅利,房燕娜,陶梦君,袁 慧

(皖南医学院 公共卫生学院，安徽 芜湖 241002)

高脂血症通常是指血脂水平过高，可直接引起一些严重危害人体健康的疾病，是一种常见的心血管疾病[1]。大量流行病学调查和临床研究显示高脂血症是高血压、糖尿病、动脉粥样硬化、冠心病等多种疾病的危险因素[2]。目前我国成人高脂血症患病率为18.6%[3]，且发病率呈逐年上升的趋势，其病因学、预防和治疗已成为目前的研究热点。由于目前高脂血症的发病机制尚未完全阐明，需要采用高脂血症动物模型以进一步深入研究其病理生理机制，故建立更合理而实用的高脂动物模型尤为重要[4]。国际上目前大多采用大鼠建立高脂血症动物模型，其主要分为：高脂乳剂灌胃法、高脂饲料法、静脉注射法。其中高脂乳剂灌胃法较为常用，优点在于实验操作简单，实验过程中不需要对大鼠进行额外干预，动物无呕吐反应，死亡率低，且能够精确确定动物食用量。已有研究者通过高脂乳剂灌胃成功建立高脂血症模型[5-6]。本研究采用自制高脂乳剂通过灌胃法制作大鼠高脂血症的模型，并对其有效性和可行性进行评价，为国内研究高脂动物模型提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选用健康雌性Wistar大鼠20只，8周龄，平均体质量(200±20)g，由皖南医学院机能实验中心提供，实验中动物处置符合皖南医学院实验动物伦理委员会要求。

1.2 实验材料 电子天平、分析天平、皮尺、基础饲料(长沙市天勤生物技术有限公司)、高脂乳剂(自制)。

1.3 实验方法 采用基础饲料适应性喂养1周后，将大鼠随机分为两组，每组10只，分别标记为空白对照组和高脂乳剂实验组。空白对照组：给予普通饲料喂养。高脂乳剂实验组：给予高脂乳剂灌胃，1 mL/100(g·d)，每日给药1次。

1.4 高脂乳剂配方 油(玉米)400 g，糖150 g，奶粉80 g，胆固醇100 g，胆酸钠10 g，吐温80 36.4 g，丙二醇31.1 g，维生素2.5 g，食盐10 g，蒸馏水300 mL混匀。

2 结果

2.1 大鼠体质量的变化 实验组和对照组大鼠在观察期体质量的增长差异有统计学意义(F=12.28，P=0.001)。进一步两两比较，结果显示在第7周和第8周实验组大鼠体质量高于对照组(P<0.05)，具体结果见表1。两组大鼠在第一周体质量均有所下降，随后体质量增加，大鼠平均体质量随时间变化情况见图1。

图1 两组大鼠体质量变化图

1周2周3周4周5周6周7周8周实验组237.40±17.33231.30±19.97248.50±14.10255.13±16.01258.00±15.06263.14±6.97285.83±11.69*285.67±7.50*对照组253.20±20.02238.00±7.94244.50±3.03259.40±15.61260.30±13.72266.70±15.09268.10±10.68261.20±14.35

注：与对照组比较，*P<0.05。

2.2 大鼠体长的变化 大鼠体长定义为大鼠鼻尖到肛门的距离。实验组和对照组的大鼠体长在观察期间差异具有统计学意义(F=51.53，P<0.001)，进一步两两比较显示第5周对照组和实验组大鼠体长差异具有统计学意义(P<0.05)，如表2。两组大鼠的体长在第1周均有所下降，随后体长增加。

采用重复测量方差分析，尽管两组的Lee′s 指数随时间呈下降趋势，实验组的Lee′s 指数仍高于对照组，差异有统计学意义(F=7.55，P=0.005)。不同时点两组比较的结果显示，第5周的Lee′s指数差异具有统计学意义(P<0.05)，如表3所示。Lee′s指数随时间变化情况见图2。

1周2周3周4周5周6周7周8周实验组20.13±0.3619.68±0.5520.65±1.2820.59±0.5621.16±0.10*21.12±0.6021.76±0.6622.02±0.62对照组20.29±0.8919.28±0.7620.06±0.5020.30±0.8720.51±0.4720.80±0.4721.53±0.5222.30±0.62

注：与对照组比较，*P<0.05。

表3 实验组和对照组Lee′s 指数的变化

1周2周3周4周5周6周7周8周实验组305.52±15.08318.41±10.25313.50±11.53312.87±16.15310.45±11.43*308.16±6.01306.10±10.41295.54±9.90对照组314.17±10.78315.10±10.25303.93±20.17309.899±12.12301.66±5.13304.84±9.06296.50±8.89290.35±7.16

注：与对照组比较，*P<0.05。

图2 两组大鼠Lee′s指数变化图

3 讨论

目前高脂血症的乳剂灌胃法以油、胆固醇、胆酸钠等为原料，加入适量的乳化剂制成脂肪乳剂。通过模拟人类的高脂饮食，使模型体内相关生化指标迅速上升，具有操作简单、造模时间短、死亡率低等特点[7],被广泛应用于降脂药物的体内筛选。

近年来研究发现，高脂饮食可引起高脂血症，并进一下发展为高血压、糖尿病、动脉粥样硬化、冠心病等多种疾病[7]。在实验过程中，对于大鼠高脂血症模型的评价方法一般可分为一般观察性指标和各种生化指标[8]。其中一般观察性指标主要包括身长、体质量和Lee′s指数等。Bunyan等[9]的研究显示Lee′s指数是一种能够很好反映成年大鼠肥胖程度的有效指数，何明等[10]的研究显示该指数和多种血液相关指标具有高度的相关性。

本实验采用乳化剂灌胃方式，建立Wistar大鼠高脂血症的模型。实验结果表明，大鼠的体质量和体长总体趋势随着时间的增加而增加，且实验组明显高于对照组。尽管随着时间的延长，大鼠的Lee′s指数有下降趋势，实验组仍明显高于对照组。结果表明采用这种单纯高脂乳剂配方可以建立较为理想的肥胖大鼠模型。在第1周，两组大鼠体长和体质量均出现不同程度下降，这可能与大鼠在灌胃过程中出现的适应性应激反应有关，灌胃一周后大鼠逐渐适应，出现了体质量增长趋势。在分析大鼠Lee′s指数的变化时，并未出现像大鼠的身长和体质量一样一直增加的情况，这可能与使用该乳化剂灌胃喂养时间较短有关[11]，因为在观察期的最后两周实验组的体质量增长才较为明显。在后续研究中，我们将进一步进行肥胖大鼠的血液学和内脏相关指标的检测来评价模型的效果。

综上所述，采用该乳化剂灌胃可较好地促进大鼠体质量增长，能建立较为理想的高脂血症大鼠模型，但是单纯高脂配方要求喂养时间相对较长。