梅毒检验中酶联免疫吸附法与甲苯胺红不加热血清法的比较

姚映生

（汕头市中心医院检验科 广东汕头 515031）

1 前言

近几年来，梅毒感染性检出率明显上升[1]，成为社会共同关注的公共卫生问题。梅毒是由苍白螺旋体引起的一种性传播疾病[2]，一般使用酶联免疫吸附法检测，虽然其灵敏度较高，特异性较好，且操作方便，但有假阳性高的不足，临床筛查中存在一部分缺陷。随着医疗水平的逐渐提升，临床上应用了检测准确性更高的梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验，缺点是试剂盒价格昂贵，所以难以作为常规的梅毒筛查方法广泛应用。对于梅毒感染能否进行快速而精准的诊断，是当前亟待解决的首要问题。通过梅毒筛查的200 例患者临床资料，比较甲苯胺红不加热血清试验与酶联免疫吸附法检测在梅毒检验中的临床应用价值。

2 资料与方法

2.1 一般资料

收集2018年3月—2019年5月接收的梅毒感染患者资料200 例，随机均分为实验组和对照组。实验研究组男性患者56 例，女性患者44 例，年龄范围 30～61 岁，平均年龄（44.73±11.67）岁；对照组男性患者 57 例，女性患者 43 例，年龄范围 29～61 岁，平均年龄（45.26±10.78）岁。两组患者在一般资料上无统计学意义（P＞0.05），有可比性。

2.2 方法

2.2.1 检测仪器

洗板机、全自动酶联免疫分析仪、微量加样器等。

2.2.2 试剂盒

深圳宝安康生物有限公司生产的甲苯胺红不加热血清试验试剂盒、上海科华生物工程股份有限公司生产的酶联免疫吸附试剂盒，均在有效期内。

2.2.3 检测方法

抽取梅毒感染者的静脉血5 mL，放置5 min 后，分离血清并进行检测，分别采用甲苯胺红不加热血清法与酶联免疫吸附法进行梅毒检测，检测方法均为常规操作，操作按照试剂盒中的说明书进行。

甲苯胺红不加热血清法:（1）加样：加入 50 μL 待测标本于预包被板条孔，分别设置空白对照、阳性和阴性，于 37℃中温育 1 h；（2）加酶:加入酶标物 50 μL于 3 组中，摇匀后于 37℃中放置 0.5 h；（3）显色：置入50 μL 底物缓冲液于各孔中，摇匀后于37℃中温育0.5 h，并于隔孔内加入50 μL 终止液，在全自动酶联免疫分析仪上读出数据并记录。

酶联免疫吸附法:（1）加样：于卡片圈中均匀加入 50 μL 血清；（2）加抗原：于孔内均匀加入 1 滴抗原液体；（3）反应：在立体脱色摇床中以 100 r/min 震荡8 min，在亮光下观察其结果。

2.3 统计学方法

两组梅毒感染患者的观察指标将采用SPSS16.0系统软件统计分析。敏感性、特异性及阳性预测值为计数资料，用（n，%）表示；用 χ2检验，P＜0.05 表示差异有统计学意义。

3 结果

甲苯胺红不加热血清法与酶联免疫吸附法梅毒抗体检测结果比较结果表明，酶联免疫吸附法检测结果的敏感性、特异性及阳性预测值均高于甲苯胺红不加热血清法，差异有统计学意义(P＜0.05)，具体内容详见表1。

表1 两组检测方法的敏感性、特异性及阳性预测值的比较

4 讨论

据研究数据显示[3]，近年来，梅毒感染率始终呈上升态势，且上升速度也逐年增长，其中也包括地区献血人群的梅毒检出率。梅毒感染的病原体是梅毒螺旋体，梅毒螺旋体侵袭机体后会产生一种非特异性抗体，此非特异性抗体临床上检出难度较高，通常在梅毒晚期可以检出，有时会出现阴性结果，造成漏诊的现象。至今临床检查中将特异性抗体作为感染梅毒的主要依据，就是由于梅毒螺旋体的特异性抗体出现时间早而消失较晚。截止到目前，临床上主要的梅毒检测方法是甲苯胺红不加热血清法与酶联免疫吸附法[4]，甲苯胺红不加热血清法操作起来方便快捷，检查费用低，但易受主观因素影响；酶联免疫吸附方法是对血清中的特异性抗体进行一系列检测，决定结果的数据来自全自动酶联免疫分析仪，能最大幅度降低主观性判断的误差，检出率相对精确。

综上可知，酶联免疫吸附法的筛查精准度高于甲苯胺红不加热血清法，临床应用价值更高。使用酶联免疫吸附法来检测梅毒感染患者[5]，可以将血清中梅毒抗体免疫球蛋白一并检测。先使用甲苯胺红不加热血清法作为初筛，再采用准确度高的酶联免疫吸附方法作进一步检查，可有效提高梅毒阳性检出率，同时能检测出梅毒抗体是否呈阳性，有效预防筛查过程中的误诊漏诊，充分发挥梅毒检测的意义，提高梅毒的检出率，值得作进一步临床推广。