蚯蚓提取物对成华猪生长性能、血清生化指标、抗氧化能力及免疫功能的影响

2019-07-12徐麒麟吴永胜朱佳文许祯莹刘瀚扬陈亚迎雷春龙邱时秀

中国饲料 2019年13期

徐麒麟，吴永胜，朱佳文，许祯莹*，邱钟，刘瀚扬，陈亚迎，雷春龙，邱时秀，李娟

（1.成都市农林科学院畜牧研究所，四川成都 611130；2.邛崃市嘉林生态农场，四川成都 611130）

成华猪是四川省推广数量较多、覆盖地域较广的地方优良猪种，但由于其本身瘦肉率低，生长速度慢，加之外来品种的大规模引进和杂交利用，成华猪的规模逐渐减少，生产性能逐渐下降，优良基因流失严重，成华猪产业发展面临巨大威胁（Shen 等，2016；罗成刚等，2012）。积极开展成华猪保护与开发利用对充分发挥优良地方品种资源优势具有重要意义。

蚯蚓俗称地龙，具有活血化瘀、清热定惊、平喘通络、消炎止痛和抗肿瘤等多种功效，在传统中医上应用广泛（Luo 等，2018；Balamurugan，2007）。蚯蚓蛋白质含量十分丰富，是一种优质的蛋白质饲料，可以作为鱼粉的替代品（邱时秀等，2012；王燕丽和李君荣，2012）。蚯蚓加工后的蚯蚓粉可以明显提高动物的生产性能和免疫功能，增加经济效益（郭瑞萍等，2018；李娟等，2017）。蚯蚓提取物含有丰富的抗氧化酶、氨基酸、生物多糖等活性物质，具有促生长、抗炎、抗氧化、抗病等多种功效（Goodarzi等，2016）。因此，本试验通过在日粮中添加不同浓度的蚯蚓提取物，研究其对成华猪生长性能、血清生化指标、血清抗氧化及免疫功能的影响，为蚯蚓提取物在畜牧生产中的应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料蚯蚓提取物由成都市农林科学院畜牧研究所研制，蚯蚓为人工饲养的赤子爱胜蚓（Eisenia foetida）。经检测分析，所制备的蚯蚓提取物中氨基酸总量（17种）5.42%、游离氨基酸2.97%、超氧化物歧化酶（SOD）1289 IU/mL、小肽6.95%、干物质（DM）13.5%、粗蛋白质（CP）7.35%、粗脂肪（EE）0.41%、粗灰分（Ash）2.14%、钙（Ca）0.47%、磷（P）0.69%。

1.2 试验设计及饲养管理试验于2017年9月至11月在四川省成都邛崃市嘉林生态农场进行。选用胎次、体重[（45±1）kg]相近的 150 日龄成华猪公猪80头，随机分为4组，每组5个重复，每个重复4头猪。采用单因素试验设计，对照组饲喂基础日粮，试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂含 3、6、9 mL/kg蚯蚓提取物的基础日粮。参照NRC（2012）猪的营养需要、猪饲养标准（NY/T 65-2004）及猪场的实际饲喂水平设计日粮配方（表1）。试验猪为全封闭猪舍圈养，自由采食、饮水，其免疫、驱虫、消毒和管理程序按猪场常规管理进行。预试期7 d，正试期70 d。

表1 基础日粮组成及营养水平（干物质基础）

1.3 指标测定

1.3.1 生长性能分别于试验第1天、70天早晨进行个体空腹称重。每天观察猪群生长情况，记录饲料消耗情况。根据记录的采食量和体重计算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.3.2 血样采集及指标测定正试期第70天，每个重复随机选取2头进行前腔静脉空腹采血，室温静置1 h后，3000 r/min离心15 min，分离血清并置于-20℃冰箱保存备用。

血清生化指标：血清总蛋白（TP）、葡糖糖含量（GLU）均采用试剂盒检测，试剂盒分别购自南京建成生物工程研究所和上海荣盛生物药业有限公司。

血清氧化应激指标：乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）均采用猪ELISA试剂盒测定，试剂盒均购自北京奇松生物有限公司。

血清免疫指标：血清补体C3、免疫球蛋白A（IgA）、白细胞介素-2（IL-2）、白细胞介素-6（IL-6）均采用猪ELISA试剂盒测定，试剂盒均购自北京奇松生物有限公司。

1.4 统计分析试验数据采用SAS 9.2统计分析软件中的MEANS过程进行描述性统计分析，ANOVA过程进行方差分析和Duncan's多重比较，P＜0.05表示差异显著，结果用“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 蚯蚓提取物对成华猪生长性能的影响由表2可知，试验Ⅱ组和Ⅲ组平均日增重较对照组分别提高 4.7%（P ＞ 0.05）和 3.2%（P＞ 0.05），试验Ⅱ组平均日采食量较对照组提高7.3%（P＞0.05），但4个组平均日增重和平均日采食量之间差异不显著（P＞0.05）。试验Ⅲ组料重比较对照组降低12.9%（P＜0.05），且显著低于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组（P ＜ 0.05）。

表2 蚯蚓提取物对成华猪生长性能的影响

2.2 蚯蚓提取物对成华猪血清生化指标的影响由表3可知，试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组血清总蛋白较对照组分别提高 17.2%（P ＜ 0.05）、23.2%（P ＜0.05）和6.1%（P＞0.05）。各试验组血清葡萄糖与对照组相比差异不显著（P＞0.05）。

2.3 蚯蚓提取物对成华猪血清抗氧化指标的影响由表4可知，随着蚯蚓提取物浓度的升高，成华猪血清中乳酸脱氢酶的水平逐渐降低，与对照组相比，试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组血清乳酸脱氢酶的水平分别降低了 54.6%（P ＜ 0.05）、77.6%（P ＜0.05）和80.0%（P＜0.05）。各试验组血清超氧化物歧化酶和总抗氧化能力与对照组相比差异不显著（P ＞ 0.05）。

表3 蚯蚓提取物对成华猪血清生化指标的影响

表4 蚯蚓提取物对成华猪血清抗氧化指标的影响

2.4 蚯蚓提取物对成华猪血清免疫指标的影响由表5可知，与对照组相比，各试验组成华猪血清中补体C3和IgA水平均差异不显著（P＞0.05）。试验Ⅱ组血清中抗炎因子IL-2的水平与对照组相比升高了38.7%（P＜0.05），随着蚯蚓提取物处理浓度的升高，成华猪血清中促炎因子IL-6的水平逐渐降低，其中，试验Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组分别降低了 29.6%（P ＞ 0.05）、42.6%（P ＜ 0.05）和 46.8%（P ＜ 0.05）。

表5 蚯蚓提取物对成华猪血清免疫指标的影响

3 讨论

3.1 蚯蚓提取物对成华猪生长性能的影响猪日粮中添加蚯蚓提取物不但能够显著提高猪对饲料中矿物质的消化吸收，而且还能降低猪的发病率和死亡率（罗绍奎等，2013）。陶延英（2007）研究发现，蚯蚓作为补料可提高断奶小猪增重率65.1%。张泳桢（2016）研究发现，5%的蚯蚓粉代替日粮中部分豆粕猪平均日增重可提高14.61%，料重比降低12.51%。日粮中添加3%的蚯蚓粉，仔猪平均日增重可以提高11.43%，料重比降低11.44%（曾值虎，2013）。傅规玉（2006）研究发现，日粮中添加4%的蚯蚓粉，育肥猪的平均日增重提高13.1%，料重比降低22.5%。本试验研究发现，与对照组相比，蚯蚓提取物组平均日增重和平均日采食量与对照组差异不显著，这与李娟（2018）在伊莎雪佛黑鸡上的研究结果相一致；但本试验中9 mL/kg蚯蚓提取物组成华猪的料重比降低12.9%。综上，推测蚯蚓提取物可能是提高了日粮利用率，但其分子机制尚需进一步研究。

3.2 蚯蚓提取物对成华猪血清生化指标的影响血清生化指标可以反映动物生理代谢水平。血清中的TP可反映动物机体本身营养状况和对蛋白质的消化利用情况，血清TP水平上升表明蛋白质合成代谢增强，将促进蛋白质沉积，从而提高增质量效果（丁鹏等，2018；候海峰，2018）。此外，血清TP含量同瘦肉率呈正相关，血清TP的升高有助于提高机体瘦肉率（孙耀贵和程佳，2013）。本试验研究发现，与对照组相比，3、6 mL/kg和9 mL/kg蚯蚓提取物组血清总蛋白分别升高了17.2%、23.2%和6.1%，这与雷小文（2018）用蚯蚓液饲喂番鸭中所获得的研究结果相一致，表明蚯蚓提取物可以提高成华猪体内蛋白质利用率。

3.3 蚯蚓提取物对成华猪血清抗氧化指标的影响血清LDH水平是反映动物机体遭受应激程度的指标之一，正常情况下，LDH主要存在于细胞质中，机体组织细胞膜通透性增强，细胞内的LDH才会进入血液（牛现琇等，2018）。 Li（2015）研究发现，蚯蚓提取物可以通过抑制LDH的释放进而保护心肌细胞免受脂多糖诱导的细胞凋亡。本试验研究发现，与对照组相比，3、6 mL/kg和9 mL/kg蚯蚓提取物组血清LDH的水平分别降低了54.6%、77.6%和80.0%（P＜0.05），表明日粮中添加蚯蚓提取物能够提高成华猪的抗氧化功能。

3.4 蚯蚓提取物对成华猪血清免疫指标的影响IL-2是由活化的T淋巴细胞产生，又叫T细胞生长因子，能够促进T淋巴细胞分泌TNF-α等其他细胞因子，促进T、B淋巴细胞的增殖与分化，增强机体的细胞免疫和体液免疫应答，具有广谱的免疫增强活性（王留，2018；Xu 等，2018；邹云等，2014）。IL-6是一种重要的促炎因子，其可反映机体损伤的程度（苏家宜等，2017；荀文娟等，2016）。本试验研究发现，6 mL/kg蚯蚓提取物组血清中抗炎因子IL-2的水平与对照组相比升高了 38.7%（P ＜ 0.05），6 mL/kg和 9 mL/kg蚯蚓提取物组促炎因子IL-6的水平与对照组相比分别降低了42.6%和46.8%（P＜0.05），表明蚯蚓提取物可通过影响炎症因子的表达进而提高动物的免疫功能。