30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析

2019-07-27陆东亮卜德红苑志军

安徽化工 2019年3期

陆东亮，卜德红，苑志军

（1.上海杜邦农化有限公司，上海200137；2.上海生农生化制品股份有限公司，上海201619）

吡丙醚又称蚊蝇醚，是苯醚类昆虫生长调节剂，属保幼激素类的新型杀虫剂，具有内吸转移活性、低毒、对生态环境影响小和持效期长等特点，对苍蝇、蚊虫等卫生害虫具有很好的防治效果，同时对烟粉虱、介壳虫、小菜蛾、木虱、蓟马等也有良好的防治效果，能够有效抑制幼虫化蛹和羽化。虫螨腈是新型吡咯类杀虫剂，作用于昆虫体内细胞的线粒体，在昆虫体内多功能氧化酶的作用下转变为杀虫活性化合物，通过抑制二磷酸腺苷向三磷酸腺苷的转化，使细胞合成因缺少能量而停止生命活动，该药具有胃毒和触杀作用、杀虫广谱、与其他杀虫剂无交互抗性等特点[1-2]。但有关吡丙醚·虫螨腈悬浮剂的高效液相色谱分析方法，目前尚未见到公开报道。

该实验建立使用的是Kromasil C18柱和紫外可变波长检测器，以乙腈-水为流动相的液相色谱分析方法，用外标法对有效成分进行定量分析。该方法同时适用于吡丙醚和虫螨腈原药及制剂的分析，具有简便、快速、准确、分离效果好的特点，用于产品质量的检测分析。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilengt 1260高效液相色谱仪，具有紫外检测器和自动进样器；Agilengt色谱工作站；色谱柱：Kromasil C18 250 mm×4.6 mm（id）不锈钢柱；紫外分光光度计；乙腈：色谱纯；水：二次蒸馏水；吡丙醚、虫螨腈标准品：已知质量分数；30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂（上海生农生化制品股份有限公司）。

1.2 色谱条件

流量：1.5 mL/min；柱温：25℃；检测波长：254 nm；进样体积：5 μL；流动相：乙腈 + 水 =65+35（V/V）；保留时间：虫螨腈约12.4 min，吡丙醚约14.6 min。

上述参数可根据仪器特点进行适当调整，以期获得最佳效果，典型液相色谱分离图见图1。

图1 30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂液相色谱图

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

准确称量吡丙醚和虫螨腈标样各约0.05 g（精确至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容后备用。

1.3.2 试样溶液的配制

准确称量试样约0.33 g（精确至0.000 2 g）于100 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，用0.45 μm过滤膜过滤后备用。

1.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针吡丙醚和虫螨腈的相对响应值变化小于1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进样测定。

1.3.4 计算

将测得的两针试样溶液以及试样溶液前后两针标样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积分别进行平均。吡丙醚（虫螨腈）质量分数X（%）按下式计算：

式中：A1—标样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积的平均值；A2—试样溶液中吡丙醚（虫螨腈）峰面积的平均值；m1—吡丙醚（虫螨腈）标样的质量，g；m2—试样的质量，g；P—吡丙醚（虫螨腈）标样的质量分数，%。

两次平行测定结果之差应不大于0.3%，取其算数平均值作为测定结果。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件选择

2.1.1 检测波长的选择

对吡丙醚和虫螨腈标样溶液分别用紫外分光光度计进行全波长扫描，得到相应的吸收波长与吸光度的紫外吸收光谱图。当选用254 nm作为检测波长时，两者均具有较强的吸收峰，同时杂质干扰小，流动相无吸收。因此，为兼顾两者，将检测波长定为254 nm[3-5]。

2.1.2 流动相的选择

根据吡丙醚和虫螨腈的特点，以不同比例的甲醇-水和乙腈-水作为流动相进行分离检测，结果发现，在乙腈-水体积比为65∶35（V/V）时，分离效果好，峰型对称，基线平稳[6-7]。

2.2 线性相关性测定

分别称取99.5%吡丙醚标样0.134 2 g和98.0%虫螨腈标样0.255 8 g于500 mL容量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度。准确吸取 5 mL、10 mL、15 mL、20 mL、25 mL于5只100 mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀后进样分析。以标样浓度为横坐标，峰面积值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：吡丙醚Y=2.2298X+2.9000，相关系数r=1.0；虫螨腈Y=5.233 2X+4.418 7，相关系数r=1.0，数据见表1。

表1 20%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂线性测定

2.3 方法精密度测定

对同一30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂按上述色谱操作条件下重复测定6次，吡丙醚、虫螨腈含量平均值分别为10.26%和20.22%，标准偏差吡丙醚、虫螨腈分别为0.013%和0.019%，变异系数吡丙醚、虫螨腈分别为0.130%和0.094%，结果见表2。

表2 20%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂精密度测定

2.4 方法准确度测定

采用标准加入法，在已知含量的30%吡丙醚·虫螨腈悬浮剂中加入一定量的吡丙醚和虫螨腈标准品，按上述色谱条件分析测定，计算回收率，结果如表3。吡丙醚添加回收率在99.33%～100.63%之间，平均回收率为99.78%；虫螨腈添加回收率在99.16%～99.95%之间，平均回收率为99.43%。由表3可知该法准确度较高，可准确测量。