孤独症儿童血清中脑源性神经营养因子和S100B蛋白的检测及意义

马菲， 任亮， 陈素环

儿童孤独症是一种以社会交往缺陷、语言交流障碍、狭窄的兴趣范围及重复刻板行为为特征的广泛性神经发育障碍性疾病。目前全球孤独症患病率约为1/68，且呈现逐年上升的趋势[1]。自从20世纪40年代首次报道儿童孤独症以来，经过七十余年的探索，人们已经明确了儿童孤独症主要的行为特征和诊断标准，但其病因至今未明，同时也缺乏特效的治疗药物。

脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factors，BDNF)是脑内分布最广的神经营养因子，主要分布于中枢神经系统，以皮质区和海马区含量为最高。BDNF主要参与中枢神经系统神经元的生长、发育、分化、再生以及修复，维持成熟神经元功能，防止神经元坏死及凋亡[2]。S100B来自S100蛋白家族，在中枢神经系统的少突胶质细胞、星形胶质细胞等神经胶质细胞呈现高表达。S100B蛋白可与炎性细胞、神经细胞、少突胶质细胞等结合，发挥细胞内、外的调节功能，参与炎症相关的趋化活性、神经营养作用、生血管效应等诸多作用[3]。本研究通过对孤独症儿童血清中BDNF和S100B蛋白进行测定，旨在探讨其与孤独症发病是否存在相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2016年3月至2017年9月在漯河市残疾人康复中心参与训练的孤独症患儿35例为研究对象，作为观察组，其中男22例，女13例；年龄1.5～6.0岁，平均(4.3±0.5)岁；轻度孤独症24例，重度孤独症11例。同期在漯河市公立幼儿园募集无神经、精神疾病史及家族史的健康儿童40例作为对照组，其中男25例，女15例；年龄1.3～6.1岁，平均(4.4±0.6)岁。两组儿童在性别、年龄方面比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 诊断标准 参照《精神疾病诊断和统计手册》第5版(DSM-Ⅴ)中儿童孤独症的诊断标准；依据儿童期孤独症评定量表对孤独症儿童病情进行分级[4]。

1.3 纳入标准 (1)符合儿童孤独症的诊断标准；(2)年龄1～7岁；(3)患儿家属知情同意。

1.4 排除标准 (1)患有其他精神疾病或发育异常，如小儿脑性瘫痪等；(2)治疗期间采用药物治疗者；(3)伴心肺等严重疾患及其他急慢性传染病者。

1.5 研究方法 所有儿童均于早晨8点空腹采集肘静脉血3.0 mL，常温静置后以3 000 r/min离心15 min，分离出血清，将溶血标本剔除后-20 ℃保存。血清中BDNF、S100B蛋白的检测按照说明书的要求，采用酶联免疫吸附法进行。

2 结果

2.1 两组血清中BDNF及S100B蛋白的测定结果 见表1。

表1 两组血清中BDNF及S100B蛋白的测定结果

注：与对照组比较，at=2.61，P<0.05。

表1结果表明，观察组血清中BNDF水平显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。两组血清中S100B蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 不同病情孤独症儿童血清中BDNF及S100B蛋白的比较 见表2。

表2 不同病情孤独症儿童血清中BDNF及S100B蛋白的比较

注：与对照组比较，aP<0.05。

表2结果表明，三组血清中BDNF水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。其中轻度孤独症组血清中BDNF高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；重度孤独症组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)；轻、重度孤独症组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组血清中S100B蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

随着研究的逐步深入，人们对孤独症的行为特征及诊断手段取得了重要共识，2013年美国出版的《精神疾病诊断与统计手册》第5版(DSM-Ⅴ)将孤独症谱系障碍归类为神经发育障碍范畴，但对于该疾病的发病机制尚不明确，同时也缺乏特效的治疗药物。目前多数学者多认为孤独症是遗传因素和环境因素共同作用的结果。有数据表明，严重空气污染地区的孕妇产下孤独症患儿的风险是低污染区孕妇的2倍，这说明空气污染(如柴油颗粒、汞、铅、锰、二氯甲烷及复合金属等污染)可能是是导致孤独症的外部因素，而更多研究则倾向于基因功能异常即遗传因素可能才是导致孤独症的主要因素[1]。

自1989年被成功克隆后，人们发现BDNF与多种神经系统疾病的发生、发展及治疗密切相关[5]。如Shinizu等[6]通过研究发现，正常人及治疗后抑郁症患者血清BDNF值明显高于未经治疗的抑郁症患者，而更多的研究表明，BDNF的调节可以参与多种有关抑郁症行为现象[7]。在阿尔茨海默病患者中，BDNF的表达在海马及部分皮质层明显降低[8]，多项研究显示BDNF在阿尔茨海默病死亡患者及部分老年患者大脑中的表达低于健康人群[9]。本研究对孤独症患儿及对照组儿童血清中BDNF进行了测定，结果显示观察组血清BDNF水平显著高于对照组，而在对病情分级后有只有轻度孤独症患儿血清BDNF显著高于对照组儿童，而重度孤独症患儿血清BDNF与对照组比较差异无统计学意义，提示BDNF在孤独症病因及病情探索中具有一定的意义。本研究轻度孤独症患儿血清中BDNF高于重度患儿，可能是由于孤独症患儿脑功能受损后，血清中BDNF表达上调，说明至少在孤独症未达到严重程度时BDNF的影响，而表达上调到一定阶段后，受某种机制影响可能限制了BDNF的表达。

血液中S100B蛋白的水平与颅脑损伤及修复的关系及其在临床研究多有报道[10]。笔者曾经的研究工作亦表明，脑损伤过程及修复与血液中S100B蛋白水平具有相关性，检测脑脊液或(和)血清中S100B蛋白水平可以作为脑组织损伤的指标之一[11]。Al-Ayadhi等[12]报道了孤独症儿童血清中S100B蛋白水平与孤独症病情程度缺乏相关性。本研究未测出孤独症儿童血清中S100B蛋白水平与孤独症病情程度之间的相关性，同时也未得出S100B蛋白在孤独症儿童与对照组之间的统计学差异，这可能与孤独症病例的样本数、类型等诸多因素有关。介于S100B蛋白已经作为一种特异性标志物，应用于临床脑组织损伤及相关疾病的诊断、治疗检测、疾病预后评估等工作，因此S100B蛋白水平与孤独症的相关性尚需进一步研究探索。

综上所述，本研究显示孤独症儿童血清中BDNF水平显著高于对照组儿童，其中轻度孤独症儿童明显高于对照组儿童，而重度孤独症儿童与对照儿童差异无显著性，提示BDNF与孤独症患病发生、发展密切相关，但同时可能还受其他因素的影响。本研究中未发现S100B蛋白水平在孤独症患儿及正常儿童之间的差异，也未发现孤独症患儿血清BDNF和S100B蛋白水平在不同病情之间的差异，说明还需要开展进一步的研究工作。