普通胰岛素注射液与维生素C注射液配伍的稳定性考察

章 瑾 王青青 蔡鑫君 周 峰

胰岛素是机体内唯一能降低血糖的激素，也是唯一能促进糖、蛋白质、脂肪合成和贮存的激素[1]，它能很好地控制餐后血糖；与葡萄糖注射液混合，可有效抵消葡萄糖载体溶液带来的血糖波动。维生素C作为一种抗氧化剂参与体内多种代谢过程，帮助胆固醇的转化，可减少毛细血管的脆性，增加机体免疫力，同时也是许多酶的辅因子，在胶原、神经递质和许多神经肽的合成中发挥重要作用，因此，在伤口愈合、能量代谢和神经系统中具有重要功能[2-3]。也有学者提出，维生素C可促进免疫细胞产生细胞因子IL-6和IL-8减少炎症，并且具有直接的抗病毒效应及抗癌作用[4-5]。维生素C注射液作为辅助用药应用广泛，对于一些不能用生理盐水作为输液溶媒的糖尿病患者，比如合并严重高血压或其他心血管疾病时，只能将维生素C混合到葡萄糖溶液中输注。维生素C是一种多羟基化合物，结构类似于葡萄糖，其分子中第2、3位上两个相邻的烯醇式羟基，极易解离释放出H+，故具有酸性。维生素C具有强还原性，易被可逆氧化成脱氢维生素C。脱氢维生素C若继续氧化，则生成不可逆转的二酮古乐糖酸，完全失去生理活性。而胰岛素是由A、B两个肽链共51个氨基酸组成的2双链，两条肽链之间由两个二硫键连接，具有蛋白质两性，溶液不稳定，易发生脱氨、分解和交链反应。胰岛素在维生素C存在的情况下可能会降解失效，本次研究将对不同胰岛素浓度下的混合溶液进行理化性质的分析比对，为临床合理有效用药提供参考依据。

1 实验材料

1.1 药品与试剂 磷酸二氢钠（分析纯）；乙腈（分析纯）；胰岛素标准品（27IU/mg，中国药品生物制品检定所）；普通胰岛素注射液（江苏万邦生化医药集团有限责任公司，批号21712204）；维生素C注射液（上海信谊金朱药业有限公司，批号1730205）；5%葡萄糖注射液500mL（杭州民生药业有限公司，批号 A1712202）。

1.2 仪 器 Agilent1260高效液相色谱仪（Agilent Technologies，USA）；FE28-Standard 台式 pH 计 [梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]；BT25S型电子天平[赛多利斯科学仪器（北京）有限公司]；SHZ-D（Ⅲ）循环水式多用真空泵（河南省予华仪器有限公司）。

2 方法

2.1 供试液配置 在静脉用药调配中心（PIVAS）万级洁净度环境、百级洁净度生物安全柜中，由药学人员按照无菌操作技术规程进行配置。

2.1.1 对照组供试液 分别精密量取普通胰岛素注射液2、4、6、8IU加入到500mL5%葡萄糖注射液中，得供试液A～D。

2.1.2 实验组供试液 分别精密量取普通胰岛素注射液2、4、6、8IU加入到500mL5%葡萄糖注射液中，再分别加入2g维生素C注射液，得供试液E～H。供试液组成见表1。

2.2 外观、pH值检查 在室温（25℃）下，观察并记录配置后4h 内各供试液的外观是否有变化，并于 0、0.5、1、2、4、6h 时使用pH计分别测定其pH值（各供试液重复测定3次）

2.3 胰岛素含量测定

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Aglient Extend C18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：0.1mol/L 磷酸二氢钠：乙腈（75:25）；柱温：40℃；流速：1.0mL/min；检测波长：214nm；进样量：20μL。

表1 供试液组成

2.3.2 标准品溶液配制 精密称取胰岛素标准品1mg（27IU）用流动相定容至50mL，置冰箱保存。

2.3.3 标准曲线制备 分别精密量取标准品溶液0.5、1.0、2.0、3.0、6.0和8.0mL，用流动相定容至 100mL，分别进样20μL，以胰岛素峰面积（A）对胰岛素浓度（C）作线性回归，得方程：A=3681.9C+3.0836，r=0.9997，说明胰岛素在浓度0.0027IU/mL～0.0432IU/mL范围内具有良好的线性关系。

2.3.4 精密度和重现性 在“2.3.1”项色谱条件下，精密量取标准品溶液1mL（0.54IU），用流动相定容至50mL，重复进样6次，记录峰面积，测得相对标准差（RSD）值为1.56%，说明该方法精密度良好。

精密量取普通胰岛素注射液1mL（4IU），用流动相定容至100mL，连续进样6次，记录峰面积，测得RSD值为1.58%，说明该方法重现性良好。

3 结果

3.1 外观检查结果 在室温（25℃）下，6h内各供试液外观均澄清透明，且无颜色变化，无沉淀或气体产生，无结晶析出。

3.2 pH值检查结果 配置6h内，各供试液pH值检查结果见表 2。A、B、E供试液在 4h内pH值变化不大（RSD＜2%，n=5）；其他各供试液在4h内的pH值变化均较大（RSD＞2%，n=5）；各供试液在6h内的pH值变化均较大（RSD＞2%，n=6）；配伍溶液E、F、G、H的pH值较配伍前均明显升高。

表2 各供试液pH值检查结果

3.3 配伍液胰岛素含量变化 在室温（25℃）下，6h内各供试液的胰岛素含量与新鲜配置的输液中胰岛素含量比值均＞90%；配伍溶液中的胰岛素含量与配伍前溶液中的胰岛素含量比值也均＞90%。结果表明，在500mL5%葡萄糖溶剂中，2IU～8IU胰岛素与2g维生素C配伍后含量未明显下降。见表3。

表3 各供试液的胰岛素峰面积及配伍后胰岛素含量下降情况

4 讨论

由于维生素C稳定性较差，配置后无法长期保存，但是临床药师查房发现常有上午配置的输液到下午还未完全用到病人身上。因此，本研究考察了普通胰岛素与维生素C的葡萄糖配伍溶液在6h内的外观、pH值和胰岛素的含量等稳定性指标。通过临床调研，发现胰岛素浓度小于0.016IU/mL，维生素C的常用剂量为2g。

本研究结果显示，在室温6h内，各配伍液的外观均无明显改变。pH值检查结果显示，6h内配伍液的pH值均有不同程度升高，特别是在最后2h，升高明显；配伍液与配伍前的胰岛素溶液相比，pH值明显升高，这可能与维生素C的pH值有关。维生素C的烯二醇式结构在酸性条件下易生成2，3-二酮古洛糖酸，再氧化水解生成苏阿糖酸和草酸，所以引起pH值升高。6h内，输液中的维生素C是否已氧化水解失效还需进一步对维生素C作定量分析。

胰岛素的定量分析结果显示，配伍后的输液胰岛素含量未明显下降，均为配伍前溶液的90%以上。单从含量变化分析，胰岛素含量未明显减少，结果提示，6h内0.016IU/mL及以下浓度的胰岛素与0.004g/mL维生素C的5%葡萄糖配伍溶液稳定性良好。