山东省沂水县羊群布鲁菌病基线调查

李 清,杨明清,秦 燕,兰邹然,陆 峰,党安坤

(1.山东省临沂市畜牧兽医检测中心,山东 临沂 276000;2.山东省沂水县畜牧局,山东 沂水 276400;3.山东省动物疫病预防与控制中心,山东 济南 250022)

布鲁菌病(以下简称布病)是由布鲁菌感染动物和人,造成生殖系统损害为主、可能伴随骨胳和多器官损坏的一种人兽共患传染病。该病可以动物中以牛羊感染常见,猪、犬等多种动物均可感染,以羊种布鲁菌对人造成的感染最为严重[1],布病的流行不仅会对养殖业造成巨大损失,而且具有非常重要的公共卫生意义。沂水县位于山东省中东部,山东半岛泰沂山脉与胶潍平原交界处,地势南高北低,自南而东为起伏较大的山岭地带,间有若干谷状盆地,西部、中部及北部,系大片波状平原,属胶莱冲积平原南部的潍河平原,其边缘有低缓山丘分布,气候适宜,是山东省传统的畜牧业养殖、加工大县,畜禽养殖主要以生猪、肉鸡、蛋鸡和特种动物为主。近几年来,随着市场经济的发展,羊的养殖量较往年有扩大的趋势,但是以小规模养羊户(年出栏500只以下)占比较大,据统计,县里存栏300只以下的小规模养羊户占比约90%。山东省虽然被农业部家畜布病防治区域化管理划为一类地区,但沂水县位于胶东半岛口蹄疫免疫无疫区和高致病性禽流感免疫无疫区中,动物疫病防控政府相对比较重视,防疫基础扎实,对布病防控也投入了大量人力物力和财力,动物布病没有出现大范围流行,呈稳定控制状态。但2010年以来,本县人间布病病例数也有逐年增多趋势,为了解该县羊群布病的流行状况,开展了针对羊布病的基线调查工作。

1 材料与方法

1.1 病例定义 参照李焕明的病例定义[2],调整后定义如下：

阳性羊：虎红平板凝集试验初筛阳性,经试管凝集试验复核仍为阳性的血清样品对应的羊只。

阳性群：至少有1只检测为布病阳性羊的养羊场户。

阳性镇(街)：至少检测出1个布病阳性群的镇(街)。

1.2 研究群和抽样单元 研究群：2017年8～9月份,根据山东省《2017年布鲁菌病流行状况基线调查》要求,对全县18个乡镇的1 126个羊养殖场户(一个自然村的所有小规模养羊户存栏为一个场群)开展了羊布病基线调查。

抽样单元：场户层面,抽样单元为每个养羊场户;场户内个体层面,抽样单元为所有6月龄以上的羊只。

1.3 抽样方案设计 参照徐秀荣等[3]的方法进行调整后开展本次羊场布病基线调查,根据沂水县各镇(街)羊的存栏情况采用两阶段抽样方法。其中有3个奶山羊场全部作为抽样场,且场内所有羊全部采样普查。

第一阶段：在全县1 126个养羊场户内随机抽取需调查的羊场群。

第一步,计算全县需抽样的养羊场户数。用估计流行率的方法[4]抽取,全县有1 126个场群,按95%置信水平,50%的预期流行率,7%的可接受误差,计算公式为计算出抽样场群为166个。

第二步,计算每个镇街的抽样场数,按配额方法进行,即根据每个镇街场群数占全县场群数的比例(各镇街场数占比=场数/1126),分配这166个场群,“配额场数=166×各镇街场数占比”。

第三步配额取整。

第四步从每个镇街中选取要抽样的场。根据每个乡镇的养羊场户列表,用系统随机抽样方法选取每个乡镇要抽样的养羊场户。

第二阶段：对第一阶段选定的18个乡镇的166个养羊场户进行样本量计算和随机抽取。

第一步,选定场群后,如果发现有些场群羊只已经出售,或者不符合抽样要求,可以适当进行场的调整,采用就近选择类似的场群即可。同样采用估计流行率的方法抽取,按照95%的置信水平、50%的预期流行率、10%的可接受绝对误差计算选定的18个乡镇166个场户中每个场户的抽样羊数。

第二步,场内随机选羊,按系统随机方法抽样。

1.4 检测方法 对采集血液,凝固完全后离心分离血清,用虎红平板凝集试验进行初筛,初筛阳性的样品再用试管凝集试验进行复核,复核为阳性的判定为布病抗体阳性。本次调查虎红平板凝集试验和试管凝集试验的敏感性和特异性参照文献[2]定为虎红平板凝集试验的敏感性、特异性分别为95%、80%,试管凝集试验的敏感性、特异性分别为85%、90%,垂直联合试验的敏感性、特异性分别为81%和98%。

1.5 数据分析 血清流行率的计算：根据实验室检测结果,获知该地区羊布病的个体表观流行率和场群表观流行率,利用公式TP=(AP+Sp-1)/(Se+Sp-1)计算出真实流行率。可以通过以下公式计算真实流行率的95%置信区间(CI)：

其中p为真实流行率,Z标准正态分布中概率0.05对应的统计量,n为抽样数量。

2 结果

2.1 3 养羊场基本情况 根据调查统计结果,该县目前有养羊场户1 126户,存栏羊163 083只,100～299只的养羊场户最多,总共有446个,存栏羊78 388只,总体而言,该县羊养殖以小规模散养为主,小规模养羊户仍然以传统的半放牧为主,集约化养殖比例较低,存栏数500以上的规模养殖场只有35个,占比3.11%(见表1)。

表1 沂水县不同规模养羊场户数及存栏数

2.2 3个奶山羊普查结果 3个奶山羊场有1个检出布病阳性,场表观流行率达到33.3%(1/3)(95%CI：0.5% ～2.0%),检测到的阳性场B场,个体表观流行率为 0.43%(2/460)(95%CI：0.5% ～2.0%)(见表2)。

表2 2017年沂水县羊3个奶山羊场布病血清学调查结果统计

2.3 羊群布病个体流行率 对全县18个乡镇1 126个羊场群中的166个养羊场户(包含3个奶山羊场)抽取样本8 988份血样(包括3个奶山羊场1 290份血样)。经实验室检测,共检出6份布病血清学阳性,个体表观流行率为0.7%(6/8 988)(95%CI：0.0% ～0.1%),计算得到的真实流行率为0.06(95%CI：0.0% ～0.1%)。 检测到的3个阳性乡镇,编号为13的乡镇表观阳性率最高,为0.94(3/320)(95%CI：0.2% ～2.7%)(见表3)。

2.4 羊群布病群体流行率 这18个乡镇1 126个羊场群中的166个养羊场户(包含3个奶山羊场)检出5个养羊场户(包括1个阳性奶山羊场),养羊场户表观群体阳性率为3.01%(5/166)(95%CI：1.0%～6.9%),计算得到的真实流行率为3.79%(95%CI：0.0% ～6.2%);编号为1、2 和 13 的阳性乡镇布病表观群体流行率分别为33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～ 90.6%)、9.09%(1/11)(95%CI：0.2% ～ 41.3%) 和 27.27%(3/11)(95%CI：6.0%～61.0%),计算得到的真实流行率分别为42.17%(95%CI：0.0% ～ 100%)、11.48%(95%CI：0.0% ～ 49.8%)和 34.50%(95%CI：5.1% ～74.7%)(见表4)。

3 讨论与结论

3.1 调查结论 本调查首次对沂水县羊群布病开展基线调查,从调查结果来看,从116个抽取的养羊场户中检出5个阳性场户,布病群体表观流行率为3.01%(5/166)(95%CI：1.0% ～6.9%),虽然不算很高,但也需引起管理层的关注,应认真分析造成养羊场户布病阳性的原因,以防布病进一步在羊群中流行和暴发,进一步加强对职业人群关于布病 危害和个人防护方面知识和技能的宣传和教育,防止职业人群感染布病,与此同时,应加强布病阳性动物的及时处置和阳性羊场户的监督管理,有效防止布病扩散传播,并防止动物布病感染人类。鉴于目前该县羊群布病流行率较低,建议该县羊群不采取布病免疫的方式控制该病,可采用直接开展监测净化的方式控制布病,该县兽医主管部门可尽早出台羊布病净化的日程表,在全县开展羊布病净化,同时做好检疫监督工作,严防外来的布病阳性动物进入。

表3 2017年沂水县羊场群布病血清学调查结果统计 (包括表1的3个奶山羊场)

表4 沂水县羊布病群流行率统计

3.2 引导养羊朝集约化养殖转变 从调查统计情况看,该县养羊业仍以传统散养为主,养殖方式落后,养殖水平总体较低,规模化养羊场占比不到10%,这种养羊方式对于羊病的预防和控制都带来了一定难度,尤其做为接触传播的传染病,如果存在大量的放养羊只,那么共同牧场一旦污染布鲁菌,由于布鲁菌外界环境中抵抗力强,在衣服、皮、毛上可存活达5个月,在牧草中可存活2～3个月[5],就很容易引起放牧羊只感染,造成布病疫情扩散。因此,政府部门应积极引入羊养殖方式的转变,朝着规模化和集约化方向努力。

3.3 布病阳性原因分析 本次调查的布病阳性中有1个场为奶山羊场,该场羊全部从山西省购入,山西省为动物布病一类地区,在购入羊群的同时,引入布病的风险也比较大,而老百姓在购入羊只时并没有开展布病检测,因此,该场羊布病检出阳性与购入动物存在一定逻辑关系,山东省今年羊布病调查中也有类似的结论[2,6]。除了这个奶山羊场布病检测阳性以外,还有4个小养羊户检出布病阳性,其中有3个小养羊户都属一个自然村,这几个养羊户布病阳性的原因根据调查结果无法确定,当地动物疫控部门怀疑为配种和放牧过程中的感染,但是对配种的公羊进行了布病跟踪检测,未检出布病阳性。

3.4 奶山羊的布病应更加关注 近年来由于羊奶价格较高,奶山羊养殖受到一定程度的追捧,出现了不少新投入的奶山羊场,有些奶山羊场还是重点扶贫项目。本次调查对该县所有3个奶山羊场开展了普查,在其中1个场检出了2例布病阳性,从场群流行率来看似乎不低,表观场群流行率达到了33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～90.6%),由于样本量少,还不能据此将奶山羊场的流行率定性为高流行率,但是由于奶山羊是对社会提供羊奶的,如果奶山羊携带布鲁菌,那么这种羊提供的羊奶无疑会给布病传播带来可怕的后果,如果因喝羊奶造成大量人群感染布病,那么甚至会引起社会恐慌。因此,对于有奶山羊的县区在做了牛羊布病防控的同时,应更关注奶山羊场的布病检测,一旦奶山羊检出布病阳性,对阳性动物和羊奶应及时处置,有效防止布病扩散传播或感染人类。