复合中药凝胶剂的制备

何 敏,赵存真,李建柱,赵云焕,吴海港,陈 敏

(1.信阳农林学院牧医工程学院信阳市兽药新制剂研究与创制工程技术中心,河南 信阳 464000;2.信阳农林学院牧医工程学院河南省大别山区生态畜禽健康生产工程研究中心,河南 信阳 464000)

天葵子味甘、苦,性寒[1]。具有清热解毒,消肿散结之功效。常用于治疗乳痈、蛇虫咬伤等。有试验表明,天葵子提取物对细菌和真菌具有抑制作用[2]。蒲公英、苦参、白鲜皮具有清热解毒和消肿消炎的功效,常制作成外用制剂用于治疗皮肤疾病。因此将天葵子与这几种中药制作成复方制剂使用,可能会增强单一药物治疗皮肤疾病的作用。目前在临床应用中未见有报道将天葵子制成外用制剂使用。治疗皮肤炎症常用的外用制剂有软膏剂、喷剂等[3]。根据使用的情况来看,软膏剂容易产生涂布不均匀且容易摩擦掉等缺点,使用效果不好;喷剂则因为流动性太大容易挥发,而凝胶剂很大程度上克服了以上两种剂型的缺点。

凝胶剂作为一种新型的外用制剂[4],具有质地细腻、不易流动、易于涂布等优点,并且凝胶剂的制备工艺条件较为简单,适合中药复方制剂的生产现状,便于推广应用。因此,为优选复方天葵子的配方、考查其药效,本试验采用正交试验设计,以复合中药凝胶剂的外观性状,黏稠度,涂展性和稳定性等指标考察中药、卡波姆-940、甘油、氮酮的用量,选择复合天葵子凝胶剂的最佳配比,并对本试验所选出的最佳复合天葵子凝胶剂进行初步药效学探究,以期为应用于动物皮肤疾病的临床治疗和预防提供参考。

1 材料

1.1 主要仪器 离心机(型号：TGL-16G,沈阳理化仪器厂);电子恒温水浴锅(型号：YCX-4,金坛市城西峥嵘试验仪器厂);电子天平(型号：FA2004,上海蒲春计量仪器有限公司);冰箱(型号：BCD-555KWM,合肥美的荣事达电冰箱有限公司);电热套(型号：DZTW,北京市永光明医疗仪器厂)。

1.2 试验药品 天葵子、蒲公英、苦参、白鲜皮,购自信阳张仲景大药房。甘油、卡波姆-940(CP-940)、羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、氮酮、三乙醇胺,购自中国天津巴斯夫化工有限公司。

1.3 实验动物 家兔5月龄,体重2.0±0.5kg,由信阳职业技术学院实验动物中心提供。

2 方法

2.1 凝胶剂的制备

2.1.1 中药有效成分的提取(水提法) 用电子秤称量天葵子50 g、蒲公英30 g、苦参20 g、白鲜皮20 g。用粉碎机粉碎药材,在600 mL蒸馏水中浸泡30 min。煮沸后沸腾30 min,倒出药液并过滤。向药渣中添加蒸馏水进行第二煎,方法同第一煎,共3煎。每次600 mL蒸馏水。合并3次所得的滤液并浓缩至120 mL,1∶1(g/mL)浓缩,冷却。放入4℃冰箱保存待用。

2.1.2 基质的选择 初定基质和基础方配比为：基质1%,主药5%,甘油5%,氮酮2%。以凝胶剂的外观性状(颜色、形态、粘稠度、涂展性)、稳定性(55℃、6 h;-20℃、24 h;4 000 r/min离心30 min)为考查指标,对卡波姆-940和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)进行选择。

2.1.3 制备方法 称取处方量的凝胶剂基质均匀撒在适量蒸馏水的表面,静置溶胀24 h。将甘油、氮酮、加入主药中搅拌均匀后,将其加入凝胶剂基质中,混匀。为了避免凝胶剂在处理的过程中过酸或过碱,对皮肤造成刺激,加入适量三乙醇胺调节凝胶剂pH值至7左右,加蒸馏水至足量,搅拌均匀即可。

2.1.4 正交试验设计 根据文献报道,凝胶剂处方中的卡波姆-940用量多在1%。中药主药用量多在5% ～15%,甘油用量多在5% ～15%,氮酮用量多在0.5%～1.5%,并结合预试验确定的各因素水平,制定因素水平表。因素水平见表1。

表1 因素水平

按照2.1.3的凝胶剂的制备方法和表1进行正交试验设计,正交设计见表2,共设计9个处方,分别编号1～9。

表2 正交设计

2.2 质量检测

2.2.1 稳定性检查 按照正交设计确定的凝胶剂配方制备：3份凝胶剂,进行稳定性检查。检查凝胶剂的耐热、耐寒分层现象,判断凝胶剂的稳定性。(1)耐热试验：将制备好的凝胶剂置于55℃水浴锅内恒温放置2 h后取出,恢复室温后观察凝胶有无分层现象及颜色变化;(2)耐寒试验：将凝胶剂置于-20℃冰箱内恒温放置72 h,恢复室温后观察凝胶有无分层现象及颜色变化;(3)离心试验：将凝胶剂置于离心机中,3 000 r/min离心30 min后取出,观察凝胶有无分层现象及颜色变化。

2.2.2 刺激性测定 将制备好的天葵子复合凝胶剂均匀涂抹于家兔耳朵表面以及背部皮肤表面(除毛,所涂位置家兔不能舔到),2 h后观察涂布部位有无发红、肿胀等刺激性。

2.2.3 其他检测 通过观察、涂抹等方法对复方天葵子的外观、黏稠度、延展性等进行检测。

2.2.4 评分标准 为了客观地对试验结果进行评定,优化选定复方天葵子凝胶剂的最佳配比,根据《中华人民共和国兽药典》(2015版)关于凝胶剂的质量要求,参照参考文献[7]制定凝胶制剂质量检测评分标准。评分标准见表3。

2.3 药效学试验 准备5只年龄、体重均相似的家兔,在其背部用钝行器物(同一人同一力度)击打,使其呈现红、肿炎症表现。击打3处,一处用云南白药气雾剂处理作为对照组;一处用天葵子复合凝胶剂涂抹作为试验组;一处用生理盐水处理作为空白组。1 d 2次,观察5 d,并给予治疗药效评分,评分标准为红肿表现,1分;稍微红肿,2分,恢复良好,3分。

表3 检测评分标准

3 结果

3.1 基质的选择 不同基质对凝胶剂的影响见表4。试验结果显示,卡波姆-940均匀细腻,延展性、黏稠度、稳定性好,不分层不变色,更适宜作为复方天葵子的成胶剂,因此本试验采用卡波姆-940为凝胶基质。

表4 凝胶剂基质的选择

3.2 正交试验结果 按照表3评分标准,从外观、延展性、黏稠度、稳定性和刺激性等方面对制备的1-9号中药凝胶剂进行打分评价,评分结果见表5。

由表5的K值和R值结果可见,各因素影响凝胶剂制剂质量大小顺序为卡波姆940＞主药＞氮酮＞甘油,得出最佳配比组合为A2B3C2D3,即1.5%卡波姆940,15%主药,10%甘油,1.5%氮酮。随后按照得出的各因素最佳组合制备凝胶剂,并进行质量检测验证,结果显示,此配方制备的凝胶剂外观细腻均匀,黏稠性及涂展性佳,稳定性好,对动物皮肤无刺激性,评分为22.7,评分最高。

表5 凝胶制剂评分结果

3.3 药效学结果 通过上述试验,选定1.5%卡波姆-940,15%主药,10%甘油,1.5%氮酮的处方为本试验的最佳方案,因此对最佳配比的复方天葵子进行初步药效探究,将所制复方中药凝胶剂涂抹于已经致炎的5只家兔皮肤表面。通过对照试验5 d后观察家兔的恢复情况表明,以天葵子为主药的复合凝胶剂在一定程度上对治疗炎症有效果。药物治疗效果见表6。

表6 药物治疗效果

4 讨论

凝胶剂是一种由药物与适当基质混合而成,具有凝胶特性的半固体或黏稠状液体的制剂[6-7],主要是由成胶剂、保湿剂、透皮促进剂、酸碱调节剂等组成[8]。在试验中甘油作为保湿剂,且刺激性小,适宜用于皮肤制剂。氮酮是国内广泛使用的高效皮肤渗透促进剂[9],为无色或淡黄色、透明、无味、无毒无刺激油状液体,不溶于水,溶于醇、醚、酮、醛、烷、氯仿等大多数有机溶剂,对亲水和亲油药物均有很强的透皮作用,通常加入0.2% ～2%即可将透皮吸收效果成倍增加,从而增强药物疗效和化装品的使用效果,减少主药和营养物的使用,降低成本。

凝胶剂基质类型可分为亲水性凝胶、亲脂性凝胶和乳剂型凝胶。其中,在临床上最为常用的凝胶剂是亲水性凝胶剂。目前常用的亲水性凝胶剂基质有卡波姆-940、羧甲基纤维素钠等。在选择凝胶基质时应主要考虑以下问题,外观是否光滑透明,质地是否均匀细腻,黏度、稠度是否适宜易于涂布,选择一个好的凝胶基质是制作凝胶剂的关键。不同的的基质具有不同的特性,能够制备成不同的凝胶制剂,由此产生不同的临床效果。因此,需要慎重、合理的选择凝胶基质。有资料显示,卡波姆-940稳定性、延展性和涂布效果都很好[10-11],通过试验对比,本试验选用卡波姆-940作为为复方天葵子凝胶剂的基质。

药物制成凝胶剂型,能较长时间与作用部位紧密粘附,制法简单,使用舒适。中药凝胶剂将传统中药制剂的处方和凝胶剂制备技术相结合,在使用上方便,并且易于接受。中药凝胶剂不仅可以容纳中药提取物,也可以容纳中药材极细粉,制备工艺也较为简单,是一种良好的药用剂型,有广泛的发展前景[4]。天葵子入药具有清热解毒、消肿止痛、解毒等功效,临床常用于治疗乳腺炎、扁桃体炎、痈肿等症。研究发现天葵子中含有的

内酯类和氰苷类化合物具有一定抗菌抗炎的药理活性[1],因此,本试验将天葵子与临床常外用治疗皮肤疾病的蒲公英、苦参、白鲜皮制备复方中药凝胶制剂,以卡波姆-940、主药、甘油、氮酮作为正交试验的4个因素,从凝胶剂的外观、延展性、黏稠度、稳定性、刺激性等进行检测,对复方天葵子凝胶剂配方进行优选,并对其药效进行初步探究。结果显示,复方天葵子凝胶剂的最佳配比为1.5%卡波姆-940,15%主药,10%甘油,1.5%氮酮,以天葵子为主药的复合中药凝胶剂在治疗皮肤炎症具有一定效果。