气相色谱-质谱法检测植物油中腐霉利和氟硅唑含量

2019-04-29杨天庆师麟阁

中国油脂 2019年4期

杨天庆，韩娟，龚珊，刘旭，师麟阁，郭靖

(陕西省粮油产品质量监督检验中心，西安 710016)

腐霉利，国际通用名为Procymidone，化学名称N-(3，5-二氯苯胺)-1，2-二基环丙烷-1，2-二羰基亚胺，是20世纪70年代于我国投入使用的二甲酰亚胺类内吸性杀菌剂，主要是抑制菌体内甘油三酯的合成，具有保护和治疗的双重作用，低温高湿条件下使用效果明显。腐霉利可用于多种农作物，对葡萄孢属和核盘菌属真菌有特效[1-3]。氟硅唑，国际通用名为Flusilazole，化学名称双(4-氟苯基)甲基(1H-1，2，4-唑-l-基亚甲撑)硅烷，为保护性和治疗性内吸三唑类杀菌剂，通过抑制或干扰菌体附着胞及吸器的发育、菌丝和孢子的形成，破坏细胞膜结构，从而降低病原菌致病力[4-5]。

随着腐霉利和氟硅唑在农业生产中使用量的增加，其残留也成为人们担心的问题[6]。有研究表明[7]，化学农药在人体内蓄积至一定量将直接危及人体的免疫系统、神经系统、生殖系统、消化系统等，长期低剂量接触农药可使患帕金森氏综合症的风险提高70%，农药接触导致的恶性疾病还包括骨髓瘤、唇癌、胃癌、皮肤癌等，因此如何快速高效地检测出农产品中农药残留量至关重要。

关于粮油产品中腐霉利和氟硅唑的检测方法有高效液相色谱法、气相或液相色谱-质谱联用法等多种方法[8-12]。Soares等[13]分别用4种萃取方法从人参提取物中萃取腐霉利，采用高效液相色谱法检测，发现水溶解-石油醚超声萃取腐霉利的方法有较高的提取率，干扰峰少。陈章明等[14]采用高效液相色谱法，以甲醇-水(体积比85∶15)为流动相，流速为1 mL/min，220 nm为检测波长，对样品中氟硅唑进行液相色谱测定，分离效果好，精密度与准确度高。Fulgêncio等[15]利用微分脉冲和方波伏安法测定了巴西苹果中的腐霉利残留量。Araújo等[16]利用低温固液萃取技术萃取胡萝卜样品中的腐霉利，通过GC-MS检测出有10%的样品腐霉利农药残留超标。Korba等[17]采用顶空固相萃取技术测定红葡萄酒的农药残留。但是有关植物油中腐霉利和氟硅唑检测的研究较为鲜见。本研究选用QuEChERS快速净化小柱对植物油样品进行前处理，对植物油中腐霉利和氟硅唑含量的测定方法进行了验证，以期为植物油产品中腐霉利和氟硅唑农药含量的测定提供参考。

1 材料与方法

1.1 实验材料

植物油；乙腈，色谱纯；环氧七氯(BePure，160906)，纯度>99%；腐霉利标准品(AccuStandard，217091251)，纯度>99%；氟硅唑标准品(AccuStandard，216021251-01)，纯度>99%。

气相色谱-质谱仪，配有电子轰击源(EI)；分析天平；涡旋混合器；高速离心机，离心管；QuEChERS快速净化小柱；移液器；旋转蒸发仪。

1.2 实验方法

1.2.1 样品处理

1.2.1.1 样品的提取

称取4.0 g植物油置于20 mL离心管中，加入20 mL乙腈，于涡旋混合器上涡旋20 min进行提取，再置于高速离心机5 000 r/min离心5 min，取上清液14 mL待净化。

1.2.1.2 样品的净化

取1.2.1.1待净化液过QuEChERS快速净化小柱，然后取10 mL于35℃水浴中旋转蒸干，用1 mL乙腈溶解，取900 μL加入100 μL环氧七氯溶液供气相色谱-质谱仪分析测定。

1.2.2 气相色谱-质谱测定条件

HP5MS石英毛细管柱，30 m×0.25 mm(内径)，膜厚0.25 μm；柱温，80℃保持1 min，以10℃/min升至250℃并保持10 min；进样口温度230℃；检测温度250℃；柱流量2 mL/min；分流比5∶1；色谱质谱接口温度280℃；载气为氦气，纯度大于等于99.995%，流量1.0 mL/min；进样量1.0 μL；进样方式，无分流进样，1 min后开阀；EI电离方式；电离能量70 eV；选择离子监测方式(SIM)；监测离子(m/z)为96，254，283，285；定量离子(m/z)为285；溶剂延迟8 min。

2 结果与分析

2.1 QuEChERS快速净化小柱的选择

QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)是近年来国际上发展起来的一种用于农产品检测的快速样品前处理技术。原理与高效液相色谱(HPLC)和固相萃取(SPE)相似，都是利用吸附剂填料与基质中的杂质相互作用，吸附杂质从而达到除杂净化的目的。QuEChERS方法有以下优势[18]：①回收率高，对大量极性及挥发性的农药品种的回收率大于85%；②精确度和准确度高，可用内标法进行校正；③可分析的农药范围广，包括极性、非极性的农药种类均能利用此技术得到较好的回收率；④分析速度快，能在30 min内完成6个样品的处理；⑤溶剂使用量少，污染小，价格低廉且不使用含氯化物溶剂；⑥操作简便，无需良好训练和较高技能便可很好地完成；⑦乙腈加到容器后立即密封，使其与工作人员的接触机会减少；⑧样品制备过程中使用很少的玻璃器皿，装置简单。因此，本文采用QuEChERS快速净化小柱对植物油样品进行前处理。

2.2 方法验证

2.2.1 加标回收率

分别称取3份空白植物油样品，做低、中、高3个添加量的加标回收实验，每个添加量做3个重复实验，计算加标回收率，结果见表1。

表1 回收率实验结果

由表1可见，在不同加标量下，腐霉利平均回收率分别为85.0%、89.0%和96.0%，氟硅唑平均回收率分别为88.3%、89.2%和94.1%。回收率均达到GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》标准中附录F对回收率的要求。

2.2.2 精密度实验

根据低、中、高3个添加量的加标回收实验中所测定的结果计算本实验精密度，结果见表2。由表2可见，在3种不同添加量下腐霉利的实验室内变异系数(CV)分别为1.7%、1.5%、8.9%，氟硅唑的分别为6.8%、2.7%、2.1%，实验室内变异系数均达到GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范食品理化检测》标准中附录F对精密度的要求。