黄氏生肌散治疗大鼠口腔溃疡的实验研究*

刘赟 任思秀 季红健 严道南

口腔溃疡是临床常见病、多发病,导致局部疼痛明显,影响患者进食。黄氏生肌散是江苏省无锡市中医医院黄氏喉科的自制制剂,是江苏省非物质文化遗产黄氏喉科祖传秘方,具有清热养阴、生肌止痛的功效,在临床应用中,疗效显著。本文建立口腔溃疡的动物模型,对黄氏生肌散治疗口腔溃疡的效果进行观察。

资料与方法

1 实验药物

黄氏生肌散,由无锡市中医医院喉科提供,研磨后过120目筛。锡类散,由南通精华制药有限公司生产,批号：51130704。40%冰醋酸溶液,由江苏省血吸虫病防治研究所提供。

2 口腔溃疡动物模型的建立

SD大鼠30只,雌雄各半,体重200～250g,给药前后，实验大鼠雌雄分笼饲养,购自江苏省血吸虫病防治研究所实验动物中心。将一小棉球塞入直经为4mm的玻璃管一端(棉球与管口平齐),再将玻璃管放在40%冰醋酸溶液中,使药液浸透棉球,然后将玻璃管的棉球端置于大鼠一侧颊黏膜上烧灼60s,24～48h后观察,大鼠口腔黏膜上出现直经约4mm的溃疡[1]。

3 实验方法

将形成溃疡的30只大鼠随机分为三组,每组l0只,第一组为黄氏生肌散治疗组,第二组为锡类散组,第三组为空白对照组。取黄氏生肌散2mg喷洒于第一组大鼠颊部溃疡面,每日2次,2次喷药时间间隔5h,共用药4d；第二组锡类散组用药方法同上；第三组不用药。每日于第一次用药时肉眼观察溃疡表面感染情况及溃疡周围充血程度,记录溃疡直径变化。第5d处死大鼠,解剖后测量口腔溃疡直径[2]。

4 评定指标

溃疡直径大小。溃疡表面感染情况：I°：表面无明显假膜；Ⅱ°：溃疡表面有薄层黄白色假膜,周围无水肿；Ⅲ°：溃疡表面假膜较厚,且周围伴有炎性水肿。溃疡周围充血程度：I°：充血直径＜lmm；Ⅱ°：充血直径 1～2mm；Ⅲ°：充血直径 2～4mm；Ⅳ°：充血直径＞4mm[3]。

5 统计学处理

应用SPSS 16.0统计软件进行分析。计量资料采用均数±标准差（x¯±s）表示,多个样本均数比较采用方差分析,组间资料进行独立样本t检验,等级资料采用Ridit检验。

结果

1 各组不同时间点大鼠口腔溃疡直径比较,见表1。

*基金项目：江苏省无锡市卫生局青年项目（Q201205）；江苏省中医药管理局项目（LB13006）

表1 各组大鼠口腔溃疡直径变化（mm,x¯±s）

2 各组大鼠溃疡表面感染情况比较,见表2。

表2溃疡表面感染情况（例）

采用Ridit检验,用药第一天和第二天口腔溃疡表面感染程度三组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。用药第三天后,黄氏生肌散组与空白组比较,黄氏生肌散组溃疡表面感染程度轻于空白组,差异有统计学意义（P＜0.05）。黄氏生肌散组与锡类散组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 各组大鼠溃疡周围充血程度比较,见表3。

表3溃疡周围充血程度（例）

采用Ridit检验,用药第一天,第二天溃疡周围充血程度三组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。用药第三天后,黄氏生肌散组与空白组比较,黄氏生肌散组溃疡周围充血程度轻于空白组,差异有统计学意义（P＜0.05）。用药第四天,黄氏生肌散组与锡类散组比较,黄氏生肌散组溃疡周围充血程度轻于锡类散组,差异有统计学意义（P＜0.05）。

讨论

口腔溃疡动物模型制作方法主要有免疫法诱导、创伤性溃疡、细菌感染诱导等模型[4]。本实验采用创伤法,用40%冰醋酸的棉球烧灼口腔黏膜,制备口腔溃疡模型。该模型操作简单易行、定位准确、溃疡直径大小一致、便于观察及测量[5,6]。

口腔溃疡是口腔黏膜的常见疾病,尤其是复发性口腔溃疡,病程长且反复发作,病理改变以口腔局部黏膜溃疡性损害为主[7]。口腔溃疡的发病因素可能有外伤,遗传因素,细菌、病毒感染,免疫功能失调及微循环障碍等，研究发现口腔溃疡多属于自身免疫性疾病,目前缺乏有效的治疗方法[8,9]。而中医认为口腔溃疡的主要病因为火邪。《圣济总录·卷一百一十八》说：“口舌生疮,心脾经蕴热所致也。盖口属脾,舌属心,心者火,脾者土,心火积热,传之脾土,二脏俱蓄热毒,不得发散,攻冲上焦,故令口舌之间生疮肿痛”。《素问·玄机原病式》亦说：“诸痛疮疡,皆属心火”。而素体阴亏,患者素体阴液不足,或久病阴损,虚火内生,灼伤口舌,可至口舌生疮[8-10]。因此,主要临床多从清热泻火法和滋阴降火法治疗[3]。

黄氏喉科是国家中医药管理局确定的首批64家学术流派传承工作室之一,其祖传黄氏生肌散是专门治疗口腔溃疡的吹药,始用于清康熙年间,数百年的临床应用提示该药对口腔溃疡的疗效稳定、可靠、可信。本制剂由雄黄、煅石膏、青黛、黄柏、蒲黄、黄精、甘草、冰片等组成。方中的雄黄是具有解毒杀虫作用的矿物药；黄柏有清热燥湿、解毒疗疮的功效；青黛清热解毒凉血；煅石膏生肌敛疮止血；黄精则益气养阴；甘草清热解毒、缓急止痛；冰片通诸窍、消肿止痛。现代药理研究表明雄黄、青黛有抗菌、抗病毒作用；煅石膏能增加巨噬细胞吞噬能力；黄柏有抗病毒、抗菌、抗炎、抗溃疡、抗氧化、调节免疫等作用；蒲黄具有抗炎作用；黄精对免疫系统有调节作用；甘草有肾上腺皮质激素样作用、抗消化道溃疡、抗炎、调节免疫、抑菌抗病毒；冰片抗炎镇痛[11]。诸药合用共奏清热养阴、生肌止痛等功效。

本实验结果显示,黄氏生肌散组溃疡大小的消退明显优于锡类散组和空白组。黄氏生肌散组溃疡感染情况和溃疡周围充血程度也明显轻于空白对照组。吹药除单纯涂抹于溃疡表面外,还经过大鼠的吞咽动作,通过胃肠道的吸收,从而起到双重疗效。本实验证明黄氏生肌散可以促进溃疡愈合,对口腔溃疡周围充血程度、溃疡表面感染情况有一定的治疗作用,是一种有效的治疗口腔溃疡的药物。