苏氏圆腹人工繁殖及杂交子代胚胎发育观察

2019-07-03袁宗伟徐鸿飞卢飞麟杨宾兰温守欧

贵州农业科学 2019年6期

关键词：苏氏催产网片

袁宗伟，陈诏，徐鸿飞，卢飞麟，杨宾兰，滕云，温守欧

(广西壮族自治区水产引育种中心，广西南宁 530031)

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

表1 不同处理苏氏圆腹人工催产催产素的使用剂量Table 1 Different artificial oxytocin doses for P.sutchi

1.2.3 鱼苗孵化与出池管理人工授精后，将粘附受精卵的网片(布卵密度为1万～5万粒/m2)均匀摊布于规格为3.0 m×5.0 m×1.0 m的育苗池中。固定网片通过悬挂与池底成一定角度，孵化期间通过水位管调控水位，保持池水深度30～40 cm，每个育苗池中布置气石6～8只以保证溶氧，整个孵化过程采用微流水孵化，出苗前加大换水量。

当胚胎发育至原肠中期(受精6～8 h)时，从附着受精卵的网片上随机剪取 3 cm×3 cm的网布放入白瓷盆中检查，将坏卵和空心卵剔除计数后统计已受精卵数，并计算受精率(已受精卵数占总卵数的百分比)。鱼苗孵出后计算孵化率(为孵出鱼苗数占受精卵的百分比)，出膜完毕后立即下塘，孵化鱼苗按亲本配对分开培育(不区分人工授精方法)，培育40～45 d后出池销售，统计苗种成活率(为培育40～45 d出池苗数占下塘鱼苗数的百分比)。

1.2.4 胚胎发育及胚后发育观察黑色♂×粉色♀杂交子代受精卵受精后，每次均用羽毛随机从网片上刮取100粒受精卵，采用Miotic168KL解剖镜及Miotic200摄像系统进行连续观察和拍摄，受精后至原肠胚期每隔10～15 min观察1次，原肠胚期至出膜期间隔1～2 h观察1次，详细记录各发育时期的重要形态特征，并用Photoshop 7.0处理图片。

2 结果与分析

2.1 催产素不同剂量的催产与孵化效果

人工催产后按照亲鱼产卵情况分为全产、半产和未产。全产指人工授精后鱼体腹部已干瘪，挤压腹部无卵子流出；半产指人工授精后鱼体腹部半瘪，但挤压腹部仍有部分卵子流出；未产指人工授精后鱼体腹部仍膨大，但挤压腹部不能挤出卵子。从表2可知道，仅使用DOM+LHRH-A2催产的亲鱼没有产卵，使用DOM+LHRH-A2+HCG混合后注射可以获得较好的催产效果；第2次注射后8～12 h内进行人工授精均能受精和孵化。其中，以(DOM 8 mg+LHRH-A210 μg+HCG 800 IU)/kg的催产效果最佳，最佳人工授精时间(效应时间)为第2次注射后8～10 h，受精率、孵化率分别达95.3%和83.5%。

2.2 不同人工授精方法的孵化效果

2.3 不同体色亲鱼所产苗种的成活率

2.4 胚胎发育及胚后发育特征

表2 苏氏圆腹的催产与孵化效果Table 2 Oxytocin and hatching effects of P.sutchi

表3 不同人工授精方法苏氏圆腹的孵化效果Table 3 Hatching effects of different artificial insemination methods on P.sutchi

表4 不同体色苏氏圆腹所产苗种的出池成活率Table 4 Out-pond survival rate of fries produced by P.sutchi with different body color

表5 28℃条件下苏氏圆腹胚胎发育时序及主要特征Table 5 Embryonic development time and major characters of P.sutchi at 28℃

注：1，受精卵；2，受精15 min；3，分裂前；4，2细胞；5，4细胞；6，8细胞；7，16细胞；8，32细胞；9，64细胞；10，128细胞；11，多细胞；12，囊胚早期；13，囊胚晚期；14，原肠早期；15，原肠中期；16，原肠晚期；17，神经胚期；18，胚孔封闭；19，体节出现；20，眼基出现；21，眼囊期；22，尾芽期；23，耳囊期；24，晶体出现；25，心脏搏动；26，孵出前期；27，破膜；28，刚出膜；29，孵出1 d；30，孵出3 d。

图1黑色♂×粉色♀杂交子代的胚胎发育过程
Fig.1 Embryonic development process of black ♂×pink ♀ hybrid progenies

2.4.2 仔鱼期刚出膜的仔鱼苗身体无色透明，腹部卵黄囊较大，占其身体的1/2以上(图1-28)，此时鱼苗的游泳能力弱，贴附在网片或其他物体上，偶作间歇上下运动，大多数栖于池底，部分随气石充气形成的水流翻滚，体长3.0 mm左右；10～12 h后活力增加，尾鳍由圆弧形逐渐向上尾形发育，心脏搏动加强，上下颌形成并可活动，体长4.0 mm以上，偶作平游运动；24 h后，在颌部左右长出长短各一的须2对，并不断生长，长须可至消化道末端，卵黄囊缩小，此时体长5.1 mm(图1-29)；2 d后，身体伸长，达6.0 mm，可长时间作平游运动，胃囊、肠道、鳃等器官基本发育成形，上下颌各长出一排尖齿，尾鳍在中部出现分叉，卵黄几近吸收完。

2.4.3 稚鱼期 2.5～3 d后消化道贯通，仔鱼开口摄食，口裂达230 μm，上下颌不断咬合，色素逐渐出现，在消化道后端和肛门之间出现红色斑块(图1-30)；4 d后，尾鳍由上尾向正尾转变，背鳍和腹鳍开始生成；9～10 d稚鱼达15 mm，此时可见鳔点，尾鳍转变成正尾，体色素明显可辨；各器官逐渐发育完全。